細胞色素c氧化酶(Cytochrome c oxidase,簡稱COX)是一種異源寡聚酶,通常含有13個亞基,定位于線粒體內(nèi)膜,是線粒體呼吸鏈的酶復合物。細胞色素c氧化酶中形成催化中心的3個最大的亞基由線粒體DNA編碼,其余10個亞基包括COX IV由細胞核內(nèi)的基因組DNA編碼。細胞色素c氧化酶(COX)活性缺陷和人類多種疾病相關。COX IV抗體可用作線粒體蛋白上樣量的,其檢測目標蛋白大小為16kD左右。
什么時候選擇線粒體內(nèi)參抗體?
我們知道,在Western Blotting中使用內(nèi)參其實就是在WB過程中的另外用內(nèi)參對應的抗體檢測內(nèi)參蛋白,這樣在檢測目的產(chǎn)物的同時可以檢測內(nèi)參的表達,由于內(nèi)參在各組織和細胞中的表達相對恒定,借助檢測每個樣品內(nèi)參的量就可以用于校正上樣誤差,這樣半定量的結果才更為可信。此外使用內(nèi)參可以作為空白對照,檢測蛋白轉膜情況是否完全、整個Western Blot顯色或者發(fā)光體系是否正常。
常用的細胞總蛋白質內(nèi)參有GAPDH和細胞骨架蛋白β-Actin或β-Tubulin等。對于一些植物的樣本,則需要特別的植物Actin蛋白作為內(nèi)參。當實驗樣品中只是核蛋白,而不是細胞總蛋白提取液時,可以用組蛋白H(Histone H),或者增殖細胞核抗原(PCNA)等為核內(nèi)參抗體。而在一些特別的針對線粒體作為微環(huán)境的研究課題時,需要提取線粒體總蛋白并檢測其中的目標蛋白含量,這時候常規(guī)的細胞總蛋白內(nèi)參就不是很合適,我們推薦使用線粒體總蛋白的內(nèi)參抗體,對于線粒體蛋白的檢測,常用COX IV或VDAC1作為內(nèi)參抗體,這里面COX IV又是被引用最多的。COX IV的檢測分子量大約在16kD左右,比較適合用于檢測目標蛋白在較大的WB實驗。
我們課題組是做凋亡和線粒體方面研究的,經(jīng)常研究線粒體方面的通道蛋白,一直使用Abbkine的COX IV抗體來做WB,效價挺高的!錆h大學生科院一客戶
產(chǎn)品名稱及描述 | 品牌 | 貨號 | 產(chǎn)品說明 |
Anti-COX IV Mouse Monoclonal Antibody (14Y2) | Abbkine | A01060 |
小鼠源的單克隆抗體一般在特異性、穩(wěn)定性以及效價都要優(yōu)于多克隆抗體。 另外,抗體的效價也是考察該抗體性價比的重要方面,也即相當于實際應用時的稀釋比率。一個效價高的100μl COX IV抗體(假如其WB檢測的稀釋比率是1:4000,最終使用液相當于400ml),要比效價低的1ml的COX IV抗體(假如WB檢測的稀釋比率是 1:200,最終使用液相當于200ml)性價比更高。因此在選擇抗體的時候,不但需要考慮抗體的量,還需要考慮抗體的效價,即不同應用的建議稀釋比率。
為什么選擇推薦Abbkine品牌的COX IV作為線粒體內(nèi)參抗體?
供應COX IV抗體的進口品牌有很多,像Abcam、Santa Cruz、Cell Signaling(CST)、Millipore等都有相關COX IV抗體提供。但是由于不是專門的標簽和內(nèi)參抗體供應商,因此在性價比上不是最優(yōu)的選擇, 以Abcam為例,其一支100μl COX IV抗體的RMB報價為¥4418;CST的一支100μl COX IV抗體的報價是¥2997。
另外,一些國內(nèi)的供貨商也能提供分裝的COX IV抗體,但是在品牌和質量保障上都有不足。國產(chǎn)分裝的COX IV抗體在質量穩(wěn)定性上有不足,并且經(jīng)過分裝以后,其效價也有損失。而原產(chǎn)于國內(nèi)實驗室的GAPDH抗體有些具有較好的檢測活性,但是在應用類型上有差距,并且在批次之間的穩(wěn)定性上較難控制,而國內(nèi)僅有的少量原產(chǎn)抗體也是多克隆抗體。如果您想買到一支性價比更高,同時也是原裝進口品牌的COX IV線粒體內(nèi)參抗體,那 Abbkine可能會是您的一個重要考慮選項之一。我們向您推薦Abbkine的COX IV單克隆內(nèi)參抗體Anti-COX IV Mouse Monoclonal Antibody (14Y2)(貨 號A01060)。
產(chǎn)品名稱及描述 | 品牌 | 貨號 | 產(chǎn)品說明 |
Anti-COX IV Mouse Monoclonal Antibody (14Y2) | Abbkine | A01060 |
該COX IV抗體為單克隆抗體,克隆號為14Y2。其抗原為KLH偶聯(lián)的兼具種屬通用型和蛋白特異性的COX IV蛋白部分序列。Abbkine的COX IV單克隆抗體(貨號#A02060)產(chǎn)品,其價格比Abcam低65%,只有CST的一半價格。可高效的應用于Western Bloting實驗,作為線粒體總蛋白的內(nèi)參定量。
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一個高效價的抗體不僅影響實驗結果的靈敏度,還意味著更高的性價比。Abbkine的COX IV線粒體內(nèi)參抗體在常規(guī)的WB實驗里,推薦的起始稀釋比率為1:1000,實際在Abbkine的應用中,還有1:5,000甚至更高的稀釋比率,需要根據(jù)客戶具體的實驗條件進行進行優(yōu)化。
Abbkine還提供1ml大包裝以及更大定制規(guī)格的COX IV,非常適合經(jīng)常進行線粒體領域免疫學檢測的實驗需求。為方便客戶的使用, 上述產(chǎn)品,Abbkine均在中國備有現(xiàn)貨。Abbkine針對中國市場,提供全球化的產(chǎn)品質量追蹤和售后服務以及保障,如果您在使用過程中有任何問題, 請直接與其當?shù)卮砩贪澜菘萍加邢薰韭?lián)系。
產(chǎn)品名稱及描述 | 品牌 | 貨號 | 產(chǎn)品說明 |
Anti-COX IV Mouse Monoclonal Antibody (14Y2) | Abbkine | A01060 |