大鼠肺泡巨噬細(xì)胞(NR8383)培養(yǎng)要點
NR8383 (正常大鼠，1983年)來源于肺灌洗時的正常大鼠肺泡巨噬細(xì)胞。細(xì)胞在gerbil肺細(xì)胞連續(xù)培養(yǎng)液存在下培養(yǎng)了大約8-9個月。隨后，不再需要外源生長因子。通過有限稀釋法從單個細(xì)胞克隆并亞克隆NR8383細(xì)胞，并三次用軟瓊脂亞克隆。細(xì)胞表現(xiàn)出巨噬細(xì)胞的特性，吞噬酵母多糖和銅綠，非特異性脂酶活性，F(xiàn)c受體，氧化降解；分泌IL-1, TGF-β和IL-6，可重復(fù)地響應(yīng)外源生長因子。NR8383細(xì)胞響應(yīng)博萊霉素，分泌TGF-β前體。在博萊霉素刺激下，TGF –β mRNA表達(dá)也上升。細(xì)胞對內(nèi)毒素敏感。1-10 鈉克/毫升的LPS水平抑制增生達(dá)50%。即使達(dá)到0.001毫克/毫升的水平，LPS抑制還是無毒且在后續(xù)過程中可逆的。NR8383細(xì)胞株提供了高響應(yīng)的肺泡巨噬細(xì)胞的均一來源，可以用于體外研究巨響細(xì)胞相關(guān)活性。
細(xì)胞名稱：大鼠肺泡巨噬細(xì)胞
細(xì)胞別名：NR-8383; NR 8383; NR8383.1; AgC11x3A; Normal Rat, August 3, 1983
產(chǎn)品貨號：TCR-C611
種屬來源：大鼠
組織來源：肺
細(xì)胞形態(tài)：巨噬細(xì)胞樣
生長特性：半貼半懸
培養(yǎng)體系：F12K+15%FBS+1%Glutamax+1%P/S
配套培養(yǎng)基貨號：TCR-G611
傳代比例：1:2-1:4，每2-3天換液一次
傳代周期：96-120 h
培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%CO2，溫度：37℃
凍存條件：60%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+30%FBS+10%DMSO，液氮儲存
質(zhì)量檢測：細(xì)菌、真菌、支原體檢測均為陰性
細(xì)胞名稱：大鼠肺泡巨噬細(xì)胞
細(xì)胞別名：NR-8383; NR 8383; NR8383.1; AgC11x3A; Normal Rat, August 3, 1983
產(chǎn)品貨號：TCR-C611
種屬來源：大鼠
組織來源：肺
細(xì)胞形態(tài)：巨噬細(xì)胞樣
生長特性：半貼半懸
培養(yǎng)體系：F12K+15%FBS+1%Glutamax+1%P/S
配套培養(yǎng)基貨號：TCR-G611
傳代比例：1:2-1:4，每2-3天換液一次
傳代周期：96-120 h
培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%CO2，溫度：37℃
凍存條件：60%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+30%FBS+10%DMSO，液氮儲存
質(zhì)量檢測：細(xì)菌、真菌、支原體檢測均為陰性
NR8383細(xì)胞特性
① 大鼠肺泡巨噬細(xì)胞（NR8383）為半貼半懸細(xì)胞，細(xì)胞在低密度時有少量細(xì)胞團(tuán)粘附瓶底，細(xì)胞高密度時為全懸浮狀態(tài)。
② NR8383傳代周期較長，在標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)體系F12K+20%FBS中，倍增時間范圍在48-72h，細(xì)胞傳代比例1:2，傳代周期4-5天，中途每2~3天需要進(jìn)行補液或者換液，維持細(xì)胞所需營養(yǎng)。NR8383細(xì)胞培養(yǎng)注意事項
① 細(xì)胞復(fù)蘇后增殖慢需要7天左右，3天后換液一次。細(xì)胞應(yīng)提高密度凍存，建議2-3×10⁶cells/mL。
② NR8383細(xì)胞對內(nèi)毒素敏感。1-10 ng/mL的LPS水平抑制增殖達(dá)50%。在細(xì)胞培養(yǎng)過程中建議使用內(nèi)毒素低的試劑及一次性細(xì)胞培養(yǎng)耗材。
③ 血清質(zhì)量差異可能引起倍增時間波動，建議選用高質(zhì)量的胎牛血清。
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