CosMx™ SMI單細(xì)胞空間原位分子成像平臺(tái),結(jié)合了超高分辨率成像技術(shù)和多靶標(biāo)檢測(cè)能力,能夠在單細(xì)胞及亞細(xì)胞分辨率下對(duì)多達(dá)6000種RNA和64種經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的蛋白質(zhì)的空間原位信息進(jìn)行可視化和定量分析。
CosMx™ Human 6K Discovery Panel火熱預(yù)定中,歡迎咨詢!
近日,上海生物芯片公司利用CosMx™ SMI(1000 gene panel)對(duì)人扁桃體癌樣本進(jìn)行分析,目前已順利完成實(shí)驗(yàn)及下游生信分析,相關(guān)數(shù)據(jù)如下所示:
組織FOV圈選熒光圖
CosMx™ SMI數(shù)據(jù)展示
從測(cè)試數(shù)據(jù)來(lái)看,在樣本選取的40個(gè)FOV中,檢測(cè)到的細(xì)胞數(shù)達(dá)到17萬(wàn)多,檢測(cè)到的總轉(zhuǎn)錄本數(shù)超過(guò)35M,平均單個(gè)細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄本約210條,單個(gè)細(xì)胞最高基因檢出數(shù)為564,靈敏度高且特異性表現(xiàn)較好。
CosMx™ SMI通過(guò)基于抗體的組織標(biāo)記和AI的多模式細(xì)胞分割方法實(shí)現(xiàn)精確的細(xì)胞界定,在質(zhì)控后實(shí)現(xiàn)下游的數(shù)據(jù)分析和可視化。分析內(nèi)容包括空間背景下的細(xì)胞聚類分析、空間聚類分析、差異表達(dá)、空間鄰域分析及共表達(dá)分析等。
01 基礎(chǔ)分析——結(jié)果展示
通過(guò)選取感興趣區(qū)域進(jìn)行FOV圈選,獲得每個(gè)FOV中的轉(zhuǎn)錄本信息進(jìn)行分析。首先可以進(jìn)行細(xì)胞聚類并結(jié)合單細(xì)胞注釋marker確定不同細(xì)胞聚類所屬的細(xì)胞類型,然后通過(guò)空間聚類分析,確定細(xì)胞類型的空間分布以及每個(gè)FOV中各細(xì)胞類型的占比,并通過(guò)差異分析,比較組織不同空間區(qū)域的細(xì)胞類型及基因表達(dá)差異,從而確定關(guān)鍵細(xì)胞類型的空間分布及關(guān)鍵靶點(diǎn)。
細(xì)胞分割圖
細(xì)胞聚類分析
空間聚類分析
不同F(xiàn)OV中各細(xì)胞類型的占比
還可以進(jìn)行細(xì)胞共鄰域分析(CNA)分析,通過(guò)識(shí)別轉(zhuǎn)錄空間中的小區(qū)域組(被稱為鄰域)在不同樣本中的豐度共同變化,識(shí)別相關(guān)的細(xì)胞群,描述不同樣本的主導(dǎo)變化軸,從而更準(zhǔn)確地識(shí)別疾病相關(guān)的細(xì)胞狀態(tài)。
空間鄰域分析
02 其他分析——結(jié)果展示
此外,還可以根據(jù)老師的具體的需求,實(shí)現(xiàn)空間背景下細(xì)胞共定位、細(xì)胞通訊、信號(hào)通路、空間網(wǎng)絡(luò)及可視化等分析,更加深入探索組織背后的生物學(xué)信息。
基因共表達(dá)分析
細(xì)胞共表達(dá)分析
通路分析
CosMx SMI系統(tǒng)具有簡(jiǎn)單的樣本制備流程和穩(wěn)定的原位雜交化學(xué)原理,能夠兼容多種組織類型的檢測(cè),包括新鮮冷凍組織(FF)、福爾馬林固定石蠟包埋組織(FFPE)以及組織芯片(TMA)等。目前已有panel能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)1000種RNA和64種蛋白進(jìn)行檢測(cè),并且已推出提供6000種RNA檢測(cè)方案(已可進(jìn)行預(yù)訂采購(gòu)),在保留靶標(biāo)基因在組織原位空間信息的基礎(chǔ)上,實(shí)現(xiàn)更高的基因組覆蓋度,支持研究人員透徹解析組織和細(xì)胞異質(zhì)性,深入研究背后的生物學(xué)功能,發(fā)現(xiàn)重要的生物標(biāo)志物。