毛細(xì)管電泳（Capillary electrophoresis，CE）--分離分析方法

CE是在傳統(tǒng)的電泳技術(shù)基礎(chǔ)上于本世紀(jì)60年代末由Hjerten發(fā)明的，其利用小的毛細(xì)管代替?zhèn)鹘y(tǒng)的大電泳槽，使電泳效率提高了幾十倍。此技術(shù)從80年代以來(lái)發(fā)展迅速，是生物化學(xué)分析工作者與生化學(xué)家分離、定性抗原肽與蛋白 類物質(zhì)的有利工具。CE根據(jù)應(yīng)用原理不同可分為以下幾種；毛細(xì)管區(qū)帶電泳Capillary Zone electrophoresis，CZE）、毛細(xì)管等電聚焦電泳（Capillary Isoeletric Focusing，CIEF）毛細(xì)管凝膠電泳（CapillaryGelElectrophoresis，CGE）和膠束電動(dòng)毛細(xì)管層析（Micellar Electokinetic Electrophoresis Chromatorgraphy,MECC）等。

1 毛細(xì)管區(qū)帶電泳（Capillary Zone Electrophoresis，CZE）

CZE分離多肽類物質(zhì)主要是依據(jù)不同組分中的化合物所帶電性決定，比傳統(tǒng)凝膠電泳更準(zhǔn)確。目前存在于CZE分離分析多肽物質(zhì)的主要問(wèn)題是天然蛋白 或肽易與毛細(xì)管硅膠柱上的硅醇發(fā)生反應(yīng)，影響峰形與電泳時(shí)間，針對(duì)這些問(wèn)題不少學(xué)者做了大量實(shí)驗(yàn)進(jìn)行改進(jìn)，如調(diào)節(jié)電池泳液的PH值，使與硅醇反應(yīng)的極性基團(tuán)減少；改進(jìn)毛細(xì)管柱材料的組成，針對(duì)抗原肽性質(zhì)的不同采取不同的CZE方法研究分離5個(gè)含9個(gè)氨基酸殘基的小肽，確定了小肽分析的基本條件，即在低PH條件下，緩沖液中含有一定濃度的金屬離子如Zn2+等，此時(shí)分離速度快而且準(zhǔn)確。

2細(xì)管等電聚電泳（Capillary Isleletric Focusing,CIEF）

由于不同的蛋白 、多肽的等電點(diǎn)（PI）不同，因此在具有不同pH梯度的電泳槽中，其可在等電點(diǎn)pH條件下聚集沉淀下來(lái)，而與其他肽類分離開(kāi)來(lái)。CIEF在分離、分析混合抗原肽物質(zhì)中應(yīng)用不多，主要應(yīng)用與不同來(lái)源的多肽異構(gòu)體之間的分離，如對(duì)rHG不同異構(gòu)體分離。由于在CIEF柱表面覆蓋物的不穩(wěn)定性限制了此法的廣泛應(yīng)用。

3毛細(xì)管凝膠電泳 (Capillary Gel Electrophoresis,CGE)

CGE是基于分子篩原理，經(jīng)十二烷基磺酸鈉（SDS）處理的蛋白 或多肽在電泳過(guò)程中主要靠分子形狀、分子量不同而分離。目前，又有一種非交聯(lián)歡、線性、疏水多聚凝膠柱被用于多肽物質(zhì)的分離分析，此電泳法適于含疏水側(cè)鏈較多的肽分離，這種凝膠易于灌注，使用壽命長(zhǎng)，性質(zhì)較為穩(wěn)定。

4膠束電動(dòng)毛細(xì)管層析（Micellar Electrokinetic Electorphoresis Chromatography,MECC）

MECC的原理是在電泳液中加入表面活性劑，如SDS，使一些中性分子帶相同電荷分子得以分離。特別對(duì)一些小分子肽，陰離子、陽(yáng)離子表面活性劑的應(yīng)用都可使之形成帶有一定電荷的膠束，從而得到很好的分離效果。http://www.ontoresinc.com/ 有文獻(xiàn)報(bào)道在電解液中加入環(huán)糊精等物質(zhì)，可使用權(quán)含疏水結(jié)構(gòu)組分的多肽選擇性與環(huán)糊精的環(huán)孔作用，從而利用疏水作用使多肽得到分離。