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用顯微鏡如何用割斷法進(jìn)行觀察

瀏覽次數(shù):3643 發(fā)布日期:2015-3-31  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

如果顯微鏡樣品以苯乙烯樹(shù)脂做為包埋劑,再行割斷法做掃描電鏡觀察是十分方便的。因?yàn)楸揭蚁┚酆虾螅趸┘按姿岙愇焖岬群苋菀讓⑵淙芙,多次更換溶劑便可將苯乙烯清除干凈.因此,在制做透射電鏡標(biāo)本時(shí),多做出幾個(gè)包埋膠囊樣品,待聚合后,顯微鏡按上述方法割斷,麥克奧迪顯微鏡將割斷好的樣品放在氧化丙烯中,約2小時(shí)后便可經(jīng)醋酸異戊醋置換、臨界點(diǎn)干操。

顯微鏡價(jià)格除樹(shù)脂割斷法外,尚有有機(jī)溶劑(酒精、醋酸異戊醋等)割斷法,顯微鏡水溶性包埋劑(二甲基亞礬、甘油等)割斷法及其它(冷凍、奴里昂等)割斷法,操作都很容易。再以酒精割斷法為例:樣品固定后用酒精脫水。當(dāng)脫水完成后,顯微鏡將樣品投入頂先裝有無(wú)水乙醉的膠囊中(避免出現(xiàn)氣泡)。顯微鏡將膠囊放在低溫裝里內(nèi)使乙醉固化.進(jìn)行樣品割斷。割斷的樣品立即進(jìn)入置于室溫的無(wú)水乙醉中,待乙醉融化后移入醋酸異戊酷、進(jìn)行臨界點(diǎn)干操。

需指出的是經(jīng)割斷法制備的標(biāo)本需要用高分辨率的顯微鏡(如場(chǎng)發(fā)射電子槍掃描電鏡)進(jìn)行觀察.一般的掃描電鏡分辨率低于透射電鏡,若用顯微鏡鏡割斷法觀察組織、細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu),以和透射電鏡圖相對(duì)比,必須用場(chǎng)發(fā)射電子槍掃描電鏡.由于顯微鏡立體感較強(qiáng),割斷樣品在鏡下顯現(xiàn)出高爾基扁平囊與大泡、小泡的空間分布,線(xiàn)粒體蠟像隔板一樣伸展;核搪體像小蘑菇一樣附著在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)“板”上。盡管如此,有些學(xué)者認(rèn)為偏光顯微鏡割斷法并未提供細(xì)胞結(jié)構(gòu)的新信息。因此該方法應(yīng)用不廣泛。

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