下肢缺血試驗(yàn)應(yīng)用血管新生是缺血性心血管疾病血流阻塞后改善血流灌注的重要機(jī)制。然而,目前臨床上尚缺乏一種簡(jiǎn)單、無(wú)創(chuàng)和特異的直接評(píng)價(jià)血管新生的方法。下肢缺血試驗(yàn)是進(jìn)行血管新生評(píng)價(jià)的重要試驗(yàn)。方法是使用大鼠或小鼠予結(jié)扎一側(cè)下肢股動(dòng)脈制備下肢缺血模型,另一側(cè)下肢作為對(duì)照組。術(shù)后使用激光多普勒血流成像儀對(duì)雙后肢進(jìn)行掃描成像,分析后肢血流量。然后每周對(duì)雙后肢進(jìn)行掃描成像,分析后肢血流恢復(fù)狀況。
下肢缺血試驗(yàn)是進(jìn)行缺血性心血管病與治療性血管新生研究的重要方法,可以將促血管新生因子注入體內(nèi),促進(jìn)缺血局部血管新生與側(cè)支循環(huán),改善組織的血液供應(yīng)與功能,進(jìn)而評(píng)價(jià)促血管新生因子的作用。促血管新生因子可以是促血管新生藥物、蛋白、基因和干細(xì)胞治療。
除心臟血管疾病研究外,還可使用下肢缺血試驗(yàn)評(píng)價(jià)糖尿病、外周血管疾病、傷口愈合等方面的血管新生研究。
所需設(shè)備
MoorLDI2-HIR點(diǎn)掃描激光多普勒血流成像(Gene&I,北京) AMG小動(dòng)物麻醉機(jī)(Gene&I,北京)
剃毛刀和脫毛膏
試驗(yàn)過(guò)程
將大鼠或小鼠使用麻醉機(jī)進(jìn)行麻醉。
將后肢使用脫毛膏進(jìn)行脫毛處理。
剪開其中一側(cè)后肢皮膚,分離肌肉分離出股動(dòng)脈。
使用縫合線在緊貼腹股溝處對(duì)股動(dòng)脈進(jìn)行結(jié)扎。
縫合傷口,使用激光多普勒掃描儀對(duì)雙下肢進(jìn)行血流掃描成像。
分析缺血側(cè)下肢與正常側(cè)血流灌注量對(duì)比。
試驗(yàn)結(jié)果
手術(shù)后當(dāng)天,缺血側(cè)肢體相對(duì)于正常側(cè)缺血率可達(dá)80-90%。
在使用促血管新生因子后,可觀察到缺血側(cè)肢體血流恢復(fù)過(guò)程。
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軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院6所
復(fù)旦大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院
華東師范大學(xué)
北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部
中科院生物物理所
四川大學(xué)華西再生醫(yī)學(xué)研究中心
四川醫(yī)科大學(xué)