信號(hào)通路是由從細(xì)胞膜、胞漿到細(xì)胞核一系列的蛋白分子，通過蛋白磷酸化和蛋白互作等形式串聯(lián)起來的蛋白分子信號(hào)傳導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)。在疾病的發(fā)生、發(fā)展，細(xì)胞表型等生物現(xiàn)象的背后，信號(hào)通路的調(diào)變起著分子層面的支撐作用。信號(hào)通路分析是腫瘤學(xué)、病理學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)、藥理學(xué)等一系列以機(jī)理探索為研究目的的科研工作的必經(jīng)之路。

       然而，細(xì)胞中存在多條信號(hào)通路，它們并不孤立存在，會(huì)串聯(lián)交叉形成的復(fù)雜信號(hào)網(wǎng)絡(luò)（Cross-talk）。該信號(hào)網(wǎng)絡(luò)在細(xì)胞受到胞外刺激后將信號(hào)通過級(jí)聯(lián)放大、分散調(diào)節(jié)等方式傳入胞內(nèi)，引起一系列復(fù)雜的信號(hào)改變，進(jìn)而產(chǎn)生綜合的細(xì)胞應(yīng)答。面對(duì)復(fù)雜研究現(xiàn)象，往往會(huì)有多條通路會(huì)發(fā)生調(diào)變。如何選擇主要調(diào)變的通路？是困擾研究人員的主要難題之一，而傳統(tǒng)的技術(shù)如Westen blot等不能解決。

        升級(jí)版 信號(hào)通路廣篩抗體芯片（CSP100 Plus）是在原腫瘤信號(hào)通路磷酸化廣譜篩選抗體芯片（CSP100）的基礎(chǔ)上升級(jí)完成的廣篩芯片。該芯片采用三維高分子膜專利技術(shù)，在片基上共價(jià)結(jié)合304種高特異抗體，其中磷酸化抗體157種，非磷酸化抗體147種。一張CSP100 Plus芯片可以同時(shí)對(duì)16條信號(hào)通路進(jìn)行篩選和比較。這16條信號(hào)通路是生物醫(yī)學(xué)研究中常見也是重要的通路，它們廣泛參與到腫瘤、免疫、心血管、神經(jīng)系統(tǒng)、損失修復(fù)等多種病理生理過程中。因此，CSP100 Plus芯片可以適用于多種疾病與藥物研究模型的信號(hào)通路篩選工作。同時(shí)，脊椎動(dòng)物的磷酸化位點(diǎn)具備保守性，芯片上的抗體都是以目標(biāo)蛋白的物種保守多肽序列為抗原進(jìn)行設(shè)置，所以，CSP100 Plus芯片上的抗體具有一定的物種通用性。

|   抗體芯片特點(diǎn)

●  芯片規(guī)格為76 x 25 x 1 mm；

●  實(shí)現(xiàn)16條信號(hào)通路全面篩選；

●  每種抗體設(shè)置6次技術(shù)重復(fù)；

●  適用于組織、細(xì)胞等多類型樣本；

●  5×106細(xì)胞、200 µg總蛋白量即可滿足實(shí)驗(yàn)；

●  可同時(shí)提供磷酸化和蛋白表達(dá)兩套數(shù)據(jù)；

●  可通用于人、小鼠、大鼠等多類型模式生物檢測(cè)。

|   芯片覆蓋通路

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|   抗體芯片原理

|   客戶案例：CSP100芯片協(xié)助發(fā)現(xiàn)納米藥物作用機(jī)理

       缺失和突變著名的抑癌基因PTEN 已經(jīng)在很多癌癥中被發(fā)現(xiàn)，由于PTEN可直接參與到抗腫瘤的免疫調(diào)節(jié)。因此，如果在癌癥中重新開啟PTEN基因的表達(dá)，通過增強(qiáng)抗腫瘤免疫，是否能夠治療腫瘤呢？這是一個(gè)非常有創(chuàng)意的假設(shè)。

       研究人員通過PTEN mRNA 納米顆粒（mPTEN@NP）載藥系統(tǒng)（圖1A）傳遞mRNA到基因缺失和突變的PTEN-Cap8 和B16F10 細(xì)胞中，恢復(fù)了PTEN基因的表達(dá)，果然達(dá)到了有效抑制前列腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)，促進(jìn)其凋亡的療效（圖1B）。對(duì)于納米藥物領(lǐng)域的科學(xué)家來說，材料科學(xué)是本行，研究中納米藥物的改造往往會(huì)花費(fèi)了大量精力。而對(duì)于PTEN這種明星分子的調(diào)控，又勢(shì)必會(huì)引起一系列復(fù)雜信號(hào)通路的變化。如何高效地篩選這些信號(hào)通路成為需要面對(duì)的新問題？

