2D Blue Native/SDS-PAGE復合物分析服務
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服務商: 北京百泰派克生物科技有限公司 | 查看該公司所有服務 >> |
在生物膜中,許多蛋白質以復合物形式組成。百泰派克生物科技可利用2D Blue Native/SDS-PAGE對這些蛋白質復合物的亞基進行全局分析。2D BN/SDS-PAGE分析中,樣品通過藍色native聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)進行一維分離,然后通過SDS-PAGE進行二維分離。
2D Blue Native SDS-PAGE復合物分析服務
蛋白質復合物在時間和空間的所有復雜層面上都可以組織并維持細胞和細胞器的功能,包括細胞發(fā)育和分裂、轉錄和翻譯、呼吸作用和光合作用、轉運和代謝。蛋白質復合物可能表現(xiàn)出部分和暫時性變化,并且表現(xiàn)出不同的穩(wěn)定性,使鑒定和分析難以順利進行。BN-PAGE是用于蛋白質復合物高分辨率分離的技術。BN-PAGE可用于確定蛋白質復合物的大小、相對豐度和亞基組成分析。
在2D BN-PAGE分析中,蛋白質或蛋白質復合物樣品在自然條件下在1D BN-PAGE中分離,考馬斯亮藍染料帶有負電荷,與所有蛋白質非特異性結合?捡R斯亮藍不作為洗滌劑使用,從而保留了蛋白質復合物的結構。另外,考馬斯亮藍的結合降低了電泳過程中蛋白質聚集的趨勢。因此,樣品的電泳遷移率取決于結合的考馬斯亮藍的負電荷以及復合物的大小和形狀。通過BN-PAGE分離后,蛋白質和蛋白質復合物樣品在凝膠中通過SDS變性,然后再進行2D SDS-PAGE凝膠電泳分離。
BN-PAGE和SDS-PAGE的結合,因為一維中的梯度凝膠和二維中的線性凝膠,單體蛋白質將以雙曲線對角線遷移,而蛋白質復合物的組成成分位于該對角線以下。代表同一蛋白質復合物亞基的蛋白質可以在二維的一條垂直線中找到,而同一蛋白質在水平線中的多個斑點表明該蛋白質同時存在于幾種不同的蛋白質復合物中。
2D BN/SDS-PAGE分析可以提供有關樣品的大小、數(shù)量、蛋白質組成、化學計量和相對豐度的信息,是研究蛋白質復合物的有用工具。