日前《新型冠狀病毒肺炎診療方案(試行第六版)》正式發(fā)布,確診病例需有病原學證據(jù)陽性結(jié)果(實時熒光RT-PCR檢測新型冠狀病毒核酸陽性;或病毒基因測序,與已知的新型冠狀病毒高度同源)。另外,相比此前版本,新版增加了COVID-19的傳播途徑存在氣溶膠傳播的可能。
這種可能性對我們做核酸檢測的科研人員來說威脅性又大大升級了,毋庸置疑,核酸檢測是COVID-19無創(chuàng)診斷的金標準,結(jié)合臨床CT診斷方式,已得到我國臨床專家的支持。
那么我們在做核酸檢測時,樣本處理應該注意什么事項?怎樣操作可以盡可能地減少氣溶膠的產(chǎn)生呢?小艾在此整理了一些注意事項獻給我們的一線科研工作者們。
樣品的滅活處理
對送檢樣本進行56℃下30分鐘的滅活,滅活后的樣本管需在生物安全柜內(nèi)打開最內(nèi)層的容器,將拭子保存液混勻后進行分裝和用于核酸提取。在此,小艾提醒各位科研工作者,千萬不要以為滅活后就可以掉以輕心,病毒滅活效果與其所在基質(zhì)成分有關,因?qū)嶒灄l件所限,我們無法評估該方法滅活病毒的真實效果。此外,我們選擇滅活后建議再靜置10 min至室溫,理論上來說,靜置的時間越長,產(chǎn)生氣溶膠的風險越小;诖,滅活處理后的樣本仍視為具有感染性,其后續(xù)處理應視同未滅活的樣本。
IKA ICC basic pro 20 c 浸入式加熱循環(huán)器適合水浴滅活處理,最高可將液體加熱至 150 °C。適合在開放式或有蓋熱浴容器中使用。集成了強勁速度調(diào)節(jié)式壓力/抽吸泵,確保浴槽內(nèi)各個角落溫度保持高度均一,溫度均一性高達+/-0.2°C。不銹鋼浴槽易于清潔,清潔無死角,耐化學腐蝕,可用 75%乙醇消毒滅菌。
IKA Dry Block Heater 干浴器適合空氣滅活處理,隨機配置PT-1000溫度傳感器可直接對容器內(nèi)的樣品進行控溫。它可用于對 PCR 管,PCR 聯(lián)管,Greiner管,微孔板和比色皿進行精確加熱。無級調(diào)溫,最高可達120 °C。定時功能: 可倒計時, 時間范圍為1 s - 99h 59min。
IKA干浴器有豐富的多樣的加熱塊,可根據(jù)病毒采血管尺寸選擇。
IKA Oven 125 control 系列功能強大,125L內(nèi)部空間滿足同時處理大量樣本的需求。快速加熱和精確的溫度調(diào)節(jié)保證了用戶對質(zhì)量控制或可重現(xiàn)結(jié)果的要求。高質(zhì)量的絕緣,可減少氣體排放和運行成本,并確保了極佳的溫度均勻性。
樣本的核酸提取
在樣本的裂解,洗脫,提取全過程中,需要頻繁使用移液器,振蕩器,離心機。小艾建議各位科研工作者,在這整個過程中,盡量動作輕柔,小心,避免可能會抑制后續(xù)PCR反應的操作,避免氣溶膠的產(chǎn)生。
IKA Pette 系列移液器分單道固定和可調(diào)移液器,圓錐吸頭抗沖擊、抗紫外線和抗化學腐蝕,確保提供長期可靠的移液工作。標配3個不同材質(zhì)及大小的把手,小艾個人感覺軟把手特別適合頻繁移液的操作,減輕手部負擔。
此外,IKA Pette移液器可整支高壓滅菌,避免交叉污染導致假陽性。小艾提醒各位科研工作者注意移液操作規(guī)范,移液速度,槍頭浸入深度,詳細可參考小艾分享的移液器操作注意事項,緩慢移液,有利于避免氣溶膠。
IKA G-L離心機特別適用于分子生物學領域,獨特安全保護功能,標配金屬轉(zhuǎn)子和蓋子, 只有在蓋子完全密閉的情況下,才能開啟運行,嚴防離心管意外破碎形成氣溶膠對科研人員的影響。
IKA 提供多款高質(zhì)量渦旋振蕩器,小艾建議盡量選擇速度可調(diào)式,根據(jù)實際需要設定合適轉(zhuǎn)速,避免氣溶膠。
總而言之,核酸提取全過程需要注意的地方繁多,但我們只要做好三級防護,按操作規(guī)程正確操作,提高個人防護意識,實驗后的消毒清潔,既可確保個人人身安全。
[參考文獻]
1.《新型冠狀病毒感染的肺炎診療方案(試行第六版)》
2.《國家衛(wèi)生健康委辦公廳關于印發(fā)新型冠狀病毒感染的肺炎防控方案(第三版)》(國衛(wèi)辦疾控函[2020]80號)
3.《新型冠狀病毒實驗室生物安全指南(第二版)》(國衛(wèi)辦科教函[2020]70號)
4. 華中科技大學同濟醫(yī)學院附屬同濟醫(yī)院檢驗科新型冠狀病毒流行地區(qū)臨床實驗室常見問題解答(第一版)
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