日前《新型冠狀病毒肺炎診療方案(試行第六版)》正式發(fā)布,確診病例需有病原學(xué)證據(jù)陽(yáng)性結(jié)果(實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)新型冠狀病毒核酸陽(yáng)性;或病毒基因測(cè)序,與已知的新型冠狀病毒高度同源)。另外,相比此前版本,新版增加了COVID-19的傳播途徑存在氣溶膠傳播的可能。
這種可能性對(duì)我們做核酸檢測(cè)的科研人員來(lái)說(shuō)威脅性又大大升級(jí)了,毋庸置疑,核酸檢測(cè)是COVID-19無(wú)創(chuàng)診斷的金標(biāo)準(zhǔn),結(jié)合臨床CT診斷方式,已得到我國(guó)臨床專家的支持。
那么我們?cè)谧龊怂釞z測(cè)時(shí),樣本處理應(yīng)該注意什么事項(xiàng)?怎樣操作可以盡可能地減少氣溶膠的產(chǎn)生呢?小艾在此整理了一些注意事項(xiàng)獻(xiàn)給我們的一線科研工作者們。
樣品的滅活處理
對(duì)送檢樣本進(jìn)行56℃下30分鐘的滅活,滅活后的樣本管需在生物安全柜內(nèi)打開(kāi)最內(nèi)層的容器,將拭子保存液混勻后進(jìn)行分裝和用于核酸提取。在此,小艾提醒各位科研工作者,千萬(wàn)不要以為滅活后就可以掉以輕心,病毒滅活效果與其所在基質(zhì)成分有關(guān),因?qū)嶒?yàn)條件所限,我們無(wú)法評(píng)估該方法滅活病毒的真實(shí)效果。此外,我們選擇滅活后建議再靜置10 min至室溫,理論上來(lái)說(shuō),靜置的時(shí)間越長(zhǎng),產(chǎn)生氣溶膠的風(fēng)險(xiǎn)越小;诖耍瑴缁钐幚砗蟮臉颖救砸暈榫哂懈腥拘,其后續(xù)處理應(yīng)視同未滅活的樣本。
IKA ICC basic pro 20 c 浸入式加熱循環(huán)器適合水浴滅活處理,最高可將液體加熱至 150 °C。適合在開(kāi)放式或有蓋熱浴容器中使用。集成了強(qiáng)勁速度調(diào)節(jié)式壓力/抽吸泵,確保浴槽內(nèi)各個(gè)角落溫度保持高度均一,溫度均一性高達(dá)+/-0.2°C。不銹鋼浴槽易于清潔,清潔無(wú)死角,耐化學(xué)腐蝕,可用 75%乙醇消毒滅菌。
IKA Dry Block Heater 干浴器適合空氣滅活處理,隨機(jī)配置PT-1000溫度傳感器可直接對(duì)容器內(nèi)的樣品進(jìn)行控溫。它可用于對(duì) PCR 管,PCR 聯(lián)管,Greiner管,微孔板和比色皿進(jìn)行精確加熱。無(wú)級(jí)調(diào)溫,最高可達(dá)120 °C。定時(shí)功能: 可倒計(jì)時(shí), 時(shí)間范圍為1 s - 99h 59min。
IKA干浴器有豐富的多樣的加熱塊,可根據(jù)病毒采血管尺寸選擇。
IKA Oven 125 control 系列功能強(qiáng)大,125L內(nèi)部空間滿足同時(shí)處理大量樣本的需求?焖偌訜岷途_的溫度調(diào)節(jié)保證了用戶對(duì)質(zhì)量控制或可重現(xiàn)結(jié)果的要求。高質(zhì)量的絕緣,可減少氣體排放和運(yùn)行成本,并確保了極佳的溫度均勻性。
樣本的核酸提取
在樣本的裂解,洗脫,提取全過(guò)程中,需要頻繁使用移液器,振蕩器,離心機(jī)。小艾建議各位科研工作者,在這整個(gè)過(guò)程中,盡量動(dòng)作輕柔,小心,避免可能會(huì)抑制后續(xù)PCR反應(yīng)的操作,避免氣溶膠的產(chǎn)生。
IKA Pette 系列移液器分單道固定和可調(diào)移液器,圓錐吸頭抗沖擊、抗紫外線和抗化學(xué)腐蝕,確保提供長(zhǎng)期可靠的移液工作。標(biāo)配3個(gè)不同材質(zhì)及大小的把手,小艾個(gè)人感覺(jué)軟把手特別適合頻繁移液的操作,減輕手部負(fù)擔(dān)。
此外,IKA Pette移液器可整支高壓滅菌,避免交叉污染導(dǎo)致假陽(yáng)性。小艾提醒各位科研工作者注意移液操作規(guī)范,移液速度,槍頭浸入深度,詳細(xì)可參考小艾分享的移液器操作注意事項(xiàng),緩慢移液,有利于避免氣溶膠。
IKA G-L離心機(jī)特別適用于分子生物學(xué)領(lǐng)域,獨(dú)特安全保護(hù)功能,標(biāo)配金屬轉(zhuǎn)子和蓋子, 只有在蓋子完全密閉的情況下,才能開(kāi)啟運(yùn)行,嚴(yán)防離心管意外破碎形成氣溶膠對(duì)科研人員的影響。
IKA 提供多款高質(zhì)量渦旋振蕩器,小艾建議盡量選擇速度可調(diào)式,根據(jù)實(shí)際需要設(shè)定合適轉(zhuǎn)速,避免氣溶膠。
總而言之,核酸提取全過(guò)程需要注意的地方繁多,但我們只要做好三級(jí)防護(hù),按操作規(guī)程正確操作,提高個(gè)人防護(hù)意識(shí),實(shí)驗(yàn)后的消毒清潔,既可確保個(gè)人人身安全。
[參考文獻(xiàn)]
1.《新型冠狀病毒感染的肺炎診療方案(試行第六版)》
2.《國(guó)家衛(wèi)生健康委辦公廳關(guān)于印發(fā)新型冠狀病毒感染的肺炎防控方案(第三版)》(國(guó)衛(wèi)辦疾控函[2020]80號(hào))
3.《新型冠狀病毒實(shí)驗(yàn)室生物安全指南(第二版)》(國(guó)衛(wèi)辦科教函[2020]70號(hào))
4. 華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科新型冠狀病毒流行地區(qū)臨床實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)問(wèn)題解答(第一版)
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