1．2．2DZP(DiazepamTablets，***片)：京衛(wèi)藥準(zhǔn)字(1996)第154011號(hào)，北京益民制藥廠出品。***36片，研缽粉碎后以雙蒸水溶解，加入2％羧甲基纖維素鈉1～2滴充分混勻，配成10％濃度。4攝氏度保存，使用前混搖均勻。

1．3行為學(xué)測(cè)試儀器大鼠高架十字迷宮(EPM)：采用國際通用方法制作。由兩個(gè)相對(duì)的開放臂(openaim，長(zhǎng)X寬分別為50cmX10cm)、兩個(gè)相對(duì)的封閉臂(enclosedarm，closeaITI1，長(zhǎng)X寬×高分別為50cm×10cm×40cm)、一個(gè)連接四只臂的中央平臺(tái)(centralplatform，10cm×10cm)(即：開放臂一中央平臺(tái)一開放臂或封閉臂一中央平臺(tái)一封閉臂，此二者互相垂直成為“十”(plus)形狀)和圍繞在開放臂邊緣的1cm高的矮擋板組成(目的是防止動(dòng)物在探究過程中不慎滑下迷宮)。本迷宮由國產(chǎn)有機(jī)玻璃制作(8mm厚，北京眾實(shí)迪創(chuàng)科技發(fā)展有限責(zé)任公司提供).有機(jī)玻璃部分整體固定于(由黑色等長(zhǎng)寬的“十”木架和不銹鋼可升降底座組成的)支架上，使迷宮底板調(diào)節(jié)到距實(shí)驗(yàn)室地面50cm處。

2．1動(dòng)物處置及分組大鼠每籠7～8只，不限食水。光照節(jié)律12L：12D(6：00～18：00)，室溫(18±2)℃，保持安靜。將大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照、DZP、SZRTI、II、m、IV共6組，每組15只。其中中藥I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組分別按3．75g／kg／d、7．5g／kg／d、15g／kg／d、30g／kg／d給予SZRT灌胃，DZP組給予1mg／kg灌胃，空白對(duì)照組灌服等容積的生理鹽水。各組連續(xù)給藥10d，于第10d在末次給藥2h后8：o0～14：00Am做行為測(cè)試。所有動(dòng)物均提前2h進(jìn)入測(cè)試實(shí)驗(yàn)室。

2．2行為學(xué)測(cè)試

2．2．1測(cè)試條件實(shí)驗(yàn)室內(nèi)光線昏暗(以1．5m距離處能區(qū)分大鼠細(xì)微活動(dòng)的最低亮度為準(zhǔn))并保持恒亮，室溫20~C左右，保持安靜。測(cè)試箱放置于實(shí)驗(yàn)室一角，周圍布以2m高黑色單調(diào)背景。實(shí)驗(yàn)過程中有一名人員搬運(yùn)動(dòng)物，2名事先經(jīng)過實(shí)驗(yàn)記錄培訓(xùn)但不熟悉分組情況的人員在距離測(cè)試箱1．5m處分別觀察記錄動(dòng)物的活動(dòng)。

2．2．2測(cè)試指標(biāo)迷宮測(cè)試前將每只大鼠放入一個(gè)60cm×60cm×35cm塑料盒中，任其自由探究5min后迅速置于EPM的中央平臺(tái)處，使其頭部正對(duì)其中一個(gè)開放臂，釋放后即開始記錄下述指標(biāo)：①進(jìn)入開放臂次數(shù)(openarlnentry，OE)：進(jìn)入到任一開放臂的次數(shù)，以大鼠四個(gè)爪子均進(jìn)入到臂內(nèi)為準(zhǔn)，中途一個(gè)爪子從該臂中完全退出則為該次進(jìn)入活動(dòng)完成；②進(jìn)入開放臂時(shí)間(openarlntime，OT)：進(jìn)入開放臂的時(shí)間，單位：秒；③進(jìn)入封閉臂次數(shù)(cl0seariBentry，CE)：進(jìn)入到任一封閉臂的次數(shù)，以大鼠四個(gè)爪子均進(jìn)入到臂內(nèi)為準(zhǔn)；④進(jìn)入封閉臂時(shí)間(cl0searlntime，CT)：進(jìn)入封閉臂的時(shí)間，單位：秒；⑤向下探究次數(shù)(head—dipping)：大鼠置身于中央平臺(tái)或開放臂時(shí)，一邊用前爪握住迷宮邊緣一邊把頭部和肩部伸出開放臂的邊緣向迷宮下面探究的行為次數(shù)；⑥封閉臂后腿直立次數(shù)(rearing)：大鼠在封閉臂前腿抬起以后腿支持使身體豎立的次數(shù)。由①～④分別計(jì)算出：①進(jìn)入開放臂和封閉臂的總次數(shù)(OE+CE)：表示大鼠的運(yùn)動(dòng)活力(1ocomotoractivitv)：②進(jìn)入開放臂次數(shù)比例(OE％)：即開放臂進(jìn)入次數(shù)／(OE+CE)×100％；③開放臂停留時(shí)間比例(OT％)，即開放臂停留時(shí)間／(OT十CT)×100％。每只大鼠測(cè)試5min。中間用濕布擦拭迷宮，清除糞便，繼用干布擦凈后再進(jìn)行下一只大鼠的測(cè)試。

