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知識分享:WesternBlot實驗方法及注意事項
2018-6-28
實驗原理:WesternBlot印跡方法,又稱為免疫印記,是將獲得的蛋白質(zhì)樣品通過SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳,對不同分子量的蛋白質(zhì)進行分離,并通過轉(zhuǎn)移電泳將凝膠上分離到的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)印至固相支持物(N
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為什么要使用多重熒光方法進行western blot的檢測?
2018-5-7
最近關于western blot數(shù)據(jù)造假的學術新聞成了科研的熱搜詞條,其數(shù)據(jù)造假包括,均存在一圖多用,用了剪切,拼接,翻轉(zhuǎn),旋轉(zhuǎn),調(diào)整大小,故意抹平背景等P圖手法,那我們來看看這些造假的數(shù)據(jù)。一
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Nature Genetics:連接非編碼突變和腫瘤基因表達的轉(zhuǎn)錄組全網(wǎng)絡
2018-4-16
腫瘤基因組中充滿了非編碼突變,這些突變對腫瘤的影響研究還不是很清晰。加州大學圣地亞戈分校的科學家Wei Zhang and Ana Bojorquez-Gomez,Trey Ideker,在最近國際頂級期刊Nature Genetics發(fā)表
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上樣質(zhì)控和抗體驗證用于Western blot定量
2018-1-2
今天的帖子的靈感來自于我和同事在教他們SDS-PAGE和western blot的實驗交談中。 他們對于qRT-PCR(R)和流式細胞術(R)精通,特別關心如何以及為什么使用某些上樣質(zhì)控,還有其它的技術被使用驗
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線性范圍對western blot定量有什么影響
2017-11-20
當western blot進行定量時,許多人認為只需將感興趣的蛋白質(zhì)成像,剝離,重孵育內(nèi)參蛋白,然后將其用于歸一化,而不考慮線性范圍的檢測。 然而,與此有關的幾個誤區(qū),越來越多的期刊現(xiàn)在要求一個
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多重熒光western blot--注意事項
2017-11-6
Azure Biosystems公司,我們非常相信熒光多重在Western印跡中的強大功能,這促使了我們的Azure C系列成像儀快速發(fā)展。 但是我們認識到,從標準的HRP /化學發(fā)光方法邁出來是有些艱巨的,所以我們
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彎曲條帶以及我們該如何進行處理?
2017-10-30
如果你曾經(jīng)做過SDS-PAGE和Western blotting實驗,你肯定會看到彎曲的或模糊的條帶,不同于你的抗體數(shù)據(jù)表上顯示的那些完美的條帶形狀。雖然這些彎曲的條帶本身并不吸引人,但它們會影響到分子量
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Azure Biosystems Western blotting之實驗秘籍
2017-10-16
蛋白分離、雜交、檢測、分析前瞻回顧鑒于小編在《Azure Biosystems Western Blotting工作流程之實驗方法的選擇》中和大家聊了Western blot的實驗方法選擇,相信大家已經(jīng)將您的western blot 實驗
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濕轉(zhuǎn)和干轉(zhuǎn),哪個方法更好
2017-10-16
對于一個完美的westernblot實驗,蛋白在聚丙烯凝膠中根據(jù)天然分子量進行分離,蛋白被很好的從凝膠上轉(zhuǎn)移到固相支持物上,然后通過特異性的抗體進行免疫檢測。對于轉(zhuǎn)印來說,使用濕轉(zhuǎn)的方法是比較
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western-blot實驗過程
2017-10-9
Western,也稱Western blot、Western blotting、Western印跡,是用抗體檢測蛋白的重要方法之一?砂凑找韵虏襟E操作。1.收集蛋白樣品(Protein sample preparation)使用細胞裂解液,對貼壁細胞、
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western-blot操作注意事項
2017-9-22
一.配膠1. 注意一定要將玻璃板洗凈,最后用ddH2O沖洗,將與膠接觸的一面向下傾斜置于干凈的紙巾晾干。2. 分離膠及濃縮膠均可事先配好(除AP及TEMED外),過濾后作為儲存液避光存放于4℃,可至
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Western Blot常見問題總結
2017-3-15
Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,經(jīng)過PAGE分離的蛋白質(zhì)樣品,轉(zhuǎn)移到固相載體上,固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質(zhì),且能保持電泳分離的類型及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質(zhì)
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舊時回憶:western的暗室曝光--膠片顯影技術
2016-9-7
本篇文章由專業(yè)生化試劑供應商索萊寶為您提供。自有照相機以來,膠片的使用曾經(jīng)是多么的輝煌燦爛?逻_傻瓜照相機更是人們手上的寵兒。那時所用的膠卷更我們今天要講的膠片其實是一個家族的不同
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Western實驗中內(nèi)參基因的選擇及使用方法
2016-6-17
Western Blot實驗常用于檢測蛋白表達量、蛋白表達產(chǎn)物的正確性等。相對于其他檢測蛋白的方法而言Western Blot實驗在蛋白的定性定量分析、與目的蛋白量的比較方面更簡單一些。雖然,順利的時候We
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Western Blot實驗相關試劑的配制
2016-5-30
30%(w/v)丙烯酰胺溶液丙烯酰胺 29g甲叉雙丙烯酰胺 1g加去離子水,定容至 100ml 調(diào)整溶液 pH 值不超過 7.0,置棕色瓶中貯存于室溫或4℃。10%SDSSDS 10g蒸餾水至 100ml50
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Western Blot技術實驗流程
2016-5-26
Western Blot又稱為蛋白質(zhì)印跡,是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的基于抗體抗原之間特異免疫反應的一種定量或定性檢測蛋白的實驗方法。基本原理:聚丙烯酰胺凝膠電泳將不同分子量的蛋
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Western Blot中蛋白樣品的制備與試劑選擇
2016-5-23
"良好的開始是成功的一半",尤其對于生物學實驗,如果沒有高質(zhì)量的實驗樣本,等待我們的很可能是失敗的實驗結果。優(yōu)質(zhì)特異的蛋白樣品對Western Blot實驗至關重要。下面將從蛋白樣品制備的方法
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Western Blot中抗體的選擇
2016-5-19
Western Blot又稱為蛋白質(zhì)印跡,是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的基于抗體抗原之間特異免疫反應的一種定量或定性檢測蛋白的實驗方法;驹恚壕郾0纺z電泳將不同分子量的蛋
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Western blot中蛋白表達差異量檢測,哪種效果好?數(shù)字成像VS X光膠片
2015-10-30
在檢測Western blot中蛋白表達差異量時,數(shù)字成像和X光膠片哪種效果好?哪種方法得出的圖像才是我們想要的?針對此問題,武漢大學生命科學院舒紅兵院士實驗室特意用“化學發(fā)光成像儀&rdquo
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Western Blot操作步驟
2015-10-21
背景: 蛋白質(zhì)印跡的發(fā)明者是斯坦福大學George Stark。Neal Burnette于1981年所著的AnalyticalBiochemistry中首次被稱為Western Blot。最開始做印跡的是一個叫Southern的科學家,但印跡的對象
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