摘要 目的 :探討5-羥色胺選擇性重攝取抑制劑(SSRI)氟西汀和帕羅西汀對藥物(MA) 誘導的條件性位置偏愛效應(CPP)的影響。

方法 :采用傾向性實驗程序�！醀istar 大鼠腹腔注射 MA (0. 5 mg ·kg- 1)并訓練8d ,d9

測定大鼠對伴藥盒的偏愛效應及測試前30 min 注射不同劑量 (2. 5 - 10. 0 mg ·kg- 1) 氟西汀和帕羅西汀對該效應的影響。

結(jié)果 : 0. 5 mg ·kg- 1的 MA 可以誘導大鼠對伴藥盒產(chǎn)生顯著的條件性位置偏愛;測試前注射氟西汀和帕羅西汀均可劑量依賴性地降低MA 誘導的條件性位置偏愛效應的表達。

結(jié)論 : 氟西汀和帕羅西汀對 MA 的強化效應有抑制作用,提示該類藥物有治療藥物精神依賴性的潛力。

關(guān)鍵詞 右旋藥物，氟西汀，帕羅西汀，條件性位置偏愛

以藥物 (met hamp hetamine , MA , 俗稱冰毒) 為代表的苯丙胺類興奮劑在全球的濫用迅速蔓延[1],嚴重地危害著青少年的身心健康, 因此迫切需要研究其成癮的神經(jīng)生物學機制和有效治療方法。中腦邊緣系統(tǒng)多巴胺水平增加是苯丙胺類藥物獎賞效應的主要神經(jīng)生物學基礎。但是近年來非多巴胺能神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)[如興奮性氨基酸、抑制性氨基酸、組織胺、5-羥色胺(5-HT)和去甲腎上腺素等在藥物獎賞效應中的作用也引起研究者的關(guān)注[2]。5-HT是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的一種重要神經(jīng)遞質(zhì)。研究表明, 5 - HT 對苯丙胺類興奮劑的獎賞效應有調(diào)節(jié)作用。直接在伏核內(nèi)注射5-HT或促進5-HT釋放藥物芬氟拉明(fenfluramine) 能夠降低苯丙胺的條件性獎賞效應[3 ]。氟西汀可以降低大鼠對獎賞性大腦刺激的敏感性[4],降低大鼠苯丙胺自身給藥時的攝藥量[5,6 ]。由于MA比苯丙胺對5-HT能神經(jīng)系統(tǒng)有更強的作用[7,8],因此,作者認為5-HT選擇性重攝取抑制劑(SSRI)-氟西汀(fluoxetine)和帕羅西汀(paroxetine)可能具有調(diào)節(jié)MA 獎賞效應的能力。本文探討了這兩種藥物對MA 誘導的大鼠條件性位置偏愛效應(CPP)的影響。

1 材料與方法

1. 1 動物

Wistar大鼠90只,♂,體重160-180g ,購自北京大學醫(yī)學部實驗動物中心。將動物隨機分組,每組7-8只。實驗前動物在清潔飼養(yǎng)室適應7d ,每天抓取一次。整個實驗過程中飲水及進食自由。

1. 2 試劑

藥物, 鹽酸氟西汀粉, 鹽酸帕羅西汀粉。以上藥品均用生理鹽水溶解,給藥體積為1ml·kg-1。

1. 3 實驗裝置

CPP 實驗箱主要由隔音箱、位置偏愛盒(中間由隔板分為等體積的兩個盒,一側(cè)為黑盒、光滑地板,一側(cè)為白盒、粗糙地板)和計算機組成。

1. 4 方法

CPP實驗分為3個階段: 預測試階段、訓練階段和測試階段。

1. 4. 1 預測試階段 將偏愛盒中間隔板打開,把大鼠放入中間地帶,讓其在偏愛盒中自由跑動15min每天1次,連續(xù)3d。d3用計算機記錄50只大鼠在白盒和黑盒的平均停留時間,確定大鼠的天然偏愛傾向。然后以非天然偏愛盒為伴藥盒訓練大鼠。

1. 4. 2 訓練階段 用隔板封閉黑白盒通道。對照組動物連續(xù)8 d ip 生理鹽水,隔天放入伴藥盒或另一側(cè);MA 組大鼠隔天ip MA 放入伴藥盒,或ip 生理鹽水放入另一側(cè)。動物每次在盒中停留時間為30 min。

1. 4. 3 測試階段 在訓練完成后的d2 進行測試。測試前將隔板打開,使大鼠能夠在黑白盒內(nèi)自由移動記錄動物不給藥狀態(tài)下在白盒內(nèi)的停留時間 (如預測試階段) 。

1. 5 實驗設計

1. 5. 1 MA 誘導的CPP效應 將動物分為4組。一組為對照組,其它3組為MA組,后者分別ip 0.25mg ·kg-1,0.5mg·kg-1,1.0 mg·kg-1的MA。訓練完成后的d2測量動物在伴藥盒的停留時間,評價不同劑量MA 誘導大鼠CPP 效應的強度。選擇使動物對伴藥盒有明顯偏愛效應的藥物劑量進行以下實驗 。