 

2．3數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)處理所得數(shù)據(jù)均用SPSSl1．0forwindows軟件統(tǒng)計(jì)處理，采用單因素方差分析(one—wayANOVA)進(jìn)行檢驗(yàn)。

 

酸棗仁湯(SZRT)現(xiàn)代臨床除治療失眠癥外，還用于以情緒或神志障礙為主要表現(xiàn)的精神神經(jīng)系統(tǒng)疾病。焦慮癥是一種以廣泛和持續(xù)焦慮或反復(fù)發(fā)作的驚恐不安為主要特征的神經(jīng)癥，常伴以頭暈、胸悶、心悸等植物神經(jīng)功能癥狀和運(yùn)動(dòng)性緊張，一般屬于中醫(yī)“心神不寧”的范疇，臨證可從調(diào)神角度辨治。SZRT具有養(yǎng)心安神、清熱除煩功效，與目前中醫(yī)治療焦慮癥的基本治法相吻合，其在精神疾病方面的臨床有效運(yùn)用也提示本方可能具有潛在的抗焦慮效用。

 

本研究引入的高架十字迷宮模型，為抗焦慮研究中公認(rèn)的非條件反射模型。它利用動(dòng)物對(duì)新異環(huán)境的探究特性相對(duì)高懸敞開臂的恐懼心理，形成動(dòng)物的矛盾行為，實(shí)驗(yàn)指標(biāo)以進(jìn)入開放臂的百分?jǐn)?shù)(OE％)和在開放臂停留時(shí)間的百分?jǐn)?shù)(OT％)反映動(dòng)物的焦慮狀態(tài)，焦慮動(dòng)物的OE％和OT％明顯降低，經(jīng)典抗焦慮藥物則使兩者升高；開放臂和中央平臺(tái)區(qū)head—dipping次數(shù)則反映了在非保護(hù)區(qū)內(nèi)的探索行為，代表動(dòng)物對(duì)陌生環(huán)境的好奇探究或因恐懼而尋求逃避，與焦慮程度有一定相關(guān)性；開放臂和封閉臂總進(jìn)入次數(shù)反映動(dòng)物總的運(yùn)動(dòng)能力，封閉臂rearing值也可用來觀察藥物有無鎮(zhèn)靜作用及鎮(zhèn)靜強(qiáng)度，但多年來關(guān)于抗焦慮藥究竟如何影響這兩個(gè)指標(biāo)一直存在爭(zhēng)議。

 

本實(shí)驗(yàn)觀察到：SZRT7．5g／kg可顯著增加EPM大鼠OE％和OT％值，明顯提高大鼠在開放臂和中央平臺(tái)區(qū)head—dipping次數(shù)及封閉臂的rearing值；15g／kgSZRT可增加EPM大鼠OE％和head—dipping次數(shù)，但對(duì)OT％影響不明顯；與空白對(duì)照組比較，SZRT3．75g／kg、30g／kg對(duì)OE％、OT％、head．dipping和rearing影響均不明顯。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：SZRT在7．5g／kg～15g／kg劑量范圍內(nèi)，具有一定的抗焦慮效應(yīng)，與DZP的作用方向一致，從對(duì)EPM大鼠各項(xiàng)指標(biāo)影響結(jié)果看，以7．5g／kg劑量效果最優(yōu)，而在3．75／kg及3Og／kg劑量時(shí)SZRT幾乎不表現(xiàn)抗焦慮效用。

 

本研究證實(shí)：中藥酸棗仁湯確有抗焦慮作用．從小劑量開始此效用逐漸增強(qiáng)，但達(dá)到一定劑量后，抗焦慮效應(yīng)并不再伴隨劑量的增加而增強(qiáng)，這與一般化學(xué)藥物所遵循的量效關(guān)系規(guī)律不同，其發(fā)生機(jī)制尚有待進(jìn)一步研究。