尊敬的老師 ：

您好！

CRISPR的誕生，是繼RNA干擾技術(shù)、高通量測(cè)序技術(shù)等之后生物科學(xué)發(fā)展歷史上最具顛覆性技術(shù)之一，使用高效、迅速且簡(jiǎn)單，在生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域及臨床實(shí)踐中引起一場(chǎng)巨變。2012年，Jennifer Doudna和Emmanulle Charpentier在Science 雜志發(fā)文成功解析了CRISPR/Cas9基因編輯的工作原理，基于此論文，在過去的7年中CRISPR技術(shù)斬獲了各種重量級(jí)獎(jiǎng)項(xiàng)，包括生命科學(xué)突破獎(jiǎng)，蓋爾德納國(guó)際獎(jiǎng)，阿爾珀特獎(jiǎng)，沃爾夫獎(jiǎng)等，并最終成功獲得2020年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。

華人科學(xué)家張鋒在 Science 雜志發(fā)表論文，首次將CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)應(yīng)用于哺乳動(dòng)物和人類細(xì)胞。并且最近也贏得了真核細(xì)胞 CRISPR-Cas9基因編輯技術(shù)的專利權(quán)之爭(zhēng)。

至此，這把“基因剪刀”，讓科學(xué)家如虎添翼。

經(jīng)過近幾年的發(fā)展，CRISPR不僅成為了生物醫(yī)學(xué)研究實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)研究技術(shù)，也已經(jīng)成功用于臨床治療和診斷，例如近期發(fā)表的啟動(dòng)于2016年的全世界第一個(gè)CRISPR基因編輯T細(xì)胞治療腫瘤的臨床實(shí)驗(yàn)證明安全可靠；此外，基于CRISPR的快速診斷技術(shù)在最近暴發(fā)的冠狀病毒流感快速檢測(cè)中大放異彩。CRISPR技術(shù)正被越來越多的研究人員用來改造人類基因以消除疾病，創(chuàng)造生命力更加頑強(qiáng)的植物，消滅病原體等。

CRISPR技術(shù)不僅能夠在不同物種中對(duì)特定的基因進(jìn)行敲除，敲入等，經(jīng)過改造后還能在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控基因的表達(dá)或者沉默、對(duì)特定的基因進(jìn)行原位標(biāo)記、在細(xì)胞水平或體內(nèi)對(duì)單堿基進(jìn)行編輯（BE2，BE3，ABE等）、體外系統(tǒng)中用于病原微生物或者基因突變的檢測(cè)等（Sherlock、DETECTR）；此外，通過與慢病毒或AAV技術(shù)聯(lián)合可以輕松在全基因組水平進(jìn)行基因快速篩選，David Liu研究小組與2019年實(shí)現(xiàn)了無(wú)模板的基因敲入技術(shù)。

隨著研究的深入，CRISPR/Cas9系統(tǒng)的應(yīng)用更加便捷、高效，也更廣泛，目前該技術(shù)成功應(yīng)用于人類細(xì)胞、斑馬魚、小鼠以及細(xì)菌等基因組精確修飾，成為科研人員的強(qiáng)大工具，基于CRISPR臨床實(shí)驗(yàn)已經(jīng)取得初步成功。為了讓更多的科研人員及時(shí)全面的掌握CRISPR最新技術(shù)，獲得基因編輯質(zhì)粒系統(tǒng)。特于2021年8月4日至8月6日在北京微旋基因總部（西城區(qū)德外大街11號(hào)康華偉業(yè)A座）舉辦CRISPR/Cas9基因靶向修飾技術(shù)培訓(xùn)班。

課程福利
所有參加培訓(xùn)的老師均可獲得：
1. 贈(zèng)送無(wú)縫克隆試劑盒以及免費(fèi)基因編輯質(zhì)粒載體一份：可以用于哺乳動(dòng)物、植物、真菌、細(xì)菌、斑馬魚、線蟲等，共60余種）。
2. 免費(fèi)贈(zèng)送sgRNA離線設(shè)計(jì)軟件（有基因組DNA序列即可設(shè)計(jì)�。�。
3. 分子生物學(xué)免費(fèi)軟件安裝包一套（snapgene，premier6，Graphpad6.01，億圖圖示專家-技術(shù)路線圖繪制，Endnote，F(xiàn)lowjo等）。
4. 免費(fèi)獲得信號(hào)通路圖制作神器- Biomedical-PPT-Toolkit-Suite。

