鄧武劍1 朱曼潔1 吳鳳琪2 吳衛(wèi)東2

1.賽默飛世爾科技 2 深圳出入境檢驗(yàn)檢疫局

 

關(guān)鍵詞：食物內(nèi)除害劑殘余規(guī)例；QuEChERS；農(nóng)藥殘留；TSQ 8000 Evo 三重四極桿氣質(zhì)聯(lián)用

 

早在 2012 年 6 月，香港立法會(huì)就已完成審議《食物內(nèi)除害劑殘余規(guī)例》（第 132CM 章）（《規(guī)例》）的程序。有關(guān)規(guī)例于 2014 年 8 月 1 日起正式實(shí)施�！妒澄飪�(nèi)除害劑殘余規(guī)例》列明容許某些食物含有除害劑殘余的最高限量以及一些釋義條文，是供港蔬菜項(xiàng)目必須遵循的法規(guī)以及政策。香港《食物內(nèi)除害劑殘余》規(guī)例（Hong Kong Pesticide Residues in Food Regulation）包含 360 種除害劑以及超過 7000 個(gè)“除害劑- 食物”組合的最高殘留限量/ 最高再殘留限量標(biāo)準(zhǔn)。香港規(guī)例中所包含的除害劑，用GC/MS/MS 和LC/MS/MS 可以檢測(cè)其中95% 以上的化合物。

 

本實(shí)驗(yàn)用 Thermo ScientificTM TSQ 8000 Evo 結(jié)合賽默飛世爾科技農(nóng)殘分析色譜柱（TR-Pesticide II 30 m*0.25 mm*0.25 μm）分析香港規(guī)例中的 101 種農(nóng)藥殘留，得到了非常出色的結(jié)果。各種農(nóng)藥的最低檢測(cè)限在 0.07-2.69 μg/L 之間，在 5-200 μg/L的范圍有良好的線性，且用 10 μg/L 樣品連續(xù) 6 針進(jìn)樣，得到RSD 在 1.51-9.3% 之間，表明此方法具有良好的重現(xiàn)性。

 

質(zhì)譜儀器：Thermo ScientificTM TSQ 8000 Evo 質(zhì)譜儀( 賽默飛世爾科技，美國(guó))；

氣相色譜儀：Thermo ScientificTM Trace 1310 GC 配 AI l310自動(dòng)進(jìn)樣器( 賽默飛世爾科技，美國(guó))；

色譜柱：TR-Pesticide II 30m*0.25mm*0.25 μm 毛細(xì)管色譜柱；

試劑：丙酮、乙腈：色譜純；

 

氣相方法：

柱溫箱：40 ºC 保持 1.5 min，以 25 ºC/min 升至90 ºC，保持 1.5 min，再以 25 ºC/min 升至 180 ºC，以 5 ºC/min升至 280 ºC，最后以 10 ℃ /min 升溫到 300 ℃，保持 5min。進(jìn)樣口：不分流進(jìn)樣，不分流時(shí)間：1.5 min；進(jìn)樣口溫度：270 ºC；載氣：恒流，1.2 mL/min；傳輸線：300 ºC質(zhì)譜方法：離子源溫度為 300 ºC，采用 Acquisition-Timed方法，SRM 掃描，具體檢測(cè)離子對(duì)如表 1 所示：

 

表 1：檢測(cè)化合物列表及 SRM 離子對(duì)信息

 

 

1）樣品制備：取適量的蔬菜樣品于均質(zhì)器中，將蔬菜樣品打碎，均質(zhì)混勻。

2）樣品提取：稱取 10 g 樣品到 50 mL QuEChERS 萃取管中，加入 10 mL 乙腈震蕩混勻，加入 4 g MgSO4、1 g NaCl、1 g 無水檸檬酸三鈉和 0.5 g 檸檬酸二鈉，在渦旋振蕩器上振蕩 2 分鐘，放置于平行搖床上搖 30 分鐘，然后在 5000rpm 轉(zhuǎn)速下離心 5 min。

3）樣品凈化：取上清液，轉(zhuǎn)移到 15 mL QuEChERS 凈化管，凈化管中包括 1200 mg MgSO4、400 mg PSA 和 400 mgC18。旋渦震蕩樣品 1 min，然后在 5000 rpm 轉(zhuǎn)速下離心5 min。取上清液 1 mL 于進(jìn)樣瓶中，直接 GC-MS/MS 分析。

