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漢恒生物技術(shù)工程師運用CRISPR/Cas9基因敲除技術(shù)，將腺相關(guān)病毒與SaCas9結(jié)合，即AAV-SaCas9，可以實現(xiàn)高效在體基因敲除，也是最新最領(lǐng)先的在體基因敲除技術(shù)
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在體敲除AAV-saCas9包裝
AAV-SaCas9簡介
最早在細菌中被發(fā)現(xiàn)，CRISPR-Cas9系統(tǒng)能夠切割DNA，充當了對抗病毒感染的一個重要防御機制。盡管許多的微生物物種都擁有這一系統(tǒng)，研究人員優(yōu)先選擇改造了來自化膿鏈球菌的Cas9酶(SpCas9)來改變高等生物的DNA，并已成為一系列高度通用的基因組修飾技術(shù)的基礎(chǔ)。
要想擾亂成體動物中的基因，必須要利用一些載體將CRISPR-Cas9系統(tǒng)的關(guān)鍵元件導入到細胞中。由于不會引起人類疾病并已在歐洲獲得臨床監(jiān)管機構(gòu)的批準，腺相關(guān)病毒(AAV)被視為是最有前景的候選載體之一。然而，AAV微小的負載能力使得同時包裝SpCas9酶和其他基因編輯必需的元件進入到單個病毒顆粒中成為一個挑戰(zhàn)。
麻省理工的科學家張峰研究員最新的研究發(fā)現(xiàn)一種來自金黃色葡萄球菌的Cas9核酸酶(SaCas9)，它比SpCas9小25%，在AAV病毒的包裝容量范圍之內(nèi)，從而為AAV的包裝問題提供了一個解決方案。
Nature. 2015 Apr 9;520(7546):186-91
漢恒生物技術(shù)工程師運用CRISPR/Cas9基因敲除技術(shù)，將腺相關(guān)病毒與SaCas9結(jié)合，即AAV-SaCas9，可以實現(xiàn)高效在體基因敲除，也是最新最領(lǐng)先的在體基因敲除技術(shù)。并且可以根據(jù)動物靶器官，選擇不同血清型的AAV（不同血清型AAV對各組織器官的親和性見下表）。是目前最有效的在體基因敲除技術(shù)。
AAV載體不同血清型
研究發(fā)現(xiàn) AAV 具有多種血清型，各種不同血清型的 AAV 載體的主要區(qū)別是衣殼蛋白不同，因此對不同的組織和細胞的轉(zhuǎn)染效率存在差異。目前漢恒生物在包裝腺相關(guān)病毒時有12 中不同的 AAV 血清型可供客戶選擇，建議客戶針對不同組織器官選擇相應(yīng)血清型的 AAV 病毒，見表 1。
表1.12種不同血清型AAV對各組織器官細胞的親和性
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血清型 |
組織親和性 |
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AAV1 |
肌肉，心臟，骨骼�。òㄐ募。�，神經(jīng)組織 |
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AAV2 |
中樞神經(jīng)，肌肉，肝臟，腦組織，眼， |
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AAV3 |
肌肉，肝臟，肺，眼 |
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AAV4 |
中樞神經(jīng)，肌肉，眼，腦 |
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AAV5 |
肺，眼，中樞神經(jīng)，關(guān)節(jié)滑膜，胰腺 |
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AAV6 |
肺，心臟 |
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AAV7 |
肌肉，肝臟 |
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AAV8 |
肝臟，眼，中樞神經(jīng)，肌肉 |
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AAV9 |
心臟，肌肉，肺（肺泡），肝臟，中樞神經(jīng) |
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DJ |
肝臟，視網(wǎng)膜，肺，腎臟 |
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DJ/8 |
肝臟，眼，中樞神經(jīng)，肌肉 |
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Rh10 |
肺, 心臟，肌肉，中樞神經(jīng)，肝臟 |
服務(wù)流程
AAV其他相關(guān)特色服務(wù)
1. 腺相關(guān)病毒AAV包裝服務(wù)
2. AAV在體自噬流檢測服務(wù)
3. AAV光遺傳技術(shù)服務(wù)
