細胞因子在健康和疾病中的復雜生物學,從病毒和細菌感染到對抗癌細胞的免疫系統(tǒng),使它們成為研究和診斷分析的主要焦點。然而,檢測細胞因子帶來了各種挑戰(zhàn)。它們的影響和功能與它們的細胞外表達水平直接相關(guān),而細胞外表達水平通常隨空間位置而急劇變化。此外,它們的基線水平通常非常低,在皮摩爾范圍內(nèi)。最后,細胞因子溶解在細胞外液中,這極大地限制了適用的檢測方法。
1、酶聯(lián)免疫法檢測
由于液體生物樣品所需的靈敏度、范圍和適用性,酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)通常是檢測和定量細胞因子的首選方法。通過ELISA對分析物進行定量依賴于免疫篩選,即抗體特異性結(jié)合特定分子靶標的能力。ELISA特別適合分析液體生物樣品,包括血清和血漿、淋巴液,以及更多組織特異性液體,如滑液或腦脊液,以及細胞培養(yǎng)上清液、細胞和組織裂解物。此外,可以輕松獲得低皮摩爾范圍內(nèi)的靈敏度。由于細胞因子是小蛋白靶標,因此選擇的方法通常是雙抗夾心法。雙抗夾心法檢測是由兩種靶標特異性抗體的獨立識別靶標,因此所得測定結(jié)果通常具有高靈敏度和特異性。然而,ELISA檢測需要相對大量的珍貴樣品,此外下一代方法通常提供更高的檢測通量。
2、Luminex液相細胞因子芯片技術(shù)
Luminex技術(shù)(Luminex液相細胞因子芯片)同樣也是雙抗夾心法原理,它基于特殊的磁珠,磁珠通過熒光染料染色獲得熒光編碼,每個熒光編碼的磁珠組都涂有對應(yīng)的特定的捕獲抗體,生物素標記的檢測抗體與磁珠組上的特異性細胞因子捕獲抗體復合物結(jié)合,偶聯(lián)了鏈霉親和素的熒光,因生物素與鏈霉親和素的結(jié)合而得以結(jié)合在檢測抗體上。因此,可以使用Luminex檢測儀器,通過檢測磁珠組的熒光編碼差異以及熒光信號值強弱來識別和測量樣本中的多種細胞因子。與傳統(tǒng)ELISA相比,Luminex技術(shù)具有多重優(yōu)點,包括:(a)高通量多重分析;(b)所需的樣品量更少;(c)時間和成本方面的效率;(d)在多個其他炎癥分子的背景下評估一種給定炎癥分子的水平的能力;(e)在相同的實驗測定條件下對相同參與者的相同細胞因子組合進行重復測量的能力;(f)能夠在廣泛的濃度動態(tài)范圍內(nèi)可靠地檢測不同的蛋白質(zhì)。
3、華盈生物的解決方案
華盈生物為各種研究領(lǐng)域提供穩(wěn)定可靠的細胞因子檢測技術(shù)服務(wù),在業(yè)界我們的技術(shù)服務(wù)享有很高的口碑。華盈生物在細胞因子檢測分析方面擁有數(shù)十年的經(jīng)驗,可滿足我們科學界不斷變化的需求。Luminex細胞因子檢測技術(shù)用于各種研究領(lǐng)域,包括炎癥和癌癥研究。有關(guān) Luminex的更多信息,請聯(lián)系我們的銷售團隊或技術(shù)支持團隊以獲得進一步的支持和幫助。