近年來,包括抗體類藥物在內的重組蛋白逐漸成為生物醫(yī)學科研和臨床中的主導產品。目前,這類產品主要通過CHO/dhfr-和CHO/GS-兩種系統(tǒng)表達。這兩種系統(tǒng)存在如下缺陷:表達細胞僅限于DHFR缺陷型或GS缺陷型細胞;篩選工作量大,周期長;選擇壓力去除后,目的基因不穩(wěn)定;細胞通過其他途徑對選擇壓力產生耐受性。
在IOS (Integration Operating System)技術的基礎上發(fā)展起來的多拷貝整合技術(Multiple Copy Integration-MCI)的高效穩(wěn)定表達系統(tǒng),通過完成目的基因在細胞基因組中的多拷貝整合而實現(xiàn)重組蛋白的超高表達。
在高效穩(wěn)定抗體表達的CHO細胞株的建立方面,MCI技術與現(xiàn)有的兩種相比有明顯的優(yōu)勢:
1. 適用于任何種類的表達細胞,包括但不限制于CHO-K1,CHO-S,Sp2/0,293T等;
2. 整合效率高,可實現(xiàn)超高拷貝的基因整合(多達幾十個拷貝);抗體表達量高,可達5g/L左右;
3. 高表達克隆篩選周期短,1個月左右;
4. 目的基因永久整合至細胞基因組,可穩(wěn)定遺傳。
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