賽默飛世爾公司產(chǎn)品KingFisher系列自動化磁珠提取純化儀器，聯(lián)合Invitrogen公司Ambion病毒RNA提取試劑盒，將傳統(tǒng)方法的禽流感檢測由21天縮短至4小時左右。此技術(shù)經(jīng)過美國國家獸醫(yī)服務(wù)實驗室(NVSL)驗證，是美國農(nóng)業(yè)部認可的禽流感檢測的分子生物學方法。該技術(shù)已由賽默飛世爾公司引進中國，將對促進我國禽產(chǎn)品的出口創(chuàng)匯、降低成本和疫情早期診斷具有重大意義。

禽流感快速高通量檢測新技術(shù)是基于分子生物學的方法，在病毒感染的初期即可快速確診病毒的存在。該方法包括兩大主要步驟。第一步，聯(lián)合使用賽默飛世爾公司的KingFisher自動化磁珠提取純化儀器，及Invitrogen公司的Ambion病毒RNA提取試劑盒，進行自動化的病毒RNA提取。該步驟需要約30分鐘。第二步，實時定量RT-PCR檢測病毒RNA。該步驟需要約3小時。整體方法經(jīng)過優(yōu)化，并經(jīng)過超過200,000禽類咽喉拭子樣品的檢測驗證。

這項技術(shù)可以用于從生物體液和無細胞樣品中，如血清、血漿、口腔拭子和細胞培養(yǎng)液中，提取病毒RNA。從無細胞樣品中分離純化RNA比從組織和培養(yǎng)細胞中分離純化RNA更具挑戰(zhàn)性。這是因為低的病毒滴度、大的操作體積和樣品的復(fù)雜性，且操作步驟必須適合實時定量RT-PCR。使用自動化磁珠提取方法可滿足上述各項要求，賽默飛世爾公司的KingFisher專利磁珠提取技術(shù)，不需有機溶劑或RNA沉淀步驟，消除了基于濾膜的方法經(jīng)常碰到的問題，如濾膜堵塞、大的洗脫體積和不穩(wěn)定的產(chǎn)率。而結(jié)合后續(xù)的實時定量RT-PCR，可儀檢測到低至10拷貝的病毒RNA，極大提高了禽流感病毒檢測的靈敏度。

禽流感快速高通量檢測新技術(shù)比較傳統(tǒng)方法的優(yōu)勢

• 靈敏度極高，可從100-400ul樣品中分離到少至10拷貝的病毒RNA
• 對于96個樣品，整個磁珠提取純化過程不超過30分鐘，整個禽流感檢測過程不超過4個小時
• 用于低病毒濃度時尤其理想
• 線性純化效率低至50轉(zhuǎn)錄子
• 經(jīng)美國國家獸醫(yī)服務(wù)實驗室(NVSL)認證可用于AI/ND病毒

線性純化效率可低至10拷貝的轉(zhuǎn)錄子

用MagMAX病毒RNA提取試劑盒，可以從血漿和血清中定量純化病毒RNA，線性范圍大于約5個數(shù)量級。這可由血漿、血清和水樣品的試驗體系中，以系列稀釋的RNA作對照。

圖一 病毒RNA提取效率

圖一的定量RT-PCR結(jié)果說明RNA的純化率在很大的病毒濃度的范圍內(nèi)均為線性，含少至10個拷貝的轉(zhuǎn)錄子的樣品也可被純化。

基于磁珠的純化技術(shù)的好處

磁珠用于從細胞中純化RNA和從無細胞樣品中純化病毒RNA有許多好處。RNA產(chǎn)率更穩(wěn)定，不僅是實驗到實驗間的差異極小，而且是大范圍的樣品尺寸所得到的RNA產(chǎn)率也很穩(wěn)定。磁珠技術(shù)消除了因細胞聚集而產(chǎn)生濾膜堵塞的情況，因為高效的磁珠結(jié)合僅需很小體積的磁珠，所以結(jié)合的RNA用20-50ul的不含核酸酶的水就可以洗脫。這使得磁珠純化技術(shù)對于從大體積、稀釋樣品中濃縮RNA極其有用。

圖二 賽默飛世爾公司KingFisher Flex自動化磁珠提取純化儀

KingFisher(圖二)專利的磁珠提取純化技術(shù)，用轉(zhuǎn)移磁珠代替了轉(zhuǎn)移溶液，因此具有更高的提取純化效率和產(chǎn)率。

關(guān)于賽默飛世爾科技(Thermo Fisher Scientific)

賽默飛世爾科技 (Thermo Fisher Scientific)(紐約證交所代碼：TMO)是全球科學服務(wù)領(lǐng)域的領(lǐng)導者，致力于幫助客戶使世界更健康、更清潔、更安全。公司年銷售額超過100億美元，擁有員工約33,000人，在全球范圍內(nèi)服務(wù)超過350,000家客戶。主要客戶類型包括：醫(yī)藥和生物公司，醫(yī)院和臨床診斷實驗室，大學、科研院所和政府機構(gòu)，以及環(huán)境與工業(yè)過程控制裝備制造商等。公司借助于Thermo Scientific和Fisher Scientific這兩個主要的品牌，幫助客戶解決在分析化學領(lǐng)域從常規(guī)的測試到復(fù)雜的研發(fā)項目中所遇到的各種挑戰(zhàn)。Thermo Scientific能夠為客戶提供一整套包括高端分析儀器、實驗室裝備、軟件、服務(wù)、耗材和試劑在內(nèi)的實驗室綜合解決方案。Fisher Scientific為衛(wèi)生保健，科學研究，以及安全和教育領(lǐng)域的客戶提供一系列的實驗室裝備、化學藥品以及其他用品和服務(wù)。賽默飛世爾科技將努力為客戶提供最為便捷的采購方案，為科研的飛速發(fā)展不斷地改進工藝技術(shù)，提升客戶價值，幫助股東提高收益，為員工創(chuàng)造良好的發(fā)展空間。欲獲取更多信息，請瀏覽公司的網(wǎng)站：