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產(chǎn)品凍干:預(yù)凍生物制品預(yù)凍方法詳解

瀏覽次數(shù):795 發(fā)布日期:2023-5-16  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

冷凍是冷凍干燥過程的基礎(chǔ)。高效冷凍干燥過程生產(chǎn)需要一種穩(wěn)健的冷凍方法來。
 
產(chǎn)品被放在袋子、托盤、培養(yǎng)皿、試管或其他容器中,以便在冷凍干燥過程中進行處理。也可以放置在冷凍干燥機的凍干支架上,通過控制的溫度變化速率降低架子溫度以受控的方式冷凍產(chǎn)品。有些產(chǎn)品是通過浸泡冷凍的在LN2中,這會導(dǎo)致小的晶體結(jié)構(gòu),因此建議在將材料放入冷凍干燥機后考慮退火步驟。
 
某些情況下,可以將產(chǎn)品放入-80攝氏度的冰箱中冷凍,并儲存一段時間,直到準(zhǔn)備好進行處理。在低溫冷凍柜中冷凍時,應(yīng)注意確保產(chǎn)品以提供一致冷凍的方式始終放置在冷凍柜中整個批次。因此,應(yīng)避免將材料堆疊在一起,并在樣品之間留出空間,以允許對流空氣流動。將產(chǎn)品放入冰箱時,冰箱的溫度應(yīng)始終相同,防止袋子或托盤相互接觸的支架將提供一致的條件,從而使所有材料的冷凍動力學(xué)相同。

冷凍的最終溫度需要在-40℃以下,由于產(chǎn)品的玻璃化溫度,應(yīng)在-60℃~ -80℃。有人認(rèn)為牛心包的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度低于-80℃,臨界溫度為-11.6℃,應(yīng)進行退火處理在-20℃下進行1至3小時。

重要提示: 如果在降低腔室壓力之前產(chǎn)品未完全冷凍,則產(chǎn)品中未冷凍的溶劑可能會起泡并破壞結(jié)構(gòu)。

冷凍的方法和速度產(chǎn)生非常不同的冰晶結(jié)構(gòu)。例如,快速冷凍(> 10 ℃/分鐘)導(dǎo)致小冰晶結(jié)構(gòu),其會阻礙初級干燥階段的升華,而慢速冷凍(1 ℃/分鐘或更慢)導(dǎo)致升華的大冰晶結(jié)構(gòu)友好。對于某些產(chǎn)品,冷凍的初始速度需要很快,以保持pH值,消除產(chǎn)品沉淀,或防止細(xì)胞因冰晶生長緩慢而受損。在這些情況下,增加退火步驟以使晶體尺寸增大,這使得升華蒸汽更容易脫離凍結(jié)結(jié)構(gòu)。專家建議,緩慢冷凍或緩慢冷凍結(jié)合退火導(dǎo)致冷凍干燥后最低的殘留水分含量。

研究冷凍速率和冷凍方法對產(chǎn)品的影響將有助于更好地了解如何進一步改進冷凍方法。

摘要:

-冷凍是冷凍干燥的基礎(chǔ)

-冷凍應(yīng)一致且可重復(fù)

產(chǎn)品應(yīng)以相同的方式放置在冰箱中,以確保持續(xù)凍結(jié)。

-過程控制和驗證對于成功和一致的冷凍干燥至關(guān)重要過程

-快速冷凍會產(chǎn)生小冰晶,從而導(dǎo)致初級干燥速度減慢。

然而,組織可能需要快速冷凍以消除細(xì)胞損傷。

-在產(chǎn)品玻璃化轉(zhuǎn)變溫度以下凍結(jié)

-添加退火以改善晶體結(jié)構(gòu)和一致性
重要提示: 如果在降低腔室壓力之前產(chǎn)品未完全冷凍,則產(chǎn)品中未冷凍的溶劑可能會起泡并破壞結(jié)構(gòu)。


冷凍的方法和速度產(chǎn)生非常不同的冰晶結(jié)構(gòu)。例如,快速冷凍(> 10 ℃/分鐘)導(dǎo)致小冰晶結(jié)構(gòu),其會阻礙初級干燥階段的升華,而慢速冷凍(1 ℃/分鐘或更慢)導(dǎo)致升華的大冰晶結(jié)構(gòu)友好。對于某些產(chǎn)品,冷凍的初始速度需要很快,以保持pH值,消除產(chǎn)品沉淀,或防止細(xì)胞因冰晶生長緩慢而受損。在這些情況下,增加退火步驟以使晶體尺寸增大,這使得升華蒸汽更容易脫離凍結(jié)結(jié)構(gòu)。專家建議,緩慢冷凍或緩慢冷凍結(jié)合退火導(dǎo)致冷凍干燥后最低的殘留水分含量。

研究冷凍速率和冷凍方法對產(chǎn)品的影響將有助于更好地了解如何進一步改進冷凍方法。

摘要:

-冷凍是冷凍干燥的基礎(chǔ)

-冷凍應(yīng)一致且可重復(fù)

產(chǎn)品應(yīng)以相同的方式放置在冰箱中,以確保持續(xù)凍結(jié)。

-過程控制和驗證對于成功和一致的冷凍干燥至關(guān)重要過程

-快速冷凍會產(chǎn)生小冰晶,從而導(dǎo)致初級干燥速度減慢。

然而,組織可能需要快速冷凍以消除細(xì)胞損傷。

-在產(chǎn)品玻璃化轉(zhuǎn)變溫度以下凍結(jié)

-添加退火以改善晶體結(jié)構(gòu)和一致性

凍干曲線
來源:斯沃德(北京)儀器設(shè)備有限公司
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