自噬簡介

          細(xì)胞自噬(autophagy or autophagocytosis)：又稱為Ⅱ型細(xì)胞死亡，是細(xì)胞在自噬相關(guān)基因(autophagy related gene，Atg) 的調(diào)控下利用溶酶體降解自身受損的細(xì)胞器和大分子物質(zhì)的過程。

 目前根據(jù)發(fā)生過程分為三類：Macroautophagy，Microautophagy和Chaperone-mediated autophagy CMA)。

 大自噬（Macroautophagy）：即我們說的自噬（autophagy）;

 微自噬（Microautophagy）：是指溶酶體主動、直接吞噬胞漿成分的一種方式;

 分子伴侶介導(dǎo)的自噬 (Chaperone-mediated autophagy，CMA)：一些分子伴侶，如hsp70，能幫助未折疊蛋白轉(zhuǎn)位入溶酶體。通常說的自噬泛指Macroautophagy.

自噬的過程

1）：細(xì)胞接受自噬誘導(dǎo)信號后，在胞漿的某處形成一個小的類似“脂質(zhì)體”樣的膜結(jié)構(gòu)，然后不斷擴(kuò)張，被稱為Phagophore。
2）：Phagophore不斷延伸，將胞漿中的任何成分，全部攬入，然后“收口”，成為密閉的球狀的autophagosome，即“自噬體”。
3）：自噬體形成后，可與細(xì)胞內(nèi)吞的吞噬泡、吞飲泡和內(nèi)體融合（這種情況不是必然要發(fā)生的）。
4）：自噬體與溶酶體融合形成autolysosome，期間自噬體的內(nèi)膜被溶酶體酶降解，2者的內(nèi)容物合為一體，自噬體中的“貨物”也被降解，產(chǎn)物（氨基酸、脂肪酸等）被輸送到胞漿中供細(xì)胞重新利用，而殘?jiān)�或被排出�?xì)胞外或滯留在胞漿中。

圖1. 自噬的過程圖

最有效的在體自噬流檢測工具：AAV-mRFP-GFP-LC3

         漢恒生物技術(shù)工程師構(gòu)建RFP-GFP-LC3雙標(biāo)的腺相關(guān)病毒（AAV）載體，包裝成雙標(biāo)的腺相關(guān)病毒，可在體觀察自噬，實(shí)時檢測自噬流的強(qiáng)弱，更加準(zhǔn)確、清晰、直觀！彌補(bǔ)了LC3自噬雙標(biāo)腺病毒在體轉(zhuǎn)染的缺陷，并且可根據(jù)組織器官的親和性，選擇不同的AAV血清型，是最有效的載體自噬流檢測工具！

圖2. AAV-mRFP-GFP-LC3指示載體腦組織自噬流

（Cell Death Dis.2013 Nov 14;4:e917）

AAV載體不同血清型

研究發(fā)現(xiàn) AAV 具有多種血清型，各種不同血清型的 AAV 載體的主要區(qū)別是衣殼蛋白不同，因此對不同的組織和細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率存在差異。目前漢恒生物在包裝腺相關(guān)病毒時有12 中不同的 AAV 血清型可供客戶選擇，建議客戶針對不同組織器官選擇相應(yīng)血清型的 AAV 病毒，見表 1。

表1.12種不同血清型AAV對各組織器官細(xì)胞的親和性

AAV其他相關(guān)特色服務(wù)

1.    腺相關(guān)病毒AAV包裝服務(wù)

2.    在體敲除AAV-SaCas9包裝服務(wù)

3.    AAV光遺傳技術(shù)服務(wù)