       研究人員與華盈生物展開緊密合作，通過CSP100信號(hào)通路磷酸化廣篩抗體芯片技術(shù)，同時(shí)對(duì)mPTEN@NPs和PBS對(duì)照組分別處理的PTEN-Cap8細(xì)胞中的16條信號(hào)通路進(jìn)行了廣泛篩選（圖1C）。芯片結(jié)果顯示多條信號(hào)通路均圍繞PTEN基因的表達(dá)發(fā)生了顯著變化，尤其是自噬通路相關(guān)蛋白磷酸化調(diào)變尤為明顯（圖1D）。通過Western blot實(shí)驗(yàn)，研究人員證實(shí)了mPTEN@NP可顯著增加自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)。并通過一系列自噬相關(guān)功能實(shí)驗(yàn)，明確了自噬通過誘導(dǎo)損傷模式識(shí)別分子 (DAMPs)，繼而增加免疫原性細(xì)胞死亡（ICD）是mPTEN@NP發(fā)揮抗腫瘤作用的關(guān)鍵機(jī)制。

上海華盈生物醫(yī)藥科技有限公司 位于上海閔行區(qū)綠洲環(huán)路396弄5幢4層，是醫(yī)學(xué)生物技術(shù)領(lǐng)域的特色高科技企業(yè)。2012年3月，華盈生物由原生物芯片上海國(guó)家工程研究中心副主任即技術(shù)平臺(tái)建設(shè)主要負(fù)責(zé)人張慶華博士發(fā)起創(chuàng)建。張慶華博士是國(guó)家生物芯片標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)等多個(gè)國(guó)家級(jí)學(xué)會(huì)的委員，承擔(dān)和參與了國(guó)家重大科技專項(xiàng)、“863”、“973”、自然科學(xué)基金等多個(gè)科研項(xiàng)目，被多所重點(diǎn)高校聘為博士生導(dǎo)師，并享受國(guó)務(wù)院特殊津貼。

    華盈生物以科學(xué)和專業(yè)為服務(wù)理念，視人才隊(duì)伍為企業(yè)生命，匯聚了多名多年從事基因組學(xué)與系統(tǒng)生物學(xué)研究的高層次研究人員。公司團(tuán)隊(duì)中 30% 成員具有博士學(xué)歷，40% 成員具有碩士學(xué)歷，30% 成員具有大學(xué)本科學(xué)歷，是一支名副其實(shí)的高學(xué)歷科技人才隊(duì)伍。嚴(yán)謹(jǐn)、嚴(yán)格、創(chuàng)新和求真務(wù)實(shí)的工作作風(fēng)貫徹公司上下。

    華盈生物以蛋白與抗體芯片的技術(shù)研發(fā)與推廣為核心，與美國(guó) Full Moon、RayBiotech、CDI 等國(guó)際專業(yè)公司結(jié)成戰(zhàn)略伙伴，與美國(guó)John Hopkins大學(xué)、上海交通大學(xué)、復(fù)旦大學(xué)等知名院校展開緊密合作。引進(jìn)和開發(fā)了豐富的蛋白芯片與抗體芯片技術(shù)平臺(tái)，提供信號(hào)通路蛋白質(zhì)磷酸化、胞內(nèi)蛋白質(zhì)表達(dá)、細(xì)胞因子表達(dá)、蛋白質(zhì)相互作用、血清抗體譜篩選等多項(xiàng)蛋白水平組學(xué)技術(shù)服務(wù)項(xiàng)目。同時(shí)，公司充分發(fā)揮核心團(tuán)隊(duì)系統(tǒng)生物學(xué)研究背景優(yōu)勢(shì)，積極發(fā)展基因表達(dá)譜芯片、microRNA芯片、LncRNA芯片、PCR Array等多項(xiàng)基因水平研究技術(shù)服務(wù)，力求通過強(qiáng)大的數(shù)據(jù)挖掘與分析延伸服務(wù)打造出一個(gè)立體的組學(xué)科研技術(shù)服務(wù)體系，實(shí)現(xiàn)廣大科研工作者“一站式”科研服務(wù)的愿望。