細胞培養(yǎng)服務(wù)內(nèi)容:
1.培養(yǎng)大量狀態(tài)良好的細胞用于后續(xù)實驗。
2.負責將客戶所購買的細胞凍存保種與本實驗室,實驗完成后客戶可以要求回寄細胞。
客戶要求及實驗周期
1.客戶購買細胞郵寄與我們培養(yǎng)
客戶必須提供狀態(tài)良好的細胞我們才能夠順利快速地進行實驗。因為在郵寄過程中細胞受溫度與營養(yǎng)缺失等因素影響很大,收到細胞時很可能細胞已經(jīng)全部死亡或已經(jīng)污染,這樣需要客戶再次郵寄細胞,郵寄細胞在三次以內(nèi)。
2.我們也可以為客戶代為購買細胞并且提供凍存保種服務(wù),客戶需要隨時郵寄。
3.如要培養(yǎng)的為具有確定目的基因的細胞株,需要提供其中相關(guān)目的基因的信息。收到細胞后我們也會及時檢測目的基因表達情況,如果沒有目的基因表達客戶需要重新提供細胞,出現(xiàn)此情況實驗推后我們不負相關(guān)責任。
4.客戶郵寄細胞時需一并提供細胞培養(yǎng)條件及相關(guān)注意事項。
5.培養(yǎng)周期在3-7天(視細胞類型及生長情況而定)。
細胞轉(zhuǎn)染服務(wù)內(nèi)容:
技術(shù)服務(wù):
磷酸鈣轉(zhuǎn)染
磷酸鈣沉淀法是基于磷酸鈣-DNA復(fù)合物的一種將DNA導入真核細胞的轉(zhuǎn)染方法,磷酸鈣被認為有利于促進外源DNA與靶細胞表面的結(jié)合。磷酸鈣-DNA復(fù)合物粘附到細胞膜并通過胞飲作用進入靶細胞,被轉(zhuǎn)染的DNA可以整合到靶細胞的染色體中從而產(chǎn)生有不同基因型和表型的穩(wěn)定克隆。這種方法首先由Graham和van der Ebb使用,后由Wigler修改而成。可廣泛用于轉(zhuǎn)染許多不同類型的細胞,不但適用于短暫表達,也可生成穩(wěn)定的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物。
該法不適用于原代細胞(所需的DNA濃度較高),操作簡便但重復(fù)性差。在實驗中使用的每種試劑都必須小心校準,保證質(zhì)量,甚至偏離最優(yōu)條件十分之一個pH都可能導致磷酸鈣轉(zhuǎn)染的失敗。而且對于有些細胞不適用。
脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染
脂質(zhì)體為人工膜泡,可作為體內(nèi),體外物質(zhì)轉(zhuǎn)送載體。將需轉(zhuǎn)移的DNA或RNA包裹于質(zhì)脂體,由于質(zhì)脂體具有磷脂雙層與胞膜相似,因此,可與細胞膜融合,將DNA轉(zhuǎn)入宿主細胞。
影響轉(zhuǎn)染效率差異的主要原因是細胞系間個體的差異,有的細胞系細胞膜通透性較好,質(zhì)脂體復(fù)合物較容易進入細胞,轉(zhuǎn)染效率就高。又有的細胞系本生就不容易被轉(zhuǎn)染。其次脂類與DNA形成易于轉(zhuǎn)染結(jié)構(gòu)的特性存在負面效應(yīng)。其中主要的問題是毒性,表現(xiàn)為細胞聚集在一起,從壁上脫落。另為脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染易于受到血清中的脂肪與脂蛋白以及細胞外基質(zhì)中帶店成分,如硫酸軟骨素等干擾引起細胞死亡從而影響轉(zhuǎn)染效率。
客戶方需提供:
1.生長狀況良好的宿主細胞株,一并提供細胞特性,培養(yǎng)條件及相關(guān)注意事項。
2.我們也可以為客戶代為購買細胞并且提供凍存保種服務(wù),客戶需要隨時郵寄。
3.提供質(zhì)粒,并說明質(zhì)粒大小,濃度,抗性,拷貝數(shù)等相關(guān)背景資料。
聯(lián)系方式:021-35110780,13524859797,聯(lián)系人:馬經(jīng)理 在線QQ;1010093685
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