Porvair發(fā)布高效協(xié)議適用原生染色質(zhì)免疫沉淀N-ChIP
瀏覽次數(shù):4033 發(fā)布日期:2016-11-10
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Porvair Sciences公司Chromatrap®產(chǎn)品事業(yè)部發(fā)布了一項(xiàng)新的專(zhuān)利協(xié)議,可簡(jiǎn)便、迅速、有效地從原生染色質(zhì)中富集轉(zhuǎn)錄因子。
原生染色質(zhì)免疫沉淀(N-ChIP)是一種替代傳統(tǒng)交聯(lián)(X-ChIP)的方法,可在提取前消除細(xì)胞與甲醛固定的需要。細(xì)胞因此可保持在更自然的“天然狀態(tài)”。運(yùn)用抗體直接針對(duì)目標(biāo)蛋白和已處理的結(jié)果片段,DNA/蛋白片段被選擇性免疫沉淀,以便分離出DNA和蛋白化合物。原生ChIP(Native ChIP)可用于組蛋白修飾和一些可能被綁定到DNA的豐富轉(zhuǎn)錄因子研究。
傳統(tǒng)原生ChIP實(shí)驗(yàn)包含五個(gè)關(guān)鍵耗時(shí)的步驟:從細(xì)胞中制備分析的染色質(zhì);使用高品質(zhì)的ChIP驗(yàn)證抗體特定于靶蛋白的染色質(zhì)免疫沉淀;隔離沉淀的染色質(zhì)片段;從沉淀產(chǎn)物中回收DNA并最終進(jìn)行DNA分析。
Chromatrap® N-ChIP試劑套件可使原生染色質(zhì)的ChIP實(shí)驗(yàn)執(zhí)行過(guò)程更快、更容易、更有效,并具有獨(dú)特專(zhuān)利技術(shù)(專(zhuān)利號(hào) GB2482209)。它采用一種蛋白質(zhì) A 或蛋白質(zhì) G 共價(jià)連接的惰性、多孔的聚合物盤(pán)(disc)捕獲目標(biāo)染色質(zhì)/抗體復(fù)合物,并最大化捕獲效率。
不同于其他方法,Chromatrap® N-ChIP 試劑套件避免使用磁珠或瓊脂糖珠,使得提取過(guò)程中更多的樣品被保留下來(lái)。此外, Chromatrap® N-ChIP技術(shù)因?yàn)楦菀撰@得肽而增加了抗體結(jié)合原生染色質(zhì)上抗原的親和力。因此,Chromatrap® N-ChIP 試劑盒開(kāi)創(chuàng)了從原生染色質(zhì)上豐富轉(zhuǎn)錄因子的新標(biāo)準(zhǔn)。