 

按照 2.3 的程序處理白菜樣品，得到空白樣品的基質(zhì)溶液。

 

1）標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：在十萬分之一分析天平上稱取每種農(nóng)藥單標(biāo)化合物 10 mg，加入 10 mL 相應(yīng)的溶劑（根據(jù)不同的化合物加入丙酮、甲苯或者乙腈）溶解，配制成濃度為約 1000mg/L 的溶液。每種單個(gè)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的濃度根據(jù)稱樣量和加入溶劑的體積計(jì)算得到。所有單標(biāo)儲(chǔ)備液在 -20 ℃ 冰箱中冷凍保存。單標(biāo)儲(chǔ)備液的有效期為 6 個(gè)月。

2）混合標(biāo)準(zhǔn)中間液：移取適量的單標(biāo)儲(chǔ)備液，用乙腈稀釋。中間標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的濃度為10.0 mg/mL。中間標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液在-20 ℃ 冰箱中冷凍保存。中間儲(chǔ)備液的有效期為 3 個(gè)月。

3）工作標(biāo)準(zhǔn)溶液：取適量的混合標(biāo)準(zhǔn)中間液，以空白樣品基質(zhì)液（2.4）依次稀釋成濃度為5.0、10.0、20.0、50.0、100.0 和 200.0 μg/L 工作標(biāo)準(zhǔn)溶液。

 

每個(gè)化合物 SRM 質(zhì)譜條件（母離子- 子離子- 碰撞能量）從 TraceFinder 的 CDB 中導(dǎo)出（見表 1），在該條件下運(yùn)行樣品可得到目標(biāo)物的 SRM 色譜質(zhì)譜圖見圖 1。

 

圖 1：標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖（200 μg/L）

 

以 S/N=3 為計(jì)算最低檢測(cè)限，結(jié)果見表 2。圖 2 列出來部分 1 μg/L 的除害劑的色譜圖�？梢钥闯觯�農(nóng)殘的檢出限基本上低于 1.0 μg/L，足以滿足現(xiàn)行國(guó)標(biāo)以及國(guó)際上除害劑檢測(cè)方法的要求，可保證樣品中除害劑的定性與定量檢測(cè)。

 

圖 2：1 μg/L 部分農(nóng)殘的色譜圖

 

配置混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，各濃度分別為：5.0、10.0、20.0、50.0、100.0 和 200.0 μg/L 采用上述方法分別進(jìn)樣分析，考察各組分的線性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明 101 種農(nóng)藥組分在 5.0-200.0 μg/L 線性關(guān)系良好，線性相關(guān)系數(shù)均大于 0.99（見表 2），對(duì)同一樣品連續(xù)進(jìn)樣 6 針，RSD 在 1.51-9.3% 之間，重復(fù)性良好。按照 IUPAC 方法規(guī)定計(jì)算各組分檢出限，各組分檢出限在 0.07-2.69 μg/L 之間（見表 2），基本上滿足現(xiàn)行方法對(duì)于農(nóng)殘分析（檢出限 10 μg/L）的要求。

 

表 2：保留時(shí)間、線性及 RSD% 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

 

本文采用 QuEChERS 前處理- 氣相串聯(lián)質(zhì)譜法（QuEChERS–GC-MS/MS）測(cè)定蔬菜基質(zhì)中的 101 項(xiàng)農(nóng)殘，樣品前處理只需要 60 min 即可完成，無須經(jīng)過繁瑣的人工前處理過程。以快速的 QuEChERS 前處理結(jié)合 Thermo Fisher 的 TSQ 8000 Evo 三重四極桿儀器，為農(nóng)殘分析帶來靈敏度高、準(zhǔn)確性好、方便易用的解決方案�？偠�言之，由賽默飛世爾科技提供的完整工作流程解決方案連同最新開發(fā)的 TSQ 8000 GC-MS/MS 系統(tǒng)為多農(nóng)殘的分析和準(zhǔn)確定量帶來了良好的系統(tǒng)性能。

 

致謝

特別感謝深圳市出入境檢驗(yàn)檢疫局提供檢測(cè)樣品及化合物混標(biāo)，共同完成此篇應(yīng)用文章。