我們知道以往的固定組織或固定細(xì)胞成像揭示了非常多的自然秘密,給了我們很大的啟示,但現(xiàn)在的科學(xué)研究則希望在最真實(shí)的條件下觀察細(xì)胞?v觀顯微鏡的發(fā)展歷史,直到15年前,科學(xué)家主要還是處理死細(xì)胞,F(xiàn)在,活細(xì)胞研究的重要性已經(jīng)越來(lái)越被意識(shí)到。
加拿大McGill大學(xué)成像實(shí)驗(yàn)室主任Claire M. Brown表示:“要達(dá)到這個(gè)研究目的,我們非常需要一個(gè)不損壞細(xì)胞的封閉環(huán)境、且具有比較理想的成像條件。這一條件尤其對(duì)于進(jìn)行動(dòng)態(tài)、三維成像的多標(biāo)記樣品來(lái)說(shuō)尤其重要。”讓人高興的是,近年來(lái)在光學(xué)設(shè)計(jì)、高靈敏檢測(cè)器、優(yōu)選探針和先進(jìn)軟件方面的改善,使得這一切成為可能。今天的活細(xì)胞工作站,不僅僅限于觀察,目前的趨勢(shì)已經(jīng)從結(jié)構(gòu)或細(xì)胞器的分析,轉(zhuǎn)向了功能的相互影響觀察研究。
現(xiàn)在,科學(xué)家可以便利的購(gòu)買(mǎi)到活組織應(yīng)用的整合新設(shè)備,而不用將系統(tǒng)簡(jiǎn)單的拼湊在一起。如GE公司的活細(xì)胞工作站DeltaVision Elite提供適用于活細(xì)胞成像的高分辨率、高靈敏度、全自動(dòng)化設(shè)備。通過(guò)對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行實(shí)時(shí)、長(zhǎng)時(shí)間的成像,觀察細(xì)胞內(nèi)的動(dòng)態(tài)變化過(guò)程,如細(xì)胞的有絲分裂、鈣火花傳導(dǎo)、細(xì)胞運(yùn)動(dòng)和遷移等。同時(shí),搭載全內(nèi)發(fā)射熒光模塊(TIRF)對(duì)分子和膜運(yùn)輸之間的囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)、相互作用成像尤其有用;搭載單分子成像技術(shù),如PALM,STORM等,可實(shí)現(xiàn)超高分辨率成像,分辨率可達(dá)20nm。在照明波動(dòng)中,DeltaVision Elite通過(guò)TruLight均一照明光學(xué)系統(tǒng),控制光照的強(qiáng)度和均一性。計(jì)算機(jī)對(duì)這些變量的完全控制,確保了精確的、可重復(fù)的成像效果。
DeltaVision Elite通過(guò)專(zhuān)利的InsightSSI光源,大幅度的降低光毒性和光損傷,實(shí)現(xiàn)對(duì)活細(xì)胞長(zhǎng)達(dá)500小時(shí)的連續(xù)成像;同時(shí),專(zhuān)利的還原型迭代去卷積技術(shù)保證高分辨率、高靈敏度的圖像獲取。這一系列的專(zhuān)利設(shè)計(jì)在保證高質(zhì)量圖像的同時(shí),實(shí)現(xiàn)了對(duì)活細(xì)胞的長(zhǎng)時(shí)間連續(xù)成像,“魚(yú)”與“熊掌”兼而得之。
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