產(chǎn)生針對特定抗原的大量靶向抗體的過程。單克隆抗體是通過稱為雜交瘤的特定細胞的多個/相同拷貝產(chǎn)生的。為了產(chǎn)生雜交瘤細胞，需要將2個細胞融合，以便將2個細胞的特征結合到1個細胞中。其中一種細胞是生產(chǎn)細胞抗體，它是來自實驗室小鼠的B淋巴細胞，另一種是腫瘤細胞，稱為骨髓瘤。腫瘤細胞具有無限生長的能力，并且以超過正常細胞生長的速度生長。Laboratroy生產(chǎn)的雜交瘤細胞比正常的抗體生產(chǎn)細胞復制快得多，并且單個雜交瘤無限期地生產(chǎn)特異性抗體。

雜交瘤細胞產(chǎn)生初由B淋巴細胞產(chǎn)生的特異性單克隆抗體。原始B淋巴細胞將產(chǎn)生單克隆抗體，這取決于在收獲B淋巴細胞之前注射入小鼠的抗原種類。一個小例子是，如果給老鼠注射某種病毒，老鼠體內的B淋巴細胞會產(chǎn)生特定的病毒抗體。與腫瘤細胞融合產(chǎn)生雜交瘤，導致產(chǎn)生針對特定病毒的單克隆抗體。

雜交瘤細胞被置于能幫助它們生長并產(chǎn)生大量單克隆抗體的培養(yǎng)基中。培養(yǎng)單克隆抗體有兩種方法，一種是在實驗室燒瓶中培養(yǎng)，即體外培養(yǎng)，另一種是在小鼠的胃壁中培養(yǎng)。將雜交瘤注射到小鼠體內是獲取單克隆抗體的常見方法。該方法通過將來自用所需抗原免疫的小鼠的脾細胞與骨髓瘤細胞混合來完成。骨髓瘤細胞需要失去合成HGPRT酶(次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉移酶)的能力，該酶使細胞能夠利用細胞外的次黃嘌呤源作為前體來合成嘌呤。細胞有另一種合成嘌呤的途徑，因此缺乏HGPRT對細胞來說不是問題，但當細胞暴露于氨基蝶呤時，它們不能利用這種其他途徑，完全依賴HGPRT生存�？偠�言之，未融合的骨髓瘤細胞不能生長，因為它們缺乏HGPRT，未融合的正常脾細胞也不能生長，因為它們的壽命有限。雜交瘤細胞無限生長，因為脾細胞伴侶提供HGPRT，而骨髓瘤伴侶是永生的。

步是將細胞融合混合物轉移到含有次黃嘌呤、氨基蝶呤和嘧啶胸苷的HAT培養(yǎng)基中。2釹步是檢測每種培養(yǎng)物的上清液，以確定產(chǎn)生所需抗體的位置。必須從每個抗體陽性培養(yǎng)物中分離出單細胞，并對其進行傳代培養(yǎng)，這代表其抗體是單克隆的克隆。每個單細胞培養(yǎng)物分泌一種特定類型的抗體，該抗體針對特定的決定簇/選擇的抗原。3注冊營養(yǎng)師步是擴大成功克隆的培養(yǎng)規(guī)模。雜交瘤培養(yǎng)物可以在體外培養(yǎng)容器中無限生長，產(chǎn)量為15-65 g/ml，在體內使用小鼠，血清中的抗體濃度為0.5-15 mg/ml。在過去的幾年里，世界范圍內的動物福利活動家正試圖限制使用老鼠來生產(chǎn)單克隆抗體。當單克隆抗體產(chǎn)生時，它可以用作探針來追蹤、結合和純化誘導其形成的特定蛋白質。

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