肽質量指紋圖譜（PMF），也稱為蛋白質指紋，是一種開發(fā)于1933年的蛋白質高通量分析方法，用于鑒定蛋白質。內切蛋白酶首先將未知的靶蛋白裂解為較小的肽段，這些肽的絕對質量可以使用質譜儀進行準確測量，并且還可以獲得未知蛋白質的肽峰列表。使用生物信息學方法將峰列表與蛋白質數(shù)據庫中的理論肽峰列表進行比較。理論數(shù)據庫將所有有機體的所有已知基因組翻譯成蛋白質，理論上將蛋白質水解成小肽，并將每種蛋白質計算出肽的絕對質量。同時，還將裂解的未知蛋白質的肽質量與基因組中編碼的每種蛋白質的理論肽質量進行比較，對結果進行統(tǒng)計分析可以找到最佳匹配。

肽質量指紋圖譜分析過程

生物組織或細胞中的蛋白質純化后，用2D或SDS-PAGE凝膠分離并使用成像技術進行比較。選擇差異顯著的蛋白進行進一步分析。對選定的蛋白質進行脫膠和酶解，得到一系列能反映蛋白質特性的肽段。通過質譜精確測量肽混合物的指紋圖譜，從而獲得蛋白質的分子量。為在已知數(shù)據庫中搜索所選蛋白質提供了準確性。

隨著分析化學技術的發(fā)展，PMF因其靈敏度高、穩(wěn)定性好、樣品損失小而被廣泛應用于藥品真實性鑒定、食品質量控制、人類疾病診斷等各個領域。世界衛(wèi)生組織和中國國家食品藥品監(jiān)督管理局將PMF作為一種物質鑒別和過程控制技術，為質量評價提供客觀指標。

1.不需要依靠蛋白質測序來進行蛋白質鑒定，而是依靠肽的質量；
2.過程簡單快速，是一種使用一級質譜法進行蛋白質鑒定的經典方法。

1.目的蛋白質序列必須存在于目標數(shù)據庫中；
2.適用于單一蛋白質分析�；旌系鞍踪|的存在會大大增加分析的復雜性；
3.質量相似的肽會大大增加匹配的難度。

快速準確地鑒定蛋白質在蛋白質組學研究中至關重要。PMF可以通過基質輔助激光解吸電離離子源（MALDI）和飛行時間（TOF）質量分析儀進行測量。它是蛋白質組學研究中最常用的方法之一。

MALDI使用激光照射由樣品和基板形成的共晶薄膜�；�質從激光吸收能量并將其轉移到生物分子上。在電離過程中，質子被轉移到生物分子或從生物分子中獲得，生物分子發(fā)生電離。因此，MALDI是一種軟電離技術，適用于混合物和生物大分子的測定。TOF的原理是，在電場的作用下，離子加速通過飛行管飛行，并且根據飛行到檢測器的時間來檢測離子。MALDI-TOF-MS具有高靈敏度、高精度和高分辨率的特點。它在生命科學和許多其他領域中的樣本分析起重要作用。

百泰派克生物科技提供基于肽指紋圖譜PMF的蛋白質組質譜鑒定服務，歡迎咨詢。

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1. 實驗步驟（中英文）
2. 相關的質譜參數(shù)（中英文）
3. 質譜圖片
4. 原始數(shù)據
5. 蛋白質分子量和純度分析結果

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