康成生物是Arraystar公司中國地區(qū)唯一代理商,為您提供一站式circRNA芯片技術(shù)服務(wù),您只需要提供保存完好的組織或細(xì)胞標(biāo)本,康成的技術(shù)服務(wù)人員就可為您完成全部實驗操作,并提供完整的實驗報告。
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環(huán)狀RNA(circRNA)是一類由特殊剪接機制形成的、具有閉合環(huán)狀結(jié)構(gòu)、大量存在于真核轉(zhuǎn)錄組中的非編碼RNA;也是目前生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究熱點分子。circRNA分子的組織特異性、疾病特異性、時序特異性及高穩(wěn)定性等特征,使得circRNA作為臨床疾病的biomarker具有明顯的優(yōu)勢。近來研究顯示,環(huán)狀RNA在不同物種中起到miRNA海綿的作用,稱之為競爭性內(nèi)源RNA(ceRNA),即能競爭性結(jié)合miRNA。而與疾病關(guān)聯(lián)性miRNA的相互作用說明環(huán)狀RNA對疾病的調(diào)控起著非常重要的作用。此外,一些內(nèi)含子類型的環(huán)狀RNA(ciRNA)會促進宿主基因的轉(zhuǎn)錄。
為了能夠更好地研究circRNA,美國Arraystar公司在全球首款circRNA芯片基礎(chǔ)上迅即升級版本為V2.0。其circRNA來源融合了環(huán)狀RNA研究的最新頂尖文獻,所有cicrRNA都經(jīng)過了嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶嶒烌炞C,以便于對不同生理及病理條件下的circRNA進行系統(tǒng)的研究。同時我們對所有差異表達的circRNA用高匹配值的miRNA靶標(biāo)位點進行了標(biāo)注,這將有利于對circRNA作為天然miRNA海綿功能的進行研究。
康成生物是Arraystar公司中國地區(qū)唯一代理商,為您提供一站式circRNA芯片技術(shù)服務(wù),您只需要提供保存完好的組織或細(xì)胞標(biāo)本,康成的技術(shù)服務(wù)人員就可為您完成全部實驗操作,并提供完整的實驗報告。 |
Arraystar環(huán)狀RNA芯片產(chǎn)品列表
服務(wù) |
芯片 |
規(guī)格 |
描述 |
Human Circular RNA Array Service |
NEW Human Circular RNA Array V2.0 |
8 × 15K |
13,617 human circular RNAs |
Mouse Circular RNA Array Service |
NEW Mouse Circular RNA Array V2.0 |
8 × 15K |
14,236 Mouse circular RNAs |
Rat Circular RNA Array Service |
NEW Rat Circular RNA Array V2.0 |
8 × 15K |
14,145 Rat circular RNAs |
Arraystar環(huán)狀RNA芯片特點
*圖釋:定量可靠的轉(zhuǎn)錄本比例與測序深度關(guān)系圖。RNA測序一般產(chǎn)生低于30M mRNA reads(藍圈),低于0.5M circular junction reads(紅圈),真正得到有效檢測的circular junctions低于5%。(Adopted from Labaj et al, (2011) Bioinformatics [PMID 21685096].)
康成生物環(huán)狀RNA芯片技術(shù)服務(wù)主要實驗流程
1. 樣品RNA抽提
• 實驗對象為組織樣品,取適量(50-100mg)新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品,加1ml的RNA抽提試劑TRIzol(Invitrogen),勻漿后抽提RNA。
• 實驗對象為細(xì)胞樣品,每份樣品取1×106~1×107細(xì)胞,完全吸去培養(yǎng)液后加1ml的RNA抽提試劑TRIzol,裂解后抽提RNA。
2. RNA質(zhì)量檢測
• 使用Nanodrop測定RNA 在分光光度計260nm、280nm和230nm的吸收值,以計算濃度并評估純度。
• 用甲醛電泳試劑進行變性瓊脂糖凝膠電泳,檢測RNA純度及完整性。
• 提供RNA QC報告。
3. RNase R處理
4. cDNA/aRNA樣品合成和標(biāo)記
5. 標(biāo)記效率質(zhì)量檢測
• 使用Nanodrop檢測熒光標(biāo)記效率,標(biāo)記效率合格以保證后續(xù)芯片實驗結(jié)果的可靠性。
6. 芯片雜交
• 在標(biāo)準(zhǔn)條件下將標(biāo)記好的探針和高密度基因組芯片進行雜交。
7. 圖像采集和數(shù)據(jù)分析
• 使用GenePix 4000B芯片掃描儀掃描芯片的熒光強度,并將實驗結(jié)果轉(zhuǎn)換成數(shù)字型數(shù)據(jù)保存,使用配套軟件對原始數(shù)據(jù)進行分析運算。
8. 提供實驗報告:
• Scanning Image: Cy3熒光掃描圖像;
• Scatter Plot: 散點圖,X軸為Control信號值,Y軸為Experiment信號值,表示信號數(shù)據(jù)總體分布趨勢;
• Raw Data: 探針的掃描熒光信號強度原始數(shù)據(jù);
• Normalized Data: 經(jīng)過統(tǒng)計學(xué)方法標(biāo)準(zhǔn)化后數(shù)值;
• P–value: T-test統(tǒng)計分析顯著差異表達的基因,p-value越小,該circRNA在兩組樣本間差異表達越顯著;
• Significant Up & Down Regulated CircRNA List: 顯著差異表達的circRNA列表包含F(xiàn)old Change, p-value以及circRNA的詳細(xì)注釋信息(相應(yīng)的線性mRNA和miRNA結(jié)合位點)。
上?党缮锕こ逃邢薰
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