Azure Biosystems c系列數(shù)字成像系列產(chǎn)品是行業(yè)領先產(chǎn)品,用戶界面友好、應用靈活。 在本應用中,我們展示了一些可以在c系列家族最新成員Azure Biosystems c280上完成的新應用。
簡介
Azure Biosystems c280數(shù)字成像儀是數(shù)字化學發(fā)光成像的理想切入點。 然而,其優(yōu)點并不止于此,具有雙波長302nm和365nm紫外的c280用于溴化乙錠(EtBr)DNA凝膠的成像;使用EPI藍光LED 用于“安全”DNA染料SYBR Green等的成像;RGB混合白光光源用于考馬斯藍,銀染蛋白膠等的成像。
C280的用戶界面友好,自動聚焦,軟件控制光源和濾光片選擇使成像變得更容易。
材料和方法
DNA凝膠
通過凝膠電泳分離進行系列稀釋的東升生物技術公司100bp Ladder Plus。使用預先EtBr染色的凝膠或用SYBR Green后染色的凝膠,使用紫外透射儀(302nm)或EPI藍光在Azure Biosystems c280數(shù)字成像儀上采集圖像。
考馬斯亮藍染色的凝膠
一系列純化的轉鐵蛋白進行稀釋,使用4-15%的Tris-Glycine凝膠進行稀釋,考馬斯亮藍染料進行染色,使用AzureC280 RGB混合光源進行成像采集成像。
化學發(fā)光+可見彩色Marker成像
純化的轉鐵蛋白經(jīng)過一系列的稀釋從500pg-61fg,使用SDS-PAGE電泳進行分離,蛋白分離后使用Azure轉印buffer轉印到低熒光背景膜上,進行封閉,孵育 chicken-anti-transferrin 的一抗,漂洗,孵育goat-anti-chicken HRP 的二抗;所有的稀釋液使用Azure Chemi Blot Blocking
Buffer.使用Azure Radiance chemiluminescent 底物液,成像使用C280化學發(fā)光模塊進行采集并與彩色marker進行整合。
結果和討論
在這個應用中,Azure Biosystems c280數(shù)字成像儀應用更靈活。 DNA凝膠結果顯示在圖1中 - A)EB使用紫外302nm成像,B)SYBR Green染色的類似凝膠用Epi Blue成像。
圖1.DNA凝膠使用EB和SYBR染料進行染色A)EB染色的凝膠使用UV302nm進行成像 B)SYBR Green染色的DNA凝膠,使用RGB混合白光光源進行成像,圖中方框展示的是78pg的濃度
圖2顯示了代表性考馬斯藍染色的蛋白質凝膠。 Azure Biosystems c280數(shù)字成像儀具有高分辨率CCD,自動圖像采集協(xié)議。 可見成像模式直接獲取彩色圖像,對比更明顯。
圖2:考馬斯亮藍染色的凝膠,純化的轉鐵蛋白經(jīng)過一系列的稀釋從5000ng-5ng,使用4-15%的Tris-Gly凝膠進行分離,使用考馬斯亮藍染液進行染色,方框展示的是10ng的蛋白。
最后,圖3顯示了數(shù)字化學發(fā)光圖像與可見光彩色marker整合圖,允許精確的分子量分析。
圖3.化學發(fā)光-可見光整合成像,純化的轉鐵蛋白經(jīng)過500pg-61pg一系列稀釋,使用化學發(fā)光 western blot進行檢測,C280化學發(fā)光和可見彩色Marker同時成像進行整合。
言之,Azure Biosystems公司的c280是多功能多應用成像儀,可以簡化大量常用的實驗室技術。 以其經(jīng)濟的價格,和易用性,C280化學發(fā)光成像系統(tǒng)是您實驗室理想選擇。