實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)

Real time PCR Services

實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)即是在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

服務(wù)類別：	分子與細(xì)胞	總訪問：	535
最后更新：	2013-12-3	半年訪問：	1
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服務(wù)商：廣州諾特生物科技有限公司

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服務(wù)介紹
公司簡(jiǎn)介

主要實(shí)驗(yàn)步驟如下： 1. 設(shè)計(jì)并合成Realtime PCR引物。 2. 引物溶解后使用TaqDNA聚合酶進(jìn)行含SG（SYBR® Green）的PCR反應(yīng)的優(yōu)化。 3. 客戶樣品RNA抽提 4. RNA質(zhì)量檢測(cè) 5. 按照逆轉(zhuǎn)錄酶使用說明將樣品RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA。 6. 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品：進(jìn)行相對(duì)定量，需要先將樣品的目的基因以及管家基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增，其產(chǎn)物進(jìn)行梯度稀釋用于做標(biāo)準(zhǔn)曲線。 7. 標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品和待測(cè)樣品分別加入到含SG的RealTime PCR反應(yīng)液中，進(jìn)行RealTime PCR擴(kuò)增和檢測(cè)。 8. 檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線分析，以對(duì)待測(cè)樣品的目的基因進(jìn)行定量。相對(duì)定量實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)一步用樣品的目的基因測(cè)得值除以管家基因測(cè)得值以校正誤差，所得結(jié)果代表某樣品的目的基因相對(duì)含量。 9. 提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方法及實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果及相關(guān)圖表。

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