RNAi技術(shù)是一種新型的基因沉默工具,可簡單、快速、特異地分析特定基因的細(xì)胞功能。其工作原理如下: 在內(nèi)源蛋白復(fù)合物(RISC)的作用下,雙鏈RNA分子可以通過堿基互補(bǔ)配對原則而降解目標(biāo)靶基因的信使RNA(mRNA),從而達(dá)到沉默靶基因表達(dá)水平的目的。本公司推出針對RNAi技術(shù)的全套技術(shù)服務(wù),從最初的篩選您感興趣的小RNA直至最終的動物模型實(shí)驗(yàn),為您提供全方位、一站式的服務(wù)。所有技術(shù)方案由資深科學(xué)家與您共同制定,整個實(shí)驗(yàn)過程由專業(yè)博士生操作,保證您結(jié)果的準(zhǔn)確性!
服務(wù)流程:
第一步 接收客戶提供的組織或者細(xì)胞樣本,提取總RNA后,進(jìn)行生物芯片初級篩選檢測,得到客戶感興趣物種的所有miRNA在該樣品中的表達(dá)水平圖譜。
第二步 從芯片檢測結(jié)果中挑出表達(dá)差異明顯的miRNA,在多個組織或細(xì)胞樣品中進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR檢測驗(yàn)證,選定感興趣的miRNA。
- 第三步 根據(jù)主流預(yù)測miRNA目標(biāo)基因軟件pictar 和targetscan,預(yù)測出該miRNA的目標(biāo)mRNA,構(gòu)建這些mRNA表達(dá)質(zhì)粒,與miRNA共轉(zhuǎn)染進(jìn)細(xì)胞后,得到miRNA與目標(biāo)mRNA的luciferase檢測結(jié)果。
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第四步 根據(jù)實(shí)驗(yàn)得到的luciferase檢測結(jié)果,挑出miRNA有作用效果的mRNA,進(jìn)行mRNA質(zhì)粒突變以WesternBlot試驗(yàn)。
- 第五步 對miRNA進(jìn)行慢病毒包裝,侵染進(jìn)選定的合適細(xì)胞系。將侵染好的細(xì)胞打入到小鼠體內(nèi),進(jìn)行動物實(shí)驗(yàn)。
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北京唯尚立德生物科技有限公司是一家致力于生命科學(xué)領(lǐng)域相關(guān)技術(shù)項目開發(fā)的公司。公司核心團(tuán)隊由海外歸國學(xué)者和畢業(yè)于國內(nèi)頂尖學(xué)府的博士組成。目前已建立起一系列完善的技術(shù)平臺。
公司具有大規(guī)?焖俳M裝TALEN的核心技術(shù),以及完善的慢病毒包裝、細(xì)胞系構(gòu)建、模式生物構(gòu)建、miRNA相關(guān)全套技術(shù)服務(wù)平臺,目前主要業(yè)務(wù)為客戶提供快速高品質(zhì)的TALEN靶向基因敲除相關(guān)服務(wù)和miRNA相關(guān)全套技術(shù)服務(wù)。作為國內(nèi)最早開始提供TALEN靶向基因敲除技術(shù)服務(wù)的公司之一,我們在短短一年之內(nèi)已經(jīng)為客戶和合作伙伴提供了1000多對驗(yàn)證活性的TALEN質(zhì)粒,多例靶向基因敲除的小鼠、基因敲除及敲入的細(xì)胞系以及基因敲除的斑馬魚等高品質(zhì)服務(wù)案例,多個合作客戶已經(jīng)成功完成了靶向基因敲除干細(xì)胞系的構(gòu)建以及基因敲除豬的構(gòu)建。
我們深知時間與質(zhì)量對科研工作的重要性,為此我們將在獲悉您的需要后,由我們的專家團(tuán)隊在第一時間與您取得聯(lián)系,詳細(xì)了解您的要求,在最短的時間內(nèi)提出最佳的技術(shù)方案,并隨時與您保持溝通,隨時解決項目進(jìn)程中出現(xiàn)的問題。
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