多功能酶標(biāo)儀是現(xiàn)今生物技術(shù)和研究中不可缺少的工具。隨著高通量檢測和微孔板技術(shù)的日漸成熟,多功能酶標(biāo)儀已漸漸成為現(xiàn)今實(shí)驗(yàn)室必備的系統(tǒng)。市場上有很多多功能酶標(biāo)儀的廠家,可謂百花齊放。消費(fèi)者往往會花多眼亂,很難取舍。其實(shí),現(xiàn)今的酶標(biāo)儀主要有兩種光學(xué)技術(shù):一種是利用濾光片技術(shù);另一種是光柵技術(shù)。 前者的技術(shù)發(fā)展比較早,后者則是較近期的技術(shù)。但是兩者其實(shí)各有好處,可以互補(bǔ)不足。而不論是哪種技術(shù),選擇酶標(biāo)儀的第一原則是選擇有最好的信噪比(Signal to Noise Ratio, SNR)。 | |||||||||
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濾光片的好處: | |||||||||
濾光片具有非常好的透光率 (可高于90%),也就是說光能量的損失比較少。如下圖(圖1),在一個熒光檢測中,經(jīng)過濾光片進(jìn)入樣本的激發(fā)光和從樣本透過濾光片進(jìn)入檢測器的發(fā)射光都只有少量的損失(大約10%)。光的損失較少,光的能量自然較大,熒光的信號自然很容易檢測。這是獲得高信噪比(SNR)的最初始保證。 | |||||||||
所以,由于有高的信噪比(SNR)保證,濾光片系統(tǒng)從酶標(biāo)儀誕生以來一直就是高靈敏度檢測的黃金標(biāo)準(zhǔn)。我們也不難發(fā)現(xiàn)很多有光柵型酶標(biāo)儀的廠家在一些檢測靈敏度要求比較高的高端應(yīng)用(如:TRF、TR-FRET、等)中,都會有另外配上濾光片模塊的設(shè)計(jì)。因?yàn)檫@些高端的應(yīng)用,光柵系統(tǒng)未能有滿意的效果或干脆做不到。 | |||||||||
濾光片的缺點(diǎn): | |||||||||
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光柵的好處: | |||||||||
光柵系統(tǒng)的好處就是可隨意選擇波長和進(jìn)行波長掃描,這方便了使用者。現(xiàn)今大部份的研究單位都設(shè)有公用平臺,把一些高端的儀器集中一起管理,高端的多功能酶標(biāo)儀也是其中之一。光柵型的多功能酶標(biāo)儀在公用平臺中為使用者提供了便利,因不需更換和保管濾光片,在儀器管理的層面也比較簡單。 | |||||||||
光柵的缺點(diǎn): | |||||||||
雖然光柵系統(tǒng)帶來方便,但也有一些致命缺點(diǎn)。首先,基于光路設(shè)計(jì)的問題,光柵的光能損失比濾片大很多。如下圖(圖2),在熒光檢測中,光源經(jīng)過光柵而成的激發(fā)光已比原來的少了大概70%的能量。樣本被激發(fā)后會放出發(fā)射光,發(fā)射光會透過光柵去分隔出需要的波長。被分隔后的發(fā)射光能量再損失了70%。假設(shè)熒光被激發(fā)的效率為50%,那么可以進(jìn)入檢測器被檢測的光只有原來光源的 4.5% !! 這就是為什么光柵酶標(biāo)儀的 | |||||||||
靈敏度遠(yuǎn)遠(yuǎn)沒有濾光片酶標(biāo)儀好的原因,也正因?yàn)檫@個原因,在高端光柵型的酶標(biāo)儀也要配備濾光片模塊才能進(jìn)行TRF、TR-FRET等高靈敏度需求的檢測。 |
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集兩家之長? | ||||||||||||||
鑒于市場上開始意識到光柵和濾光片的問題,于是一些酶標(biāo)儀廠家推出了一些稱為混合型 (Hybrid Technology)的型號。這些混合型系統(tǒng)配有濾光片和光柵兩種光路,用戶可以按需要選擇其一去做檢測。這種概念聽起來是不錯,可是實(shí)際上混合型的酶標(biāo)儀并沒有解決濾光片和光柵互有缺點(diǎn)的問題。它只是把兩種技術(shù)放在一起,供使用者選擇,每種技術(shù)本身的問題仍然存在。這種儀器的賣點(diǎn)似是市場推廣的手法較真正解決問題為多。 | ||||||||||||||
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要真正集兩家之長,就是要使酶標(biāo)儀能擁有濾光片的高信噪比同時也擁有光柵的靈活 | ||||||||||||||
性。德國專業(yè)酶標(biāo)儀廠家BMG Labtech剛在今年七月推出了突破性的新技術(shù)—線性漸變?yōu)V光片(LVF)技術(shù)。這個技術(shù)利用漸變?yōu)V光片技術(shù)實(shí)現(xiàn)了光柵的功能,且同時保證了濾光片本身的高信噪比特性。LVF系統(tǒng)既可以隨意挑選波長和進(jìn)行波長掃描。更具突破性的是,LVF技術(shù)完全克服了傳統(tǒng)光柵帶寬選擇的局限性,可按實(shí)驗(yàn)需在8nm-100nm之間選擇任意帶寬(0.1nm遞進(jìn))!也就是說LVF集合了濾光片的高信噪比、更大彈性帶寬選擇的優(yōu)點(diǎn)和傳統(tǒng)光柵波長選擇和波長掃描等所有優(yōu)點(diǎn),諸多優(yōu)點(diǎn)的有機(jī)結(jié)合造就了新一代的多功能酶標(biāo)儀——LVF酶標(biāo)儀。 | ||||||||||||||
現(xiàn)在,LVF酶標(biāo)儀的使用者可以利用LVF技術(shù)像傳統(tǒng)光柵酶標(biāo)儀一樣去自由制定任意波長的濾光片。LVF酶標(biāo)儀與傳統(tǒng)濾光片酶標(biāo)儀相比較,在普通熒光檢測、TRF、TR-FRET等高端領(lǐng)域檢測效果與濾光片系統(tǒng)酶標(biāo)儀同樣出色!LVF技術(shù)是市場上唯一可以改變波長和帶寬的濾光片/光柵,這種特破性的設(shè)計(jì)使LVF酶標(biāo)儀可完成任何波長、任何帶寬、任何檢測的完美檢測! |