自動化的過程相對于手工操作可以把誤差降至最低,保證了重復性。
如上圖所示,使用BlotCycler 平行處理5 張膜,檢測Tubulin 和IL-2蛋白,條帶信號使用分子量標準進行均一化處理,
目的條帶的相對信號值在5 次實驗中的偏差較小。由此可見,BlotCycler 的自動化操作能夠保證較好的重復性
專利的流體技術降低背景,提高信噪比和相對靈敏度
通過一系列對比實驗發(fā)現(xiàn),使用BlotCyclerTM 進行Western Blot 可以獲得更低的背景值,目的蛋白質條帶更加清晰銳利。
如上圖所示,泳道1、2、3 分別上樣Hela 細胞的裂解液、重組的人IL-2 蛋白和前兩者的混合物,加入小鼠源Tubulin
和兔源IL-2 的一抗,以及DyLight549 標記的抗鼠二抗和DyLight649 標記的抗兔二抗。
設立4 組平行實驗:BlotCyclerTM 4℃環(huán)境操作,手工4℃環(huán)境操作,BlotCyclerTM 室溫環(huán)境操作,手工室溫環(huán)境操作,
膜信號檢測使用相應的熒光成像設備。不同組內蛋白條帶的信號通過分子量標準品進行均一化處理。
結果發(fā)現(xiàn),使用BlotCyclerTM 操作所獲得的IL-2 和Tubulin 的相對信號值均高于手工操作,不論是4℃還是室溫環(huán)境。
由此可見,BlotCyclerTM 的自動化操作確實能夠降低背景值,提高信噪比和相對靈敏度。
通過以上對比我們可以看出,BlotCycler全自動化的蛋白質印跡雜交系統(tǒng)可以很好的避免手工所引起的誤差,降低背景,提高信噪比和相對靈敏度,
對從事Western Blot實驗的科研工作者來說是個不錯的選擇。
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