小鼠尾巴(左)和大鼠尾巴(右)
大鼠尾靜脈注射過(guò)程
一、準(zhǔn)備工作
大鼠固定器,1ml注射器,酒精棉球,醫(yī)用膠帶,加熱裝置等。
二、找準(zhǔn)尾靜脈,并擴(kuò)張血管
大鼠尾靜脈到底是哪條?大鼠尾靜脈組成與小鼠類似,由于兩外側(cè)靜脈血管,最明顯,因此注射一般選擇位于尾巴兩側(cè)的血管,注意是顯青色那條,腹部方向偏紅色的血管是動(dòng)脈。
擴(kuò)張靜脈血管(3種途徑)
1.鑒于尾靜脈細(xì)小并且不明顯,所以在注射之前需要將血管擴(kuò)張,便于注射。
2.將大鼠尾部在45~50℃左右溫水浸浴2-3min,以擴(kuò)張靜脈,軟化角質(zhì);
3.用酒精擦拭血管,可使血管擴(kuò)張,使靜脈血管相對(duì)清晰一點(diǎn),同時(shí)也可軟化表皮角質(zhì);
4.利用紅外線烤燈加熱鼠尾3-5min,使靜脈充盈。
三、大鼠固定
由于大鼠體積較大,尾靜脈注射時(shí),必須使動(dòng)物處于相對(duì)穩(wěn)定狀態(tài)才可操作。
一般是使用大鼠固定器:使動(dòng)物整個(gè)身體置于固定器中,尾巴從固定器孔中露出來(lái),固定器前端是鏤空的小孔,保障動(dòng)物呼吸順暢;并且前端可調(diào)節(jié),根據(jù)動(dòng)物大小適當(dāng)調(diào)節(jié)達(dá)到最合適的部位。
大鼠固定器
注:為了注射方便,可以使動(dòng)物處于側(cè)躺,血管正面向上
四、注射(最關(guān)鍵最困難部分)
1.左手捋順固定尾巴找到尾靜脈,在尾尖向尾根方向3-5cm(距尾尖1/3~1/2段)處酒精擦拭消毒;
2.用1ml注射器穿刺尾靜脈,針尖斜面朝上,針頭與鼠尾保持15-30°的夾角刺入,針尖刺破表皮后,平行進(jìn)針;
3.接著繼續(xù)向尾根部方向進(jìn)針大約1cm停止前進(jìn),稍微回抽,注射器看到有回血比較順暢的流出時(shí)即可開(kāi)始慢慢推注;
4.注射結(jié)束拔出注射器,醫(yī)用膠帶綁上傷口,防止出血。
具體操作如下圖所示:
具體操作步驟,請(qǐng)參考下面視頻:
常見(jiàn)問(wèn)題分析
1. 大鼠尾靜脈注射成功的關(guān)鍵點(diǎn)?
1)提前加熱動(dòng)物尾巴,使靜脈血管看起來(lái)有明顯的擴(kuò)張,易辨別;
2)切記分清尾巴上的靜脈位置,動(dòng)物正常站立情況下,尾巴左右兩側(cè)才是靜脈;
3)穿刺時(shí)一定要準(zhǔn)確刺中靜脈血管,不能橫向刺進(jìn)太多,以免刺穿血管不回血,再注射容易出現(xiàn)鼓包。
4)注射時(shí)的速度應(yīng)慢慢推進(jìn),推注太快容易使動(dòng)物感到不適,會(huì)出現(xiàn)掙扎,容易出現(xiàn)意外狀況。
2. 注射成功的特點(diǎn)?
1)進(jìn)針時(shí),針頭可見(jiàn)回血(如上圖),代表注射到靜脈。
2)注射到靜脈,推液幾乎沒(méi)有阻力。
3)隨著藥液推進(jìn),能清晰看到液體在血管流動(dòng)。
4)藥物注射結(jié)束后,尾巴沒(méi)有明顯的腫脹及藥物溢出。
3. 注射失敗的特點(diǎn)?
1)如果注射到靜脈以外,強(qiáng)行推液,阻力較大;
2)沒(méi)有回血注射時(shí),液體無(wú)法進(jìn)入靜脈而集聚在注射部位,從而導(dǎo)致血管部位腫脹變白;
3)藥物注射出針后,對(duì)于有大量血或者藥液大量滲出,則進(jìn)入體內(nèi)藥量無(wú)法保障;
4)尾部注射部位會(huì)有少量淤血,尾巴顏色變暗并腫脹。
4. 注射位置的選擇?
一般選擇距尾尖1/3處注射,有2個(gè)原因;一是因?yàn)殡S著往根部走,大鼠尾巴的角質(zhì)層增厚,尾靜脈不再那么淺顯;二是若是失敗,同一部位不宜再次注射可以逐步向尾根移動(dòng)。若是技術(shù)很嫻熟,也可以根據(jù)自己經(jīng)驗(yàn)選擇注射位置,因?yàn)槊總(gè)位置的注射力度不同的,需要自己體會(huì)。
5. 如何防止刺入皮下?
很多時(shí)候你覺(jué)得進(jìn)了血管打的卻是皮下,這與進(jìn)針的位置和深度有很大關(guān)系。注射時(shí)既不能偏離血管刺入,也不能刺入太深,這樣容易刺穿血管。刺入血管的手感是稍微不同于刺入表皮的,刺入后看看針頭是否隨尾巴向根部方向與血管平行著移動(dòng);另外需要進(jìn)針深一些,最好是進(jìn)入到?jīng)]過(guò)針頭總長(zhǎng)的三分之二,這樣注射器針頭就平穩(wěn)的在血管里面了。
6. 尾靜脈注射對(duì)大鼠周齡的要求?
大鼠隨著年齡的增長(zhǎng),體重增加,體型增大,同時(shí)尾巴皮膚的角質(zhì)層也開(kāi)始增厚。尾巴慢慢的由清晰可見(jiàn)血管脈絡(luò)的淺色變成顏色發(fā)黃發(fā)暗的黃褐色形成厚厚的角質(zhì)層,靜脈血管脈絡(luò)也不清晰可見(jiàn)了。如下圖為老年鼠的尾巴:
一般大鼠在6-8周時(shí),相對(duì)于年紀(jì)更大的大鼠來(lái)說(shuō)尾巴是比較清晰的,也比較容易靜脈注射。但對(duì)于10周以上的老年鼠,不建議尾靜脈注射,可以考慮其他給藥方式開(kāi)展實(shí)驗(yàn)。
7. 大鼠尾靜脈注射常用于什么實(shí)驗(yàn)?
常用于藥代動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn),急性毒性實(shí)驗(yàn),也可用于注射細(xì)胞病毒等。