聽說很多實(shí)驗(yàn)人員在進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)的時(shí)候都會(huì)遇到各種各樣的問題，今天Bee仔就挑幾個(gè)經(jīng)常遇到問題來跟大家分享一點(diǎn)小經(jīng)驗(yàn)~都是重點(diǎn)，要做筆記的哦~

PCR管底座適配性影響

問題現(xiàn)象

在進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)之前，由于需要確保PCR八聯(lián)管或單管的管蓋蓋合緊密，部分實(shí)驗(yàn)員可能會(huì)使勁按壓管蓋，此時(shí)，如果PCR底座的尺寸與PCR管不太適配，就會(huì)出現(xiàn)PCR管難以從底座取出的情況。

這個(gè)時(shí)候如果取出不當(dāng)，就很容易會(huì)造成管蓋松動(dòng)，后續(xù)造成樣品被污染或者實(shí)驗(yàn)室被污染的情況。

 

解決方法

遇到上述情況，只要選擇合適的PCR底座就可以解決啦！Beebio PCR管專用底座適配市面通用的PCR管，不松不緊剛剛好，使勁按壓后也能輕松取出。

   
問題現(xiàn)象

在做PCR實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，部分實(shí)驗(yàn)員可能會(huì)遇到：加熱時(shí)管蓋被頂開造成樣品蒸發(fā)、PCR管變形、實(shí)驗(yàn)后取出PCR管時(shí)由于內(nèi)外壓力差被頂開管蓋等現(xiàn)象。

 

解決方法

①在使用熱蓋可調(diào)的PCR儀的時(shí)候，如果出現(xiàn)管蓋被頂開的情況，則需要在實(shí)驗(yàn)前調(diào)整好熱蓋的高度，以剛好可以壓緊PCR管為宜，如果高度太高，就有可能會(huì)出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)過程中管蓋被管內(nèi)氣流頂出，進(jìn)而造成管內(nèi)液體蒸發(fā)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。如果高度太低把PCR管壓太緊，就有可能導(dǎo)致PCR管在壓力和高溫下變形。至于具體多少是合適的高度，建議找PCR儀技術(shù)人員進(jìn)行確認(rèn)哦。

②在做少量PCR管反應(yīng)的時(shí)如出現(xiàn)PCR管變形的情況，在有樣品管支撐架的情況下，在加熱模塊上放上樣品管支撐架（如下圖）就可以避免熱蓋壓力太大把管子壓變形。
 

圖2.樣品管支撐架

如果沒有樣品支撐架，則可以在加熱模塊的4個(gè)角落分別放上1個(gè)PCR管（如下圖3所示），或者在左右兩側(cè)各放置一條PCR八聯(lián)管（如下圖4所示）平衡熱蓋的壓力，以防止熱蓋壓力導(dǎo)致PCR單管變形。

 

圖3.四個(gè)角落放置PCR管

 

圖4.兩側(cè)放置PCR八聯(lián)管
 

③如實(shí)驗(yàn)后取出PCR管時(shí)出現(xiàn)管蓋被頂開的情況，可在實(shí)驗(yàn)后確保PCR儀降到室溫后再打開熱蓋，這樣就可以避免PCR 管內(nèi)外溫差太大，內(nèi)部氣流把管蓋頂開造成實(shí)驗(yàn)室污染。

這里建議將PCR反應(yīng)最終一步的結(jié)束溫度設(shè)為4度，可以有效避免上述情況哦~
 

PCR管實(shí)驗(yàn)后取出指南

問題現(xiàn)象

由于經(jīng)過長(zhǎng)時(shí)加熱加壓，管體會(huì)變得難以從加熱模塊上取出，這個(gè)時(shí)候如果直接按住管蓋兩端取出，容易出現(xiàn)頭尾開蓋的情況。（如下圖5）

 

解決方法

在取管前，左右輕搖管體（如下圖6），將管體搖松再取下PCR管。

圖6.左右輕搖后取出

也可以選擇前后/管中握住管身取管（如下圖7、8）。

圖7.選擇前/后管

圖8.同時(shí)握住管身后取出
 

Bee仔總結(jié)

以上就是Bee仔此次帶來的PCR管操作指南啦，你平時(shí)實(shí)驗(yàn)中還會(huì)遇到什么問題呢？可以在私信告訴Bee仔哦，下次說不定就給你出個(gè)指南啦~