一、產(chǎn)品概述：

產(chǎn)品名稱: ADV-HR（病毒助感染試劑）       產(chǎn)品貨號：FH880805

規(guī)格：1ml（標準規(guī)格）/100ul（贈送規(guī)格）   濃度：1mg/ml 

二、儲存條件：

建議分裝后保存于-20℃，一周內(nèi)使用4℃儲存即可。注意避免反復(fù)凍融！反復(fù)凍融會嚴重影響實驗效果，請予一周內(nèi)使用！

三、產(chǎn)品原理：

ADV-HR(病毒助感染試劑）試劑通過物理吸附將病毒富集在細胞表面，從而增加病毒對細胞的感染效率，起到助感染的效果。

四、產(chǎn)品優(yōu)點：

1、腺病毒、慢病毒感染均可使用；

2、可顯著提高感染效率；

3、與同類型試劑產(chǎn)品相比毒性更低。

五、實驗舉例：

（一）直接加入法（適用于較易感染的細胞類型）

1、進行病毒感染時，將ADV-HR試劑直接加入培養(yǎng)皿/孔/瓶中，混勻即可。

2、后續(xù)操作依病毒類型和實驗需要而定。

（二）孵育法（適用于較難感染的細胞類型）

以6孔板為例：

1、在1.5mL EP管中建立100μL感染體系如下所示：

①ADV-HR                    XuL

         ②病毒                       YμL

         ③細胞懸液           (100-X-Y) μL （含1.0×10⁶個細胞）

 

（其中ADR-HR用量X需參照附2及預(yù)實驗結(jié)果；病毒用量Y需參照病毒滴度及實驗所需MOI。）

用移液器輕輕吹打混勻，于37℃細胞培養(yǎng)箱中孵育0.5-1個小時。

3、用移液器將感染體系中的細胞輕輕懸起，全部轉(zhuǎn)移至預(yù)先加有2mL培養(yǎng)液的6孔板中，37℃、5%CO₂培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4、后續(xù)操作依病毒類型和實驗需要而定。

六、特別注意：

1、高濃度的ADV-HR具有細胞毒性，影響細胞狀態(tài)和感染效率（詳見附2）。我們建議您務(wù)必于目的細胞中進行ADV-HR濃度梯度預(yù)實驗。

2、本試劑僅供與我公司的病毒產(chǎn)品搭配使用，和其他公司產(chǎn)品搭配使用所產(chǎn)生的一切后果均與我公司無關(guān)，本產(chǎn)品的最終解釋權(quán)歸我公司所有。   

附1  ADV-HR使用案例

 

腺病毒感染A549細胞41h后拍攝的熒光圖片：

慢病毒感染CNE2細胞72h后拍攝的熒光圖片：

附2  摸索助感染試劑ADV-HR的使用極值實驗

 

實驗規(guī)模：96孔板(定容至100μL)

ADV-HR濃度：1mg/mL

說明：

1、ADV-HR終濃度在0至1.0×10^-2mg/mL之間對細胞狀態(tài)無影響；

2、ADV-HR終濃度在2.5×10^-2mg/mL時細胞生長緩慢；

3、ADV-HR終濃度在5.0×10^-2至1.0×10^-1mg/mL時細胞呈現(xiàn)明顯破碎， 2.5×10^-1至5.0×10^-1mg/mL時細胞皺縮甚至停止生長。

建議：

1、請在使用ADV-HR前于目的細胞中進行濃度梯度預(yù)實驗；

2、建議ADV-HR的使用濃度不超過2.5×10^-2mg/mL。