morris水迷宮實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)則（3）
|
實(shí)驗(yàn)流程準(zhǔn)則
Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)主要測(cè)定空間學(xué)習(xí)記憶能力，主要的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容有隱蔽站臺(tái)試驗(yàn)、空間探索試驗(yàn)、反向試驗(yàn)和可視站臺(tái)試驗(yàn)等。在這里主要介紹下文獻(xiàn)里面主要做的隱蔽站臺(tái)試驗(yàn)和空間探索試驗(yàn)的流程準(zhǔn)則。
隱蔽站臺(tái)試驗(yàn)：
嚙齒類動(dòng)物第一次游泳時(shí),一般不會(huì)找到藏于水面下的不可見(jiàn)的站臺(tái)。若動(dòng)物在入水游泳60～90s以內(nèi)仍未能找到水池中的站臺(tái)或未能爬上站臺(tái)時(shí),實(shí)驗(yàn)人員可將動(dòng)物引導(dǎo)置于站臺(tái)上站立10～30s,使動(dòng)物體會(huì)站在站臺(tái)上的感覺(jué),這樣從第二次開(kāi)始,學(xué)習(xí)成績(jī)就能迅速提高。動(dòng)物爬上站臺(tái)后,讓動(dòng)物在站臺(tái)上站立5～10s。將大鼠從站臺(tái)上拿下來(lái),休息30～60s以后再進(jìn)行下一次訓(xùn)練。在一般情況下,正常大鼠在經(jīng)過(guò)4～6個(gè)實(shí)驗(yàn)日訓(xùn)練后,很快就學(xué)會(huì)以最快最佳的軌跡搜索到站臺(tái)的確切位置。
每天開(kāi)始時(shí)，將鼠任意從四個(gè)象限（東北、西北、東南、西南）之一面向池壁放入水中，站臺(tái)放置于東南象限， 每次實(shí)驗(yàn)鼠共游泳60～90s來(lái)尋找隱藏的站臺(tái)。如果成功地找到站臺(tái)，鼠可以得到在站臺(tái)上的10～30s休息時(shí)間；如果60～90s內(nèi)未能成功的找到站臺(tái)，就由實(shí)驗(yàn)人員將鼠人工置于站臺(tái)上，且同樣給予10～30s的休息時(shí)間。有時(shí)鼠可能會(huì)在10～30s間隔時(shí)間到達(dá)之前從站臺(tái)上掉下或跳入水中繼續(xù)游泳。一旦這種情況發(fā)生，則將鼠重新放回站臺(tái)，并重新計(jì)時(shí)，使時(shí)間間隔到達(dá)（10～30s）。這樣可以確保每只鼠在每次實(shí)驗(yàn)后有相等的時(shí)間來(lái)觀察和獲取空間信息。
空間探索試驗(yàn)：
隱蔽站臺(tái)試驗(yàn)結(jié)束24h后，撤除站臺(tái)。然后任選一相同入水點(diǎn)將鼠放入水中，記錄鼠在60s或120s內(nèi)的游泳路徑，記錄鼠在原站臺(tái)象限的停留時(shí)間和穿越原站臺(tái)次數(shù)，觀察受試鼠的空間定位能力，及在空間探索過(guò)程中的變化規(guī)律。在電腦屏幕上用圓形環(huán)標(biāo)記出站臺(tái)原所在位置，這樣可以記錄穿越原站臺(tái)所在位置的次數(shù)。
morris水迷宮實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)則（3）：
1、實(shí)驗(yàn)時(shí)間：隱蔽站臺(tái)試驗(yàn)一般設(shè)計(jì)天數(shù)為4天或者6天，如果是年老體弱鼠可以將天數(shù)設(shè)計(jì)為4天。訓(xùn)練時(shí)間一般為60s或90s,也有用120s的，不過(guò)現(xiàn)在一般都改用60s了，有人做過(guò)實(shí)驗(yàn)，大鼠在60～120s之間能夠找到隱藏站臺(tái)的次數(shù)差異大約只占其找到平臺(tái)總次數(shù)的5%, 這在統(tǒng)計(jì)學(xué)上是“小概率事件”。也就是說(shuō), 大鼠在60s內(nèi)找不到隱藏站臺(tái)的話, 再延長(zhǎng)到120s也很難找到。而且60s還可以減小各組的標(biāo)準(zhǔn)差, 可以節(jié)約實(shí)驗(yàn)時(shí)間。但問(wèn)題并非如此簡(jiǎn)單，隱蔽站臺(tái)試驗(yàn)潛伏期應(yīng)采用重復(fù)測(cè)量, 由于在統(tǒng)計(jì)時(shí), 很多研究將最大潛伏期直接納入統(tǒng)計(jì), 顯然, 最大潛伏期的不同將不可避免地影響統(tǒng)計(jì)結(jié)果。所以從統(tǒng)計(jì)學(xué)上了解不同的最大潛伏期到底對(duì)Morris 水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果有多大的影響, 如何避免因此帶來(lái)的系統(tǒng)誤差等問(wèn)題尚有待進(jìn)一步研究。國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道，如果水池的直徑在 2m，可以設(shè)置單次訓(xùn)練時(shí)間為120s,直徑在1m至1.5m,選擇訓(xùn)練時(shí)間為60s, 鑒于此，我們認(rèn)為訓(xùn)練時(shí)間60s較為合適。時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，對(duì)鼠體力消耗也會(huì)過(guò)大。
