完成一次常規(guī)流式實(shí)驗(yàn)，至少要保證單個(gè)樣品1×106個(gè)細(xì)胞的上樣量（100μl）。這還不包括梯度樣品、平行對(duì)照、重復(fù)實(shí)驗(yàn)，等等。難道需要開(kāi)個(gè)細(xì)胞工坊整天生產(chǎn)細(xì)胞嗎？不，在實(shí)驗(yàn)儀器日益精密化、小型化，實(shí)驗(yàn)方法日益自動(dòng)化、人性化的今天，一滴血（等同于10μl血液的細(xì)胞量）做流式已經(jīng)不再是夢(mèng)想，1,000,000個(gè)細(xì)胞至少可以完成10個(gè)實(shí)驗(yàn)！

一滴血做流式不再是夢(mèng)想，致力于開(kāi)發(fā)細(xì)胞分析領(lǐng)域前沿技術(shù)的默克密理博已成功突破這一瓶頸！2011年Journal of Immunological Methods刊登了University of Houston & University Of Texas Health Science Centre最新研究成果：采用CD115 marker鑒定10μl小鼠血樣中的單核細(xì)胞。文中對(duì)比了默克密理博guava微流式細(xì)胞分析平臺(tái)的效能，最終得出結(jié)論10μl 樣本量為該平臺(tái)分析單核細(xì)胞亞型的下限。

“一滴血做流式”的方法如下：
1.  靜脈采血，肝素或EDTA抗凝；
2.  在試管中加入10μl CD8-FITC/CD4-PE/CD3-PECY5 抗體；
3.  向試管內(nèi)加入10μl 抗凝全血（約1×105細(xì)胞）混勻試劑和全血；
4.  室溫（18-25℃）避光孵育20min；
5.  加入180μl 1X 紅細(xì)胞裂解液；
6.  室溫（18-25℃）避光孵育15min；
7.  使用微流式細(xì)胞分析儀獲取結(jié)果

文中Guava微流式細(xì)胞分析平臺(tái)提供的結(jié)果圖
結(jié)果可見(jiàn)：通過(guò)CD3,CD4,CD8的檢測(cè)指標(biāo)對(duì)全血樣本中T淋巴細(xì)胞進(jìn)行正確區(qū)分，并同時(shí)報(bào)告Th細(xì)胞和Tc細(xì)胞的絕對(duì)計(jì)數(shù)結(jié)果。證明10μl 的樣本借助“guava微流式”技術(shù)同樣能夠完成流式檢測(cè)，并且所獲得的數(shù)據(jù)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，準(zhǔn)確區(qū)分了T淋巴細(xì)胞各個(gè)亞群。

參考文獻(xiàn)：
Breslin., W.L., et al., Mouse blood monocytes: Standardizing their identification and analysis using CD115. Journal of Immunological Methods, 2011.

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