現(xiàn)代病理學(xué)中免疫組織化學(xué)技術(shù)、電子顯微鏡技術(shù)以及其它細(xì)胞及分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用日益廣泛, 這些技術(shù)要求一定的實(shí)驗(yàn)條件和試劑,如市面上使用廣泛的
徠卡染色機(jī)及其配套的
徠卡透明試劑。相對(duì)而言,組織化學(xué)技術(shù)則具有無需復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)條件和試劑、操作又比較簡單的優(yōu)勢(shì),在臨床病理學(xué)診斷中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。
組織化學(xué)染色的方法很多,這里僅介紹幾種常用的組織化學(xué)染色在病理診斷中的應(yīng)用。
一、膠原纖維的染色
凡是間葉組織細(xì)胞都可產(chǎn)生網(wǎng)織纖維,也可產(chǎn)生膠原纖維,纖維母細(xì)胞是產(chǎn)生膠原纖維的主要細(xì)胞。膠原纖維是結(jié)締組織中的主要纖維,是結(jié)締組織中起支持作用的重要部分,具有一定的韌性和堅(jiān)固性,能抵抗一定的牽引力而不致撕裂。膠原纖維是原膠原互相錯(cuò)開1/4平行排列交聯(lián)成膠原原纖維,膠原原纖維再聚合成較寬的結(jié)構(gòu)。按膠原的化學(xué)成分可分為15種,間質(zhì)中的膠原纖維主要由I、Ⅱ、Ⅲ型膠原組成,新鮮時(shí)呈白色,故又稱為白纖維。在HE染色中呈均一的粉紅色,與周圍間質(zhì)區(qū)分不是很清楚。用
染色液進(jìn)行染色后,便可明顯區(qū)別開來,易于觀察病變時(shí)膠原纖維的變化。
應(yīng)用:
(1)器官硬化性疾病的觀察:如肝硬變、心肌瘢痕的觀察,膠原染色更易于觀察診斷。
(2)瘢痕與淀粉樣物質(zhì)鑒別:前者膠原纖維染色為陽性,后者為陰性。
(3)骨纖維異常增殖病與骨纖維化的鑒別:利用膠原纖維染色可較易觀察前者膠原纖維紊亂,縱橫交錯(cuò),后者較規(guī)則。
二、彈力纖維染色
彈力纖維是結(jié)締組織發(fā)生形成較晚的一種纖維,在創(chuàng)傷修復(fù)中一般在4——5周才有較明顯的彈力纖維形成。彈力纖維艱固、較小而彈性較大,容易伸展,在結(jié)締組織起彈性作用。彈力纖維由彈性蛋白組成,新鮮時(shí)呈黃色又稱黃纖維。彈力纖維纖維分枝連成網(wǎng),折光性強(qiáng),含量多時(shí)在HE染片上呈折光性強(qiáng)的粉紅色,量少的不顯色。故量多時(shí)與膠原纖維不易區(qū)別,量少則不能觀察。彈力纖維染色主要用于觀察彈力纖維有無增生、腫脹、斷裂、破碎及萎縮或缺如等病變。
應(yīng)用:
(1)動(dòng)靜脈的辨認(rèn):在血管病變時(shí)是動(dòng)脈還是靜脈以及是否為血管壁難辨認(rèn)時(shí),彈力纖維染色有助于辨認(rèn)。有彈力板者為動(dòng)脈,有彈力纖維構(gòu)成血管輪廓者為血管。彈力纖維抗損傷能力較強(qiáng),故彈力性纖維構(gòu)成血管輪廓不易損壞。
(2)心血管先天性彈力組織增生,這組疾病有先天性內(nèi)膜炎及冠狀動(dòng)脈的彈力纖維組織增生。彈力纖維染色有助于診斷。
(3)彈力纖維損傷性疾病:這組疾病有肺氣腫、動(dòng)脈粥樣硬化、大動(dòng)脈中層炎癥等,彈力纖維染色有助于這些疾病的觀察診斷。
(4)一些與彈力纖維變化有關(guān)的皮膚疾病的診斷與鑒別診斷:這組疾病有皮膚松馳癥,萎縮性硬化性苔蘚等,其診斷與鑒別診斷常依賴于彈力纖維染色,以觀察彈力纖維變化。
三、色素染色(含鐵血黃素及黑色素)
含鐵血黃素是由漏出于血管外的紅細(xì)胞,被巨噬細(xì)胞吞噬后,分解血紅蛋白產(chǎn)生的顆粒,HE染色為棕黃色,故稱為含鐵血黃素。因有時(shí)與福爾馬林沉渣及黑色素等難相區(qū)別,故做含鐵血黃素染色。
應(yīng)用:
主要用于同其它色素鑒別,若為陽性,顯示陳舊性出血。
黑色素常見于皮膚色素細(xì)胞,惡性黑色素瘤?僧a(chǎn)生黑色素。組織內(nèi)大量存在時(shí)呈棕黑色,易于鑒別。但少量存在時(shí)便難與其它色素相鑒別,須作黑色素染色。
應(yīng)用:
(1)黑色素瘤的診斷與鑒別診斷:腫瘤細(xì)胞內(nèi)色素是否為黑色素,染黑色素有助于確定黑色素性質(zhì)及腫瘤的定性診斷。
(2)血色病與黑便。赫嫫(nèi)有色素沉著,黑色素陰性而含鐵血黃素陽性者可能為前者。