1. 5. 2 氟西汀和帕羅西汀對 MA 誘導的 CPP 效應

表達的影響 將大鼠分為7組, 按1.5.1中得出的最佳劑量MA訓練動物。測試前30 min分別ip生理鹽水(1ml·kg-1)、氟西汀(2. 5 mg ·kg- 1, 5. 0mg ·kg- 1和 10. 0 mg ·kg- 1) 和帕羅西汀 (2. 5mg ·kg- 1, 5. 0 mg ·kg- 1和10.0 mg·kg-1),記錄大鼠在伴藥盒內(nèi)的停留時間。

1. 6 統(tǒng)計學處理

實驗結(jié)果采用 SPSS 統(tǒng)計軟件包進行單因素方差分析和 t 檢驗。

2 結(jié)果

2. 1 大鼠對位置偏愛盒的天然偏愛

在預測試階段的 d3 進行測定 , 大鼠在白盒和黑盒的停留時間分別為 219. 5 s ±s 126. 0 s 和680. 5 s ±s 126. 0 s ( P < 0. 01) , 表明大鼠對黑盒有天然偏愛,所以采用傾向性實驗程序,在訓練階段以大鼠非天然偏愛的白盒為伴藥盒。

2. 2 MA 誘導大鼠 CPP 效應

訓練8d后 ,對照組 (生理鹽水組) 大鼠在白盒的平均停留時間為187. 7 s ±s 94. 5 s ,而注射不同劑量 MA (0. 25 - 1. 0 mg ·kg- 1, ip ) 的大鼠在白盒的平均停留時間分別為 454. 1 s ±s 267. 9 s (0. 25mg ·kg- 1, P < 0. 05) 、654. 5 s ±s 73. 7 s (0. 5mg ·kg- 1, P < 0. 01) 和 478. 4 s ±s 198. 3 s (1. 0mg ·kg- 1, P < 0. 05) (圖 1) ,表明動物已對白盒產(chǎn)生 CPP[ F (3 , 27) = 9. 538 , P < 0. 01 ]。其中 0. 5mg ·kg- 1的MA產(chǎn)生的CPP效應最明顯, 因此以下實驗采用的MA劑量為0.5 mg·kg-1。

2. 3 氟西汀和帕羅西汀對 MA CPP 效應表達的影

響如圖2所示,測試前30 min ip生理鹽水后,用0. 5 mg ·kg-1的MA訓練的大鼠在白盒的平均停留時間為634. 8 s ±s 118. 7 s ,表明實驗動物已穩(wěn)定建立了對伴藥盒的偏愛效應; 提前 30 min 注射氟西汀劑量依賴性地降低 MA 誘導的 CPP 效應的表達 [ F (3 ,24) = 3. 573 , P < 0. 05 ] , 動物在白盒的平均停留時間分別為449. 0 s ±s 261. 3 s (2. 5 mg ·kg- 1, P < 0. 05) 、 375. 2 s ±s 210. 7 s (5. 0 mg ·kg- 1, P < 0. 05)和 294. 0 s ±s 296. 5 s (10. 0 mg ·kg- 1, P < 0. 01) 。同樣,提前 30 min 注射帕羅西汀也劑量依賴性地降低 MA 誘導的 CPP 效應的表達[ F (3 , 24) = 7. 787 , P < 0. 01 ] , 動物在白盒的平均停留時間分別為 469. 4 s ±s 277. 8 s (2. 5 mg ·kg- 1, P < 0. 05) 、348. 8 s ±s 272. 3 s (5. 0 mg ·kg- 1, P < 0. 01)和 148. 2 s ±s 131. 8 s (10. 0 mg ·kg- 1, P < 0. 01) 。

3 討論

CPP 實驗是一種用于評價藥物精神依賴性潛力的有效方法, 也可用于研究藥物依賴性的神經(jīng)生物學機制或篩選治療藥物依賴的有效藥物[9]。ip0.5mg ·kg-1的MA可以誘導大鼠產(chǎn)生對伴藥盒的CPP效應,證明該藥具有一定程度的精神依賴性;一旦建立了穩(wěn)定的CPP效應,測試前30 min ip 氟西汀和帕羅西汀劑量依賴性地減少大鼠在白盒的停留時間, 表明這兩種藥物具有降低MA CPP 效應表達的作用, 因此增加突觸間隙5-HT濃度能夠降低MA的獎賞效應。中腦邊緣多巴胺系統(tǒng)的多巴胺釋放是苯丙胺類興奮劑產(chǎn)生條件性獎賞效應的重要神經(jīng)基礎。

5-HT遞質(zhì)系統(tǒng)和多巴胺系統(tǒng)間存在著相互作用即來源于內(nèi)側(cè)和背側(cè)中縫核的5 - HT 能神經(jīng)元與中腦來源的多巴胺能神經(jīng)元有軸突- 軸突連接; 5-HT對多巴胺介導的行為有拮抗作用, 伏核內(nèi)注射5-HT能夠抑制苯丙胺引起的條件性獎賞效應[7]。5 -HT 重攝取抑制劑不僅能降低成癮動物對苯丙胺的攝入量,也能降低成癮動物對可卡因的攝入量[10],提示5 - HT 對中樞興奮劑的獎賞效應具有調(diào)節(jié)作用。氟西汀和帕羅西汀是臨床上治療抑郁性疾病的有效藥物, 并且未見濫用報道。本實驗證明這兩種藥物能夠劑量依賴性地抑制MA 誘導的CPP 效應表明它們能夠降低 MA 的獎賞效應, 因此具有治療藥物成癮的潛在應用價值。