糞便基因組DNA提取試劑盒(Stool DNA Extraction Kit)
存儲室溫(15℃-25℃) 干燥保存,有效期12個月,2℃-8℃保存時間更長!咀ⅰ吭噭┖虚_封后溶液A、B 、C 、D 需在2-8℃保存。
貨號&規(guī)格
YJ0219-50 | 50T
YJ0219-100 | 100T
產(chǎn)品組分
試劑盒內(nèi)容 YJ0219-50(50T) YJ0219-100(100T)
溶液A 25mL 50mL
溶液B 3mL 6mL
溶液C 5mL 10mL
溶液D 10mL 20mL
漂洗液 15mL 15mL×2
洗脫液 15mL 30mL
吸附柱 50個 100個
收集管 50個 100個
說明書 1份 1份
產(chǎn)品簡介
本試劑盒適合于從各種糞便中提取微生物DNA。對糞便中各種細菌、真菌有很好裂解效果,最大限度的保留了微生物DNA的多態(tài)性。
使用本試劑盒提取的DNA產(chǎn)量大、完整性好,可直接用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR 、文庫構(gòu)建、Southern 雜交等實驗。
使用說明
使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶體上的標簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。
1、稱取糞便樣本 0.1-0.5g,在液氮中充分研磨成細粉末,加入 450ul 溶液A 震蕩混勻。
* 也可直接稱取樣本 0.1-0.5g 于離心管( 建議使用 2ml 圓底管) ,加入 450ul 溶液 A 劇烈震蕩混勻 1-2min 至沒有固體塊。 使用液氮研磨效果最佳。
2 、加入50ul 溶液B 充分顛倒混勻( 不要劇烈震蕩),65℃水浴 6min,每2min充分顛倒混勻一次。
3 、加入100ul 溶液C 充分顛倒混勻( 不要劇烈震蕩),12000 rpm 離心10min 。
4 、將上清轉(zhuǎn)移到新的離心管,12000rpm離心2min 。
5 、在吸附柱中加入 200ul 溶液D ,將離心后的上清加入到帶有溶液 D 的吸附柱中,用移液器吹吸幾次混勻,12000 rpm 離心1min。
6 、將收集管中的濾出液混勻后重新吸入吸附柱( 必須),12000 rpm 離心1min。
7 、倒掉收集管中的廢液,在吸附柱中加入漂洗液 500ul,12000 rpm 離心1min。
8 、倒掉收集管中的廢液,重復步驟 7 兩次(共漂洗三次)。
9 、倒掉收集管中的廢液,將吸附柱放回收集管,12000 rpm 離心2min 。
10、拿出吸附柱在室溫干燥數(shù)分鐘( 因季節(jié)及氣候等因素不等),或50℃干燥1min。
11 、將吸附柱放入一個新的離心管中,加入 50-100ul 洗脫液(65 ℃預熱),12000 rpm 離心1min。
12、將離心管中的液體重新加入到吸附柱中,12000 rpm 離心1min。離心管中即為糞便微生物 DNA 溶液。
注意事項
1 、新鮮的糞便樣本會得到更高的產(chǎn)率,不同樣本在采樣前應先查閱相應的最佳保存條件。
2 、若溶液中出現(xiàn)渾濁可在 37℃水浴中溶解片刻至清澈,不會影響結(jié)果。
3 、在需要吸取上清液的步驟中應避免吸到沉淀,否則會堵塞吸附柱,并影響產(chǎn)物純度。
4 、洗脫緩沖液的體積最好不少于 50ul ,體積過小會影響回收效率;建議使用試劑盒附帶的洗脫緩沖液,用水洗脫也會損失部分產(chǎn)物;DNA應保存在-20 ℃避免反復凍融,以防降解。
5 、 液體試劑避免接觸皮膚,若意外接觸應立即使用大量清水沖洗。