Fig1：玻連蛋白涂層提高iPS細(xì)胞衍生效率

研究小組最驚訝的是人類iPS細(xì)胞生長(zhǎng)不需要許多早期認(rèn)為必須的營養(yǎng)物質(zhì)，但是Vitronectin蛋白的添加卻是必須的。與傳統(tǒng)的培養(yǎng)基相比，加入Vitronectin蛋白可以顯著提高iPSC細(xì)胞的生長(zhǎng)速率和維持多能性的能力，這對(duì)于后續(xù)臨床上的操作利用具有重要意義。在此基礎(chǔ)上來自我國的科研小組在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)iPS細(xì)胞在涂有vitronectin蛋白的基質(zhì)上培養(yǎng)時(shí)，這些細(xì)胞更容易分化為血細(xì)胞。這引起了研究小組成員極大的研究興趣，希望從分子水平探究這背后的作用機(jī)制。在實(shí)驗(yàn)中，研究人員通過添加不同濃度的Vitronectin蛋白，觀察iPS細(xì)胞分化情況，并利用流式細(xì)胞術(shù)和免疫熒光染色等技術(shù)對(duì)分化細(xì)胞進(jìn)行鑒定。

Fig2：玻連蛋白促進(jìn)iPS細(xì)胞早期造血

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示添加vitronectin蛋白在第4天和第6天有效地促進(jìn)了內(nèi)皮樣細(xì)胞的分化和增殖，可以清楚地觀察到具有圓形形狀的造血樣細(xì)胞和經(jīng)歷 EHT 的內(nèi)皮樣細(xì)胞【2】�？茖W(xué)家想到αvβ3 和 αvβ5 可以整聯(lián)蛋白在血管生成中介導(dǎo)Vitronectin蛋白功能【3】。整合素是一種細(xì)胞表面受體，能夠?qū)⒓?xì)胞與其外界環(huán)境連接起來，并參與細(xì)胞的遷移、增殖、分化等過程。αvβ3和αvβ5整合素能夠與Vitronectin蛋白結(jié)合，并通過激活信號(hào)通路來促進(jìn)干細(xì)胞向造血細(xì)胞系分化。進(jìn)一步使用RNA干擾技術(shù)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，αvβ3和αvβ5整合素可能是通過激活Focal adhesion kinase (FAK)和Phosphatidylinositol-3-kinase (PI3K)信號(hào)通路來促進(jìn)造血系細(xì)胞的分化。除了在干細(xì)胞分化中的重要作用外，Vitronectin蛋白還可以影響干細(xì)胞的遷移和增殖。研究表明，Vitronectin蛋白可以促進(jìn)干細(xì)胞的遷移，并且這種效應(yīng)與αvβ3和αvβ5整合素的表達(dá)水平相關(guān)；另外，Vitronectin蛋白能夠促進(jìn)干細(xì)胞的增殖，這種效應(yīng)可能與Vitronectin蛋白與另一種整合素αvβ1的結(jié)合有關(guān)【4】。

Vitronectin蛋白在iPSC細(xì)胞的培養(yǎng)和應(yīng)用中具有重要意義。作為一種高效、可靠的細(xì)胞培養(yǎng)試劑，Vitronectin蛋白可以顯著提高iPS細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖速率，并促進(jìn)其向特定細(xì)胞系的分化，在最大程度上為iPS細(xì)胞研究和應(yīng)用開辟新的道路。Vitronectin蛋白和iPS細(xì)胞的組合在干細(xì)胞治療和再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域已經(jīng)嶄露頭角，這樣的黃金拍檔將在未來給我們帶來更多的驚喜和沖擊。

同立海源Vitronectin蛋白
目前市場(chǎng)上能夠提供Vitronectin蛋白的廠家還很少，提供定量標(biāo)準(zhǔn)的也只有進(jìn)口廠家，且定量方法并非基于iPSC，而Vitronectin與其他常用細(xì)胞因子不同，目前暫無國際標(biāo)準(zhǔn)品可作為定量標(biāo)準(zhǔn)，這對(duì)用戶來說需要花費(fèi)大量時(shí)間和經(jīng)濟(jì)成本進(jìn)行測(cè)試，確定實(shí)際用量濃度。同立海源可提供全長(zhǎng)序列的Vitronectin蛋白（貨號(hào)：GMP-TL651），并在iPSC應(yīng)用方面成功建立了定量測(cè)活方法，可提供每批次確定的ED50值，方便iPSC客戶的研究應(yīng)用。從數(shù)據(jù)結(jié)果來看，同立海源的Vitronectin蛋白可有效促進(jìn)iPSC的貼壁及擴(kuò)增，多批次產(chǎn)品間的ED50值穩(wěn)定，iPSC的貼壁效果（ED90更高）優(yōu)于競(jìng)品。

N0.1 活性測(cè)試 Activity testing

圖1：Vitronectin蛋白活性定量實(shí)驗(yàn)