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western blot實驗中印跡膜和凝膠出現的問題及解決方案
2019-4-8
據說看了這篇western blot解決方案,實驗都挺好Western blot是生物化學和免疫遺傳學中常用的一種蛋白分析方法,其技術環(huán)節(jié)多,操作時間長,哪一步出現問題,都會影響最后的結果,今天小編總結了
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大分子量蛋白轉印的5個技巧
2019-3-4
做western blot印跡膜時,較大的蛋白質眾所周知是難以處理的。 特別是,您可能很難實現良好的轉印效率。 在某些方面,蛋白質難以朝著你想要的方向前進。我們將給5點建議,幫助膠上大分子量蛋白的
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從樣本制備和轉印過程提高western blot的準確性
2018-12-11
適當的樣本準備樣品準備不當,會讓你頭疼不已,當準備裂解液時: 快速工作 保持低溫環(huán)境 增加蛋白酶 進行分裝,避免反復凍融如果要分裝樣品,請確保等量分裝,以便檢查是否在此過程中丟失了目標
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如何減少western blot非特異性條帶的產生
2018-12-3
非特異性條帶?沒有什么比以多個條帶結束你的western blot實驗更令人沮喪。 這是我的樣品嗎? 封閉液的問題? 抗體的問題? 如果您正在使用新的樣本或抗體,答案可能是,也不確定。 通過一次更改
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Nature Medicine黑色素瘤PD-L1免疫療法的新途徑
2018-11-12
免疫檢查點及抗體藥物阻斷程序性死亡配體-1(PD-L1)與程序性死亡-1(PD-1)受體的相互作用等抑制性檢查點,可有效地抑制腫瘤細胞的免疫逃逸。在轉移性黑色素瘤患者中首次發(fā)現了免疫檢查點抗CTLA 4抗
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遠離噪音點:western blot封閉那些事
2018-11-6
Western blot封閉步驟為什么重要?樣品從凝膠轉印到膜上后,在抗體孵育之前都要進行封閉的步驟。 了解封閉的工作原理可提高western blot的質量,提高數據的特異性,靈敏度和信噪比。蛋白封閉液是
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總蛋白染色劑替代麗春紅S用于熒光Western Blots的優(yōu)勢
2018-10-22
麗春紅S是一種快速,可逆的蛋白質染色劑,通常用于確認蛋白樣品是否成功地從凝膠轉移到膜上,然后研究人員進行免疫印跡過程。 轉印后對膜進行染色可以在用抗體孵育印跡之前快速且容易地識別一些
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為什么要使用多重熒光方法進行western blot的檢測?
2018-5-7
最近關于western blot數據造假的學術新聞成了科研的熱搜詞條,其數據造假包括,均存在一圖多用,用了剪切,拼接,翻轉,旋轉,調整大小,故意抹平背景等P圖手法,那我們來看看這些造假的數據。一
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線性范圍對western blot定量有什么影響
2017-11-20
當western blot進行定量時,許多人認為只需將感興趣的蛋白質成像,剝離,重孵育內參蛋白,然后將其用于歸一化,而不考慮線性范圍的檢測。 然而,與此有關的幾個誤區(qū),越來越多的期刊現在要求一個
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多重熒光western blot--注意事項
2017-11-6
Azure Biosystems公司,我們非常相信熒光多重在Western印跡中的強大功能,這促使了我們的Azure C系列成像儀快速發(fā)展。 但是我們認識到,從標準的HRP /化學發(fā)光方法邁出來是有些艱巨的,所以我們
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彎曲條帶以及我們該如何進行處理?
2017-10-30
如果你曾經做過SDS-PAGE和Western blotting實驗,你肯定會看到彎曲的或模糊的條帶,不同于你的抗體數據表上顯示的那些完美的條帶形狀。雖然這些彎曲的條帶本身并不吸引人,但它們會影響到分子量
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Azure Biosystems Western blotting之實驗秘籍
2017-10-16
蛋白分離、雜交、檢測、分析前瞻回顧鑒于小編在《Azure Biosystems Western Blotting工作流程之實驗方法的選擇》中和大家聊了Western blot的實驗方法選擇,相信大家已經將您的western blot 實驗
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濕轉和干轉,哪個方法更好
2017-10-16
對于一個完美的westernblot實驗,蛋白在聚丙烯凝膠中根據天然分子量進行分離,蛋白被很好的從凝膠上轉移到固相支持物上,然后通過特異性的抗體進行免疫檢測。對于轉印來說,使用濕轉的方法是比較
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Western Blot常見問題總結
2017-3-15
Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,經過PAGE分離的蛋白質樣品,轉移到固相載體上,固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質,且能保持電泳分離的類型及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質
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舊時回憶:western的暗室曝光--膠片顯影技術
2016-9-7
本篇文章由專業(yè)生化試劑供應商索萊寶為您提供。自有照相機以來,膠片的使用曾經是多么的輝煌燦爛?逻_傻瓜照相機更是人們手上的寵兒。那時所用的膠卷更我們今天要講的膠片其實是一個家族的不同
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Western實驗中內參基因的選擇及使用方法
2016-6-17
Western Blot實驗常用于檢測蛋白表達量、蛋白表達產物的正確性等。相對于其他檢測蛋白的方法而言Western Blot實驗在蛋白的定性定量分析、與目的蛋白量的比較方面更簡單一些。雖然,順利的時候We
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Western Blot實驗相關試劑的配制
2016-5-30
30%(w/v)丙烯酰胺溶液丙烯酰胺 29g甲叉雙丙烯酰胺 1g加去離子水,定容至 100ml 調整溶液 pH 值不超過 7.0,置棕色瓶中貯存于室溫或4℃。10%SDSSDS 10g蒸餾水至 100ml50
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Western Blot技術實驗流程
2016-5-26
Western Blot又稱為蛋白質印跡,是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的基于抗體抗原之間特異免疫反應的一種定量或定性檢測蛋白的實驗方法;驹恚壕郾0纺z電泳將不同分子量的蛋
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Western Blot中蛋白樣品的制備與試劑選擇
2016-5-23
"良好的開始是成功的一半",尤其對于生物學實驗,如果沒有高質量的實驗樣本,等待我們的很可能是失敗的實驗結果。優(yōu)質特異的蛋白樣品對Western Blot實驗至關重要。下面將從蛋白樣品制備的方法
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Western Blot中抗體的選擇
2016-5-19
Western Blot又稱為蛋白質印跡,是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的基于抗體抗原之間特異免疫反應的一種定量或定性檢測蛋白的實驗方法;驹恚壕郾0纺z電泳將不同分子量的蛋
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