重組賴氨酰內切酶(Lys-C)來源于無色桿菌,采用大腸桿菌重組表達.重組賴氨酰內切酶(Recombinant Lysyl Endopeptidase)是一種絲氨酸蛋白酶,可高度特異性的水解賴氨酸羧基側的酰胺、酯和肽鍵,最適的反應pH為9.0-9.5,最適反應溫度為30-37℃,在4M尿素或者0.1% SDS存在的情況下仍可保持較高的酶活性.這種酶在生物技術和制藥工業(yè)中有廣泛的應用，尤其是在蛋白質的結構分析和藥物研發(fā)中。

賴氨酰內切酶是一種金屬蛋白酶，通常含有鋅離子作為其活性中心的一部分。它的主要功能是識別并切割蛋白質或多肽鏈中賴氨酸（Lys）殘基的C端肽鍵。這種特異性使得它在蛋白質的序列分析、蛋白質工程和蛋白質組學研究中非常有用。

重組賴氨酰內切酶的生產通常涉及以下步驟：

1. 基因克隆：從天然來源（如細菌、真菌或植物）中克隆編碼賴氨酰內切酶的基因。

2. 表達載體構建：將克隆的基因插入到表達載體中，通常是質粒，以便在宿主細胞中高效表達。

3. 宿主細胞選擇：選擇合適的宿主細胞（如大腸桿菌、酵母或哺乳動物細胞）進行基因表達。

4. 發(fā)酵與表達：在適當的培養(yǎng)條件下，使宿主細胞大量表達賴氨酰內切酶。

5. 純化：通過一系列的純化步驟（如親和層析、離子交換層析等）從宿主細胞中分離和純化重組酶。

1. 蛋白質測序：賴氨酰內切酶可以用于蛋白質的N端測序，通過特異性切割賴氨酸殘基，生成一系列的肽段，便于后續(xù)的質譜分析。

2. 蛋白質工程：在蛋白質工程中，賴氨酰內切酶可以用于修飾蛋白質的結構，例如去除特定的賴氨酸殘基，以改變蛋白質的功能或穩(wěn)定性。

3. 藥物研發(fā)：在藥物研發(fā)過程中，賴氨酰內切酶可以用于分析和修飾藥物靶點蛋白，幫助理解藥物的作用機制。

- 酶的穩(wěn)定性：重組賴氨酰內切酶的穩(wěn)定性可能受多種因素影響，如pH值、溫度和金屬離子濃度。在使用過程中需要優(yōu)化這些條件以保持酶的活性。

- 特異性：雖然賴氨酰內切酶對賴氨酸殘基有特異性，但在復雜的蛋白質混合物中，可能需要結合其他分離技術（如色譜）以提高分析的準確性。

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