流式細(xì)胞術(shù)與傳統(tǒng)的熒光鏡檢查相比,具有速度快、精度高、準(zhǔn)確性好等優(yōu)點(diǎn),成為當(dāng)代最先進(jìn)的細(xì)胞定量分析技術(shù)。
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流式檢測(cè)及分選
簡(jiǎn)介
流式細(xì)胞術(shù)(Flow Cytometry, FCM)是一種在功能水平上對(duì)單細(xì)胞或其他生物粒子進(jìn)行定量分析和分選的檢測(cè)手段,它可以高速分析上萬(wàn)個(gè)細(xì)胞,并能同時(shí)從一個(gè)細(xì)胞中測(cè)得多個(gè)參數(shù),與傳統(tǒng)的熒光鏡檢查相比,具有速度快、精度高、準(zhǔn)確性好等優(yōu)點(diǎn),成為當(dāng)代最先進(jìn)的細(xì)胞定量分析技術(shù)。
流式細(xì)胞分選原理
當(dāng)經(jīng)熒光染色或標(biāo)記的單細(xì)胞懸液放入樣品管中,被高壓壓入流動(dòng)室內(nèi)。流動(dòng)室內(nèi)充滿鞘液,在鞘液的包裹和推動(dòng)下,細(xì)胞被排成單列,以一定速度從流動(dòng)室噴口噴出。在流動(dòng)室的噴口上配有一個(gè)超高頻的壓電晶體,充電后振動(dòng),使噴出的液流斷裂為均勻的液滴,待測(cè)細(xì)胞就分散在這些液滴之中。將這些液滴充以正、負(fù)不同的電荷,當(dāng)液滴流經(jīng)過(guò)帶有幾千伏的偏轉(zhuǎn)板時(shí),在高壓電場(chǎng)的作用下偏轉(zhuǎn),落入各自的收集容器中,沒(méi)有充電的液滴落入中間的廢液容器,從而實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的分離。
流式細(xì)胞分選技術(shù)是以高能量激光照射高速流動(dòng)狀態(tài)下被熒光色素染色的單細(xì)胞或微粒,測(cè)量其產(chǎn)生的散射光和發(fā)射熒光的強(qiáng)度,從而對(duì)細(xì)胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遺傳、分子生物學(xué)性狀及功能狀態(tài)等進(jìn)行定性或定量檢測(cè)的一種現(xiàn)代細(xì)胞分析技術(shù),它可根據(jù)發(fā)射光的熒光強(qiáng)度和波長(zhǎng)將發(fā)光顆粒亞群分開(kāi)并可實(shí)現(xiàn)單克隆分選。