蛋白表達與純化

       隨著蛋白藥物市場的快速發(fā)展和蛋白質(zhì)組學研究的深入，高純度活性蛋白的需求越來越大。諾賽基因組建了一支由多名具深厚生物技術(shù)基礎(chǔ)與制藥企業(yè)工作經(jīng)驗的留學歸國人員和國內(nèi)專家為核心的團隊。在公司現(xiàn)有的基因組學平臺與蛋白質(zhì)組學平臺等專有技術(shù)平臺與系統(tǒng)的基礎(chǔ)上，采用與國外先進制藥企業(yè)同步的技術(shù)體系，建立了高效率、高通量的系列技術(shù)服務，可為國內(nèi)外客戶提供從基因到蛋白純化的整套技術(shù)服務，如文庫構(gòu)建、基因克隆、原核/真核蛋白表達、蛋白純化與鑒定和抗體制備，客戶亦可根據(jù)實驗需要選擇合適的技術(shù)服務。

特色

Ø    穩(wěn)定而多樣的表達系統(tǒng)：諾賽基因已建立整套的基因克隆與表達體系，無論是單個基因的克隆、表達與純化，還是多個基因高通量的基因克隆、表達和純化，諾賽基因均能選用適合您試驗（科研項目）需要的表達系統(tǒng)（包括大腸桿菌、畢赤酵母、昆蟲桿狀病毒以及哺乳動物細胞等）和合適的表達載體為您提供優(yōu)質(zhì)的服務。

Ø    多種純化方式：諾賽基因可為客戶提供多種蛋白純化服務，純化方式包括親和層析純化、凝膠過濾、離子交換、疏水層析等，客戶可根據(jù)需要選擇合適的純化方式。

Ø    專業(yè)的團隊和良好的信息管理體系：專業(yè)的基因克隆、蛋白表達與純化技術(shù)人員與團隊，具有豐富的表達和純化經(jīng)驗，可為客戶解決各種瓶頸問題, 良好信息管理體系使我們能夠為客戶提供成熟、高效的基因克隆服務。

實驗流程

Ø    大腸桿菌和酵母蛋白表達系統(tǒng)：

• 諾賽基因合成基因（另外收費）或者客戶提供模板(cDNA、基因組DNA、質(zhì)粒等)
• 構(gòu)建表達載體
• 篩選陽性克隆
• 表達優(yōu)化和可溶性分析
• SDS-PAGE檢測表達
• Western blot檢測表達（可選）

Ø    昆蟲桿狀病毒蛋白表達系統(tǒng)

• 諾賽基因合成基因（另外收費）或者客戶提供模板(cDNA、基因組DNA、質(zhì)粒等)
• 構(gòu)建表達載體
• 重組和篩選陽性克隆
• 提取重組Bacmid
• 感染Sf9細胞制備重組病毒
• 病毒滴度測定
• 優(yōu)化表達條件和細胞株（蛋白表達優(yōu)化一步需要）
• Western blot檢測蛋白表達

Ø    哺乳動物細胞瞬時表達小試

• 諾賽基因合成基因（另外收費）或者客戶提供模板(cDNA、基因組DNA、質(zhì)粒等)
• 構(gòu)建表達載體
• 瞬時轉(zhuǎn)染HEK293等哺乳動物細胞
• Western blot檢測（特異性一抗需客戶提供）
• 表達優(yōu)化
• 如果目的蛋白有表達，從50ml細胞培養(yǎng)液中純化目的蛋白

Ø    哺乳動物細胞穩(wěn)定表達細胞株建立

• 諾賽基因合成基因（另外收費）或者客戶提供模板(cDNA、基因組DNA、質(zhì)粒等)
• 構(gòu)建表達載體
• 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞
• Western blot檢測檢測（特異性一抗需客戶提供）
• 如果目的蛋白有表達，轉(zhuǎn)染細胞后篩選穩(wěn)定表達細胞株

提供結(jié)果

Ø    構(gòu)建的表達載體及測序報告

Ø    SDS-PAGE結(jié)果

Ø    篩選的表達菌株

Ø    Western blot結(jié)果

Ø    簡單實驗流程及結(jié)果

Ø    2ml 1.0×10^8pfu/ml的病毒（利用昆蟲桿狀病毒蛋白表達系統(tǒng)表達時）穩(wěn)定表達細胞株（哺乳動物細胞）

北京諾賽基因組研究中心有限公司（諾賽基因）是基于基因組學研究的生物高科技企業(yè)，公司的發(fā)展目標是實現(xiàn)最新生物醫(yī)藥研究成果的產(chǎn)業(yè)化。諾賽基因致力于自有知識產(chǎn)權(quán)的創(chuàng)新藥物的開發(fā)，生物標志的鑒定與疾病診斷/預警檢測技術(shù)的研發(fā)，生物制品與試劑的生產(chǎn)，中國人群遺傳資源和臨床資源的收集、保護、利用與開發(fā)，以及生物科技領(lǐng)域相關(guān)技術(shù)的培訓、咨詢和服務。

1998年9月，北京諾賽基因組研究中心有限公司由北京生物技術(shù)和新醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)促進中心和北京博大科技投資開發(fā)有限公司投資，中國醫(yī)學科學院/中國協(xié)和醫(yī)科大學、北京大學、中國科學院、軍事醫(yī)學科學院等單位參與組建成立。

諾賽基因開展與人類疾病相關(guān)的基因組學、功能基因組學和蛋白質(zhì)組學研究。1998年10月，國家科技部批準在諾賽基因的基礎(chǔ)上成立國家人類基因組北方研究中心，作為國家級研究基地。

諾賽基因自成立以來，整合以北京為中心的科研院所以及臨床醫(yī)院在基因組學及相關(guān)領(lǐng)域的科研力量，建立了具有世界級水平的生物學研究實驗室，組建了包括8位院士在內(nèi)的、由26位生物和醫(yī)藥領(lǐng)域資深科學家組成的智囊團，組織并培養(yǎng)了一支由近百名科技人員組成的具有豐富研發(fā)經(jīng)驗的科研團隊。

諾賽基因現(xiàn)已成功完成和正在進行863、973等國家重點課題及合作項目74項，參與并完成了1%國際人類基因組測序項目，承擔了致病微生物基因組測序、中國人群單核苷酸多態(tài)性（SNP）檢測及疾病基因組學研究等多項國家科研項目。截止目前，諾賽基因已申請專利28族。