課程安排：
第一天理論講解：
一、基因編輯技術(shù)簡(jiǎn)介（三代基因編輯工具）
1. ZFN 2.TALEN 3.CRISPR
二、CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)原理
1. CRISPR/Cas9發(fā)現(xiàn)歷史
2. CRISPR/Cas9作用機(jī)制解析
3. CRISPR/Cas9系統(tǒng)改造策略
三、sgRNA在線設(shè)計(jì)構(gòu)建實(shí)戰(zhàn)演練(1.靶基因序列查找2.sgRNA在線設(shè)計(jì)合成) 
四、CRISPR/Cas9轉(zhuǎn)染策略:
1.生物轉(zhuǎn)染（慢病毒、腺相關(guān)病毒等）
2.物理轉(zhuǎn)染 （電轉(zhuǎn)核酸/RNP、顯微注射、基因槍）
3.化學(xué)轉(zhuǎn)染 （脂質(zhì)體、陽(yáng)離子聚合物）
五、CRISPR/Cas9 sgRNA效率檢測(cè)，脫靶檢測(cè)及解決策略
高保真Cas9（espCas9、Hifi-Cas9、Cluster1-Cas9）
第二天理論講解：
一、CRISPR技術(shù)應(yīng)用解析
1.基因敲除（單基因敲除、多基因敲除、大片段刪除、多靶點(diǎn)sgRNA載體構(gòu)建策略）
2.基因敲入實(shí)戰(zhàn)演練（gRNA選擇、同源臂設(shè)計(jì)、導(dǎo)入，長(zhǎng)片段導(dǎo)入策略/提高基因敲入效率策略，PITCh、HITI、CRISPR-轉(zhuǎn)座酶高效基因敲入系統(tǒng)）
3.CRISPR在轉(zhuǎn)錄調(diào)控中的應(yīng)用（轉(zhuǎn)錄激活、轉(zhuǎn)錄抑制系統(tǒng)）
4.CRISPR靶基因標(biāo)記定位
二、CRISPR案例解析
1.基因敲除在小鼠模型構(gòu)建、植物、細(xì)胞、細(xì)菌、真菌等中的應(yīng)用案例解析
2.基于CRISPR的全基因組基因敲除高通量篩選策略（文庫(kù)構(gòu)建，選擇，流程優(yōu)化等）
3.基于CRISPR的全基因組轉(zhuǎn)錄激活/抑制高通量篩選策略（文庫(kù)構(gòu)建，選擇，流程優(yōu)化等）
三、CRISPR/Cas9與基因沉默技術(shù)（siRNA、shRNA）系統(tǒng)比較。
四、單堿基基因編輯技術(shù)簡(jiǎn)介及在基因治療中的應(yīng)用
1.HF2-BE2 2.BE3系統(tǒng) 3.ABE系統(tǒng)4.單堿基基因編輯脫靶克服。
五、基因CRISPR的基因檢測(cè)系統(tǒng)
1、CRISPR-Cas12a系統(tǒng)介紹(DETECTR)
2、CRISPR-Cas13a系統(tǒng)介紹(SHERLOCK-多重病原菌檢測(cè))
六、CRISPR/Cas9系統(tǒng)在腫瘤和遺傳病治療中應(yīng)用解析
1、CRISPR結(jié)合免疫檢查點(diǎn)抑制劑治療腫瘤
2、單基因遺傳病治療（DMD、先天性黑朦、地中海貧血等）
3、CRISPR治療HIV-基因編輯嬰兒解析
4、CRISPR治療HIV炎性白血病病例解析
七、新一代無(wú)模板基因敲入系統(tǒng)解析
CRISPR Primer-editing 基因敲入原理及應(yīng)用
第三天實(shí)驗(yàn)操作：
一、CRISPR/Cas9敲除質(zhì)粒轉(zhuǎn)染靶細(xì)胞
二、CRISPR/Cas9基因表達(dá)載體克隆構(gòu)建
1.sgRNA設(shè)計(jì)合成
2.敲除載體選擇及線性化
3.sgRNA連接，轉(zhuǎn)化等
4.CRISPR/Cas9轉(zhuǎn)染后靶DNA檢測(cè)
5.靶基因修飾位點(diǎn)擴(kuò)增及鑒定
6.CRISPR基因敲除效果檢測(cè) 

授課教師
劉波博士    2008年博士畢業(yè)于中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院，從事腫瘤干細(xì)胞，細(xì)胞衰老，腫瘤轉(zhuǎn)移等細(xì)胞作用網(wǎng)絡(luò)和通路的研究，并作為骨干研究人員參加了973計(jì)劃項(xiàng)目、國(guó)家自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目、在香港中文大學(xué)做為作為Postdoc和Research fellow，從事研究工作。先后Nature Genetics，cell research、PLOS one等期刊發(fā)表論文十余篇。

舉辦地點(diǎn)
北京微旋基因總部（西城區(qū)德外大街11號(hào)A座）

舉辦時(shí)間
2021年8月4日至8月6日

參加對(duì)象
從事醫(yī)學(xué)、生命科學(xué)、農(nóng)學(xué)等領(lǐng)域科研工作者和高校教師及研究生。

授課方式
理論講授+實(shí)驗(yàn)操作。

收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)
注冊(cè)費(fèi)：理論授課 3500元/人（培訓(xùn)提供免費(fèi)午餐），2021年7月30號(hào)之前確認(rèn)報(bào)名成功可以優(yōu)惠至：3300元/人。實(shí)驗(yàn)操作課程需加800元/人，同一個(gè)單位三個(gè)人以上報(bào)名可以免費(fèi)構(gòu)建價(jià)值1500元的質(zhì)粒一個(gè)。

銀行匯款
北京微旋基因技術(shù)有限公司
開戶行：中國(guó)建設(shè)銀行北京宣武支行
賬  號(hào)：11001019500053058529
備  注：銀行轉(zhuǎn)賬的學(xué)員，請(qǐng)于匯款單備注欄內(nèi)注明參會(huì)人姓名

聯(lián)系人
陳老師   18500298321（微信同號(hào)）   010-53516075       sales@micro-helix.com

承辦單位：                                
北京微旋基因技術(shù)有限公司