miRNA(microRNA)是一類長(zhǎng)度約20-24nt的具有調(diào)控功能的非編碼單鏈RNA，在細(xì)胞增殖、凋亡、器官發(fā)生、發(fā)育、造血以及腫瘤發(fā)生等若干途徑中發(fā)揮重要作用。miRNA表達(dá)的定量分析是生物功能研究的基礎(chǔ)，細(xì)胞、組織或血液中的miRNA的檢測(cè)有助于發(fā)現(xiàn)新的早期診斷和預(yù)測(cè)療效及患者預(yù)后的生物標(biāo)志物。但是在對(duì)成熟的miRNA檢測(cè)中，由于自身堿基數(shù)過(guò)少，同族miRNA之間通常只有一到兩個(gè)堿基的差別，而且絕大部分miRNA在細(xì)胞中的表達(dá)水平都比較低，這些特性使傳統(tǒng)檢測(cè)方法受到很大限制。目前常用的檢測(cè)miRNA方法有：
    1、Northern Blot標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，缺點(diǎn)是靈敏度低，需要幾十微克總RNA，費(fèi)時(shí)費(fèi)力
    2、實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)基于實(shí)時(shí)熒光定量PCR和等溫放大的方法，優(yōu)點(diǎn)是靈敏度高
    3、微陣列芯片檢測(cè)方法基于基因芯片的方法，優(yōu)點(diǎn)是通量高；缺點(diǎn)是有背景和雜信號(hào)干擾，特異性和準(zhǔn)確度較差
    4、大規(guī)模測(cè)序方法利用Solexa等大規(guī)模測(cè)序技術(shù)，進(jìn)行高通量多樣本的miRNA表達(dá)圖譜的分析，但是成本較高。

miRNA檢測(cè)方法
    目前市場(chǎng)占主導(dǎo)地位的商品是Invitrogen公司(原ABI公司)開(kāi)發(fā)的實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法(TaqMan miRNA檢測(cè)方法)該方法在一定程度上克服了上述缺陷，但是仍具有高成本的缺點(diǎn)。我們通過(guò)自主創(chuàng)新，成功研發(fā)出一種具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)且方便實(shí)用的miRNA定量檢測(cè)技術(shù)(RAM),這種方法具有高靈敏度、高特異性、低成本等特點(diǎn)，目前已得到一定程度的應(yīng)用。

RAM檢測(cè)方法的技術(shù)特點(diǎn)
    1、靈敏度高：該方法的檢測(cè)靈敏度高達(dá)1000個(gè)拷貝數(shù)，檢測(cè)范圍為103到1010拷貝數(shù)，該方法足以檢測(cè)單個(gè)細(xì)胞中miRNA狀況的變化
    2、特異性好：能對(duì)miRNA中只有一個(gè)堿基差別的同族序列進(jìn)行特異性檢測(cè)。獨(dú)特的RT-primer、bridge probes以及amplification primers(mainly P1)設(shè)計(jì)能夠區(qū)分3′、5′及中間區(qū)域的堿基差異(Figure3)。更為獨(dú)特的是,當(dāng)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)目的為檢測(cè)成熟miRNA時(shí)，即使pre-miRNA的含量高達(dá)100倍，對(duì)檢測(cè)目標(biāo)的干擾并不會(huì)比背景干擾高
    3、樣品處理簡(jiǎn)單：只需從樣品中提取總RNA，無(wú)需特殊處理，可對(duì)其中的miRNA進(jìn)行直接檢測(cè)�？梢詸z測(cè)約單個(gè)細(xì)胞的miRNA(每個(gè)細(xì)胞的總RNA量約為0.02ng)，以及不同組織的miRNA。
    4、成本較低，無(wú)須TaqMan探針等昂貴試劑
    5、多種內(nèi)參檢測(cè)：我們方法可以對(duì)目前通用的內(nèi)參U6 snoRNA檢測(cè)，也可檢測(cè)在組織中普遍穩(wěn)定表達(dá)的mir-191等miRNA內(nèi)參，可以方便的根據(jù)客戶的需求設(shè)計(jì)不同的內(nèi)參檢測(cè)

我們提供的miRNA檢測(cè)服務(wù)內(nèi)容包含
    miRNA相對(duì)定量檢測(cè)
    miRNA絕對(duì)定量檢測(cè)
    另外，我們也提供對(duì)mRNA的檢測(cè)服務(wù)

北京唯尚立德生物科技有限公司是一家致力于生命科學(xué)領(lǐng)域相關(guān)技術(shù)項(xiàng)目開(kāi)發(fā)的公司。公司核心團(tuán)隊(duì)由海外歸國(guó)學(xué)者和畢業(yè)于國(guó)內(nèi)頂尖學(xué)府的博士組成。目前已建立起一系列完善的技術(shù)平臺(tái)。
    公司具有大規(guī)�？焖俳M裝TALEN的核心技術(shù)，以及完善的慢病毒包裝、細(xì)胞系構(gòu)建、模式生物構(gòu)建、miRNA相關(guān)全套技術(shù)服務(wù)平臺(tái)，目前主要業(yè)務(wù)為客戶提供快速高品質(zhì)的TALEN靶向基因敲除相關(guān)服務(wù)和miRNA相關(guān)全套技術(shù)服務(wù)。作為國(guó)內(nèi)最早開(kāi)始提供TALEN靶向基因敲除技術(shù)服務(wù)的公司之一，我們?cè)诙潭桃荒曛畠?nèi)已經(jīng)為客戶和合作伙伴提供了1000多對(duì)驗(yàn)證活性的TALEN質(zhì)粒，多例靶向基因敲除的小鼠、基因敲除及敲入的細(xì)胞系以及基因敲除的斑馬魚(yú)等高品質(zhì)服務(wù)案例，多個(gè)合作客戶已經(jīng)成功完成了靶向基因敲除干細(xì)胞系的構(gòu)建以及基因敲除豬的構(gòu)建。
     我們深知時(shí)間與質(zhì)量對(duì)科研工作的重要性，為此我們將在獲悉您的需要后，由我們的專家團(tuán)隊(duì)在第一時(shí)間與您取得聯(lián)系，詳細(xì)了解您的要求，在最短的時(shí)間內(nèi)提出最佳的技術(shù)方案，并隨時(shí)與您保持溝通，隨時(shí)解決項(xiàng)目進(jìn)程中出現(xiàn)的問(wèn)題。
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