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miRNA一站式技術(shù)服務(wù)
推出針對RNAi技術(shù)的全套技術(shù)服務(wù),從最初的篩選您感興趣的小RNA直至最終的動物模型實(shí)驗(yàn),為您提供全方位、一站式的服務(wù)。
服務(wù)類別:分子與細(xì)胞總訪問:478
最后更新:2013-8-12半年訪問:1
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服務(wù)商: 北京唯尚立德生物科技有限公司 查看該公司所有服務(wù) >>
  • 服務(wù)介紹
  • 公司簡介

RNAi技術(shù)是一種新型的基因沉默工具,可簡單、快速、特異地分析特定基因的細(xì)胞功能。其工作原理如下:  在內(nèi)源蛋白復(fù)合物(RISC)的作用下,雙鏈RNA分子可以通過堿基互補(bǔ)配對原則而降解目標(biāo)靶基因的信使RNA(mRNA),從而達(dá)到沉默靶基因表達(dá)水平的目的。本公司推出針對RNAi技術(shù)的全套技術(shù)服務(wù),從最初的篩選您感興趣的小RNA直至最終的動物模型實(shí)驗(yàn),為您提供全方位、一站式的服務(wù)。所有技術(shù)方案由資深科學(xué)家與您共同制定,整個實(shí)驗(yàn)過程由專業(yè)博士生操作,保證您結(jié)果的準(zhǔn)確性!

服務(wù)流程:

第一步  接收客戶提供的組織或者細(xì)胞樣本,提取總RNA后,進(jìn)行生物芯片初級篩選檢測,得到客戶感興趣物種的所有miRNA在該樣品中的表達(dá)水平圖譜。


 

第二步  從芯片檢測結(jié)果中挑出表達(dá)差異明顯的miRNA,在多個組織或細(xì)胞樣品中進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR檢測驗(yàn)證,選定感興趣的miRNA。 



第三步  根據(jù)主流預(yù)測miRNA目標(biāo)基因軟件pictar  和targetscan,預(yù)測出該miRNA的目標(biāo)mRNA,構(gòu)建這些mRNA表達(dá)質(zhì)粒,與miRNA共轉(zhuǎn)染進(jìn)細(xì)胞后,得到miRNA與目標(biāo)mRNA的luciferase檢測結(jié)果。
 


第四步  根據(jù)實(shí)驗(yàn)得到的luciferase檢測結(jié)果,挑出miRNA有作用效果的mRNA,進(jìn)行mRNA質(zhì)粒突變以WesternBlot試驗(yàn)。 



第五步  對miRNA進(jìn)行慢病毒包裝,侵染進(jìn)選定的合適細(xì)胞系。將侵染好的細(xì)胞打入到小鼠體內(nèi),進(jìn)行動物實(shí)驗(yàn)。 
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