漢恒生物推出的Cas9/gRNA腺病毒利用cas9和gRNA結(jié)合特異性,同時(shí)借助腺病毒高感染效率,高表達(dá)效率,提高crispr/cas9基因敲除效率,縮短基因敲除周期
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高效極速基因敲除神器-Crispr/Cas9 腺病毒
Crispr/Cas9 簡介
CRISPR (clustered, regularly interspaced, short palindromic repeats)是一種來自細(xì)菌降解入侵的病毒 DNA 或其他外源 DNA 的免疫機(jī)制。目前,來自Streptococcus pyogenes 的CRISPR-Cas9系統(tǒng)應(yīng)用最為廣泛。Cas9 蛋白(含有兩個(gè)核酸酶結(jié)構(gòu)域,可以分別切割DNA 兩條單鏈。Cas9首先與crRNA及tracrRNA結(jié)合成復(fù)合物,然后通過PAM序列結(jié)合并侵入DNA,形成RNA-DNA復(fù)合結(jié)構(gòu),進(jìn)而對目的DNA雙鏈進(jìn)行切割,使DNA雙鏈斷裂。
CRISPR-Cas9系統(tǒng)已經(jīng)成功應(yīng)用于植物、細(xì)菌、酵母、魚類及哺乳動(dòng)物細(xì)胞,是目前最高效的基因組編輯系統(tǒng)。
通過基因工程手段對crRNA和tracrRNA進(jìn)行改造,將其連接在一起得到sgRNA(single guide RNA)。融合的RNA具有與野生型RNA類似的活力,但因?yàn)榻Y(jié)構(gòu)得到了簡化更方便研究者使用。通過將表達(dá)sgRNA的原件與表達(dá)Cas9的原件相連接,得到可以同時(shí)表達(dá)兩者的質(zhì)粒,將其轉(zhuǎn)染細(xì)胞,便能夠?qū)δ康幕蜻M(jìn)行操作。
漢恒生物創(chuàng)新性的首次將cas9和gRNA整合到腺病毒載體中,成功包裝cas9腺病毒和gRNA腺病毒,很大程度上彌補(bǔ)了crispr/cas9質(zhì)粒感染效率低,從而導(dǎo)致敲除效率低的缺陷。
漢恒生物推出的Cas9/gRNA腺病毒利用cas9和gRNA結(jié)合特異性,同時(shí)借助腺病毒高感染效率,高表達(dá)效率,提高crispr/cas9基因敲除效率,縮短基因敲除周期,使得基因敲除周期短,成本低,更易于操作。
Crispr/Cas9腺病毒特點(diǎn):
1、可感染多種分裂期和非分裂期細(xì)胞,感染效率高、敲除效率高;
2、操作簡單,容易掌握;
3、基因敲除周期短,成本低;
4、適合哺乳動(dòng)物不同種屬不同基因的操作,適用范圍廣。
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