2、實(shí)驗(yàn)次數(shù)：在隱藏站臺(tái)試驗(yàn)中，每天訓(xùn)練4次，每個(gè)象限每天只被使用一次，一定不要將大鼠連續(xù)地放入同一個(gè)象限，因?yàn)榇笫罂赡軙?huì)憑借位置或其他非記憶信息（如向右轉(zhuǎn)彎）來(lái)定位站臺(tái)。而且，接下來(lái)每天的象限順序應(yīng)當(dāng)改變。在空間探索試驗(yàn)中，將大鼠置于水池中追蹤120s，這個(gè)過(guò)程需要重復(fù)一次，因?yàn)樵谟行┣闆r下，首次實(shí)驗(yàn)會(huì)觀察到一些非正常變量，可能一些老鼠在改變了實(shí)驗(yàn)條件后迷失了方向。連續(xù)進(jìn)行的兩次實(shí)驗(yàn)計(jì)算平均值可以減少偏差，可以提供一個(gè)較高的精度和對(duì)先前學(xué)習(xí)記憶的較好控制。但是如果實(shí)驗(yàn)次數(shù)多于兩次，將會(huì)導(dǎo)致在目的象限活動(dòng)時(shí)間減少，得到不準(zhǔn)確的空間探索結(jié)果。
3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：并非所有鼠株都適合于Morris迷宮測(cè)試，如近交系BALB/c小鼠不能學(xué)會(huì)該任務(wù)（成績(jī)并不隨天數(shù)的增加而進(jìn)步），129/SvJ小鼠的學(xué)習(xí)成績(jī)也偏差；比如129/SvJ株的小鼠由于有年齡相關(guān)性視路病變，在衰老時(shí)完成以視覺(jué)為基礎(chǔ)的學(xué)習(xí)記憶任務(wù)時(shí)就會(huì)出現(xiàn)困難。在C57BL/6鼠，由于嚴(yán)重的禿頭癥存在，可能使某些小鼠產(chǎn)生抑郁，加上潰瘍性皮炎，最終可能影響小鼠的游泳能力而影響實(shí)驗(yàn)成績(jī)；將動(dòng)物浸入水中可能引起內(nèi)分泌或其它應(yīng)激效應(yīng)，后者與腦損害或藥理學(xué)操作間的相互作用具有不確定性；由于體力消耗太大，體溫也喪失過(guò)多，一些年老體弱鼠完成任務(wù)較困難，甚至?xí)l(fā)生溺水死亡的情況；另外，個(gè)體間的成績(jī)差異也巨大，比如說(shuō)，有些正常大鼠放入水中后左右觀望打圈確定方向后直接游到臺(tái)上，說(shuō)明他記憶力比較好，這個(gè)現(xiàn)象是很重要的，有的大鼠游泳速度慢些，所以潛伏期時(shí)間比癡呆組還大。所以可以先用別的方法把大鼠初篩一下，然后再來(lái)跑水迷宮。
4、實(shí)驗(yàn)人員：實(shí)驗(yàn)者應(yīng)與受試動(dòng)物建立良好的感情,讓動(dòng)物熟悉實(shí)驗(yàn)者的身體信息,如氣味、相貌等。捕捉動(dòng)物的動(dòng)作要溫柔,不要刺激動(dòng)物。忌諱用手抓鼠的尾巴,因?yàn)檫@樣會(huì)極大的刺激動(dòng)物。有人建議在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始的兩三天之前,與鼠親密接觸。實(shí)際上鼠的嗅覺(jué)很敏感，如實(shí)驗(yàn)人員為女性的話，其身上的香水味不同，都會(huì)使鼠的情緒發(fā)生變化的 |
來(lái)源：北京眾實(shí)迪創(chuàng)科技發(fā)展有限責(zé)任公司
聯(lián)系電話：400-016-4066（免費(fèi)電話）；010-85376599
E-mail：zhongshi1118@126.com
聯(lián)系電話：400-016-4066（免費(fèi)電話）；010-85376599
E-mail：zhongshi1118@126.com
標(biāo)簽：
morris水迷宮實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)則（3）
- Nature文獻(xiàn)解讀：小鼠模型助力揭示石膽酸模擬熱量限制的抗衰老效果
- 從引進(jìn)小鼠到繁育過(guò)程的詳細(xì)攻略介紹及注意事項(xiàng)
- 多種特應(yīng)性皮炎小鼠模型的介紹及其在相關(guān)藥物藥效評(píng)價(jià)中的應(yīng)用
- VEGFA人源化與轉(zhuǎn)基因小鼠在眼科及腫瘤治療藥物研發(fā)中的應(yīng)用
- 文獻(xiàn)解讀：鐵富集癌相關(guān)成纖維細(xì)胞促進(jìn)腫瘤免疫抑制的研究過(guò)程
- 腺相關(guān)病毒AAV在腎臟組織研究中的靶向策略介紹
- 新型基因編輯療法臨床前研究的關(guān)鍵模型B6-hABCA4小鼠的介紹及應(yīng)用
- 小鼠模型在揭秘乳酸化修飾調(diào)控先天性免疫新機(jī)制中的應(yīng)用
- 南模今晚直播：人源化自免小鼠模型構(gòu)建及其應(yīng)用前景
- 李勁松院士做客南模生物直播間，講述基因組標(biāo)簽計(jì)劃
- 講座：人免疫系統(tǒng)重建小鼠在腫瘤免疫治療研究中應(yīng)用
- 不同以“網(wǎng)”，智驅(qū)未來(lái)，賽業(yè)生物官網(wǎng)煥新升級(jí)
- 南模生物邀您相約第十六屆全國(guó)免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)
- 賽業(yè)生物品牌形象“智鼠iMouse”正式上線
- 南模生物邀您參加SAPA-China 2024醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)大會(huì)
- 賽業(yè)生物講座預(yù)告：Cre-loxP原理及工具鼠應(yīng)用要點(diǎn)
Copyright(C) 1998-2024 生物器材網(wǎng) 電話：021-64166852;13621656896 E-mail：info@bio-equip.com