His標(biāo)簽是由6個組氨酸(His-His-His-His-His-His)組成的短肽,專門設(shè)計用于重組蛋白質(zhì)的吸附純化。由于分子量較小,并且較容易分離和純化,His-tag 融合標(biāo)簽與其他標(biāo)簽相比有很多明顯優(yōu)勢, 是目前用于純化的融合標(biāo)簽中使用最為廣泛的一種。His抗體可以用于檢測和His標(biāo)簽融合表達(dá)蛋白的表達(dá)、細(xì)胞內(nèi)定位,以及純化、定性或定量檢測His融合表達(dá)蛋白等。然而,目前商品化His-tag的單克隆抗體(mAb)種類不多, 且價格也十分昂貴。
如何選擇合適的His標(biāo)簽抗體?
我們在選擇時,主要根據(jù)自己的需要,特別是實驗應(yīng)用上的需要。其中需要考慮的因素包括了,His抗體的應(yīng)用檢測類型、His抗體的克隆性及制備來源等。比如該His抗體是否能用于Western Bloting的檢測?是否可以用于免疫熒光IF實驗?我是否需要特異性更好的單克?我是否需要考慮下是選擇小鼠來源的還是兔來源的His抗體?
之前有使用SSS(一家著名品牌的His標(biāo)簽抗體,名稱隱去)的His標(biāo)簽抗體,一開始還好,過了半年后,就發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定,做IF實驗不行了,后來試用了下Abbkine的,IF結(jié)果很漂亮,順帶還買了他們的DyLight熒光二抗 —— 廣州南方醫(yī)科大學(xué)一客戶
一般來說,應(yīng)用類型越多,在使用過程中的選擇余地就越大,而小鼠源的單克隆抗體一般在特異性、穩(wěn)定性以及效價都要優(yōu)于多克隆抗體。 另外,抗體的效價也是考察該抗體性價比的重要方面,也即相當(dāng)于實際應(yīng)用時的稀釋比率。一個效價高的100μl His抗體(假如其WB檢測的稀釋比率是1:5,000,最終使用液相當(dāng)于500ml),要比效價低的1ml的His抗體(假如WB檢測的稀釋比率是 1:200,最終使用液相當(dāng)于2ml)性價比更高。因此在選擇抗體的時候,不但需要考慮抗體的量,還需要考慮抗體的效價,即不同應(yīng)用的建議稀釋比率。
產(chǎn)品名稱及描述 | 品牌 | 貨號 | 產(chǎn)品詳情 |
Anti-His Tag Mouse Monoclonal Antibody (5C3) | Abbkine | A02050 | |
HRP Conjugated Anti-His Tag Monoclonal Antibody (5C3) | Abbkine | A02055 | |
Anti-His Tag Rabbit Polyclonal Antibody | Abbkine | A02051 |
為什么推薦Abbkine品牌的His抗體?
供應(yīng)His抗體的進(jìn)口品牌有很多,包括Sigma、Novagen、Qiagen、Abcam等,其中Abcam有一款值得推薦的His抗體,品名為6X His tag® antibody [HIS.H8] (貨號為:ab18184),該抗體是Abcam推薦的唯一5星級His標(biāo)簽抗體,可用于IF/ICC、IP以及WB實驗,截止到2013年,使用該抗體發(fā)表在NCBI統(tǒng)計的文章有16篇(詳情請點擊:)。該抗體為單克隆抗體,克隆號為HIS.H8,該抗體2013年的中國報價為¥4418/100μl。Abcam的抗體在品牌知名度、質(zhì)量以及售后方面都是很值得推薦的,然后其價格較高。
在此,我們向您推薦Abbkine的,該抗體實際上與上述Abcam抗體來源相同。與Abcam一樣,其免疫原是6x His合成多肽,可識別可識別His重組蛋白和在細(xì)胞內(nèi)過表達(dá)的His標(biāo)記重組蛋白。然而其價格比Abcam低65%以上。Abbkine作為美國一家生產(chǎn)型品牌,為多個國際知名品牌提供OEM服務(wù),因此其價格低廉,其質(zhì)量也經(jīng)受過市場檢驗。該抗體可以用于Western Bloting、免疫細(xì)胞化學(xué)及免疫熒光ICC/IF和免疫沉淀IP實驗等多種不同應(yīng)用。
產(chǎn)品名稱及描述 | 品牌 | 貨號 | 產(chǎn)品詳情 |
Anti-His Tag Mouse Monoclonal Antibody (5C3) | Abbkine | A02050 | |
HRP Conjugated Anti-His Tag Monoclonal Antibody (5C3) | Abbkine | A02055 | |
Anti-His Tag Rabbit Polyclonal Antibody | Abbkine | A02051 |
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一個高效價的抗體不僅影響實驗結(jié)果的靈敏度,還意味著更高的性價比。Abbkine的His在常規(guī)的WB實驗里,推薦的起始稀釋比率為1:1000,實際在Abbkine的應(yīng)用中,還有1:4,000甚至更高的稀釋比率,需要根據(jù)客戶具體的實驗條件進(jìn)行優(yōu)化。該抗體在免疫細(xì)胞化學(xué)及免疫熒光ICC/IF中同樣表現(xiàn)優(yōu)秀,5C3克隆的His標(biāo)簽抗體識別的免疫決定簇非常適合ICC/IF的應(yīng)用。IP免疫沉淀反應(yīng)也是客戶選擇Abbkine的一個重要原因。另外,Abbkine還同時提供經(jīng)HRP偶聯(lián)的His標(biāo)簽抗體,尤其適合IP-WB驗證時去除二抗的干擾;兔源多克隆His抗體也為客戶提供另一種His標(biāo)簽的檢測方案。
還提供大包裝1ml的His標(biāo)簽抗體,非常適合經(jīng)常進(jìn)行His標(biāo)簽系統(tǒng)免疫學(xué)檢測的實驗需求。為方便客戶的使用, 上述產(chǎn)品,Abbkine均在中國備有現(xiàn)貨。Abbkine針對中國市場,提供全球化的產(chǎn)品質(zhì)量追蹤和售后服務(wù)以及保障,如果您在使用過程中有任何問題, 請直接與其當(dāng)?shù)卮砩贪澜菘萍加邢薰韭?lián)系。
產(chǎn)品名稱及描述 | 品牌 | 貨號 | 產(chǎn)品詳情 |
Anti-His Tag Mouse Monoclonal Antibody (5C3) | Abbkine | A02050 | |
HRP Conjugated Anti-His Tag Monoclonal Antibody (5C3) | Abbkine | A02055 | |
Anti-His Tag Rabbit Polyclonal Antibody | Abbkine | A02051 |
美國Abbkine品牌是一家提供高性價比免疫學(xué)和細(xì)胞學(xué)科研產(chǎn)品及解決方案的品牌,艾美捷將其引入中國,作為其中國區(qū)域代理,將為客戶提供最具性 價比的常規(guī)免疫學(xué)試劑,如各種標(biāo)簽抗體、內(nèi)參抗體、常規(guī)一抗以及全系列,抗體檢測底物以及相關(guān)試劑盒等。同時我們作為多家國際知名品牌的的中國代理或 區(qū)域代理,艾美捷能為您提供系列的實驗室解決方案。如果您對上述產(chǎn)品感興趣,請致電免費客戶專線400-6800-868轉(zhuǎn)801/802/803 或者027-84454412/4876到艾美捷科技有限公司垂詢相關(guān)的產(chǎn)品信息及完整實驗解決方案。