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                                當(dāng)前位置 > 首頁 > 技術(shù)文章 > 【Sci Rep IF5.228】iTRAQ技術(shù)研究植物脅迫

                                【Sci Rep IF5.228】iTRAQ技術(shù)研究植物脅迫

                                瀏覽次數(shù):3327 發(fā)布日期:2019-3-4 

                                Comparativeproteomic analysis of the shoot apical meristem in maize between aZmCCT-associated near-isogenic line and its recurrent parent.

                                文獻來源:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/27468931

                                研究背景:ZmCCT,是影響植物光周期反應(yīng)非常重要的一個基因。對于玉米而言,長期光照會延遲其開花的時間。本篇文章是在蛋白質(zhì)組學(xué)層面探討一下玉米種光照周期性的分子機制。

                                樣本來源:頂端分生組織(SAM),來源于ZmCCT-positive株系NIL-cml  vs.  ZmCCT-negative株系H4

                                技術(shù)路線:iTRAQ,三個生物學(xué)重復(fù)

                                技術(shù)路線

                                研究結(jié)果:

                                1. 共鑒定出5259個蛋白質(zhì),386個差異蛋白質(zhì)。這些差異蛋白與能源產(chǎn)生、光合作用、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、抗壓和防御、糖代謝、蛋白質(zhì)代謝功能有關(guān),也包含一些未知功能的蛋白。

                                鑒定蛋白質(zhì)的GO功能分析

                                鑒定蛋白質(zhì)的GO功能分析

                                 

                                差異蛋白質(zhì)的Venn圖

                                差異蛋白質(zhì)的Venn圖

                                2. 在長日照條件下,與H4株系正常的營養(yǎng)生長和生殖生長相比, NIL-cml株系推遲了營養(yǎng)生長和生殖生長。

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                                營養(yǎng)生長狀態(tài)到生殖狀態(tài)蛋白表達分析

                                3. 挑選出52個差異蛋白(由ZmCCT直接或間接誘導(dǎo),與碳水化合物代謝、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、防御反應(yīng)等功能相關(guān))進行蛋白互作分析。

                                蛋白互作分析

                                4. 蛋白層面進行驗證。挑選出3個蛋白,進行WB驗證。

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                                5. 從轉(zhuǎn)錄層面進行研究。挑選出6個代表性基因:histone H2B,ribonucleoprotein A,glycine-rich RNA-binding protein,calmodulin-bindingprotein,malate synthase,14-3-3protein進行qPCR分析。

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                                qPCR檢測結(jié)果顯示,H4株系中(V3-V6階段)ZmCCT基因表達水平較NIL-cml株系低。同時發(fā)現(xiàn)蛋白層面和mRNA層面的表達模式并不完全一致,說明這些蛋白可能存在轉(zhuǎn)錄后修飾。

                                小編心得:本篇是一類很典型的利用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)(iTRAQ)發(fā)表在Scientific Report上的文獻,研究不同脅迫條件下植物組織在蛋白質(zhì)層面的表達,通過目前常見的一系列生信分析(GO、聚類、互作)以及驗證手段(WB,qPCR)獲取可信度較高的特異性(或目標(biāo)性)蛋白質(zhì),為進一步的研究打下基礎(chǔ)。

                                文章結(jié)構(gòu)清晰,框架明顯,簡潔易懂,值得學(xué)習(xí)!
                                 

                                蛋白|修飾|代謝|脂質(zhì)|結(jié)構(gòu)確證

                                www.aptbiotech.com 

                                T: 021-54665263

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                                Q: 1875681852


                                來源:上海中科新生命生物科技有限公司
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