血液腫瘤主要包括各類(lèi)白血病、多發(fā)性骨髓瘤以及惡性淋巴瘤。急性白血病占常見(jiàn)惡性腫瘤的第八位，淋巴瘤也是在前十位，并且發(fā)病率逐年升高，多發(fā)性骨髓瘤的整個(gè)發(fā)病率在血液惡性腫瘤里面占10%。

血液腫瘤發(fā)病急，在傳統(tǒng)的放療、化療、骨髓移植等治療方式下，治療周期長(zhǎng)、費(fèi)用高昂、過(guò)程痛苦，但治愈率卻并不很理想。兒童白血病是兒童發(fā)病率最高的一種惡性腫瘤，近幾年臨床病例數(shù)量更是在逐年上升，已成為兒童腫瘤中的頭號(hào)殺手。因此，血液腫瘤的治療研究是當(dāng)務(wù)之急。針對(duì)血液腫瘤的研究少不了細(xì)胞和動(dòng)物模型的加持。怎么選擇這些工具能夠幫助我們更好的進(jìn)行研究，獲得陽(yáng)性數(shù)據(jù)，發(fā)表論文，申請(qǐng)基金，登上人生巔峰，你有了解嗎？

一、我需要哪種細(xì)胞模型？是否易于操作？

研究過(guò)程中，為了驗(yàn)證基因的功能，我們常常需要做基因操作（過(guò)表達(dá)，干擾或者敲除）。但由于血液腫瘤細(xì)胞懸浮生長(zhǎng)的特性，大大增加了基因操作的難度。慢病毒是一種非常高效的基因操作工具，在大部分懸浮細(xì)胞系中也具有不錯(cuò)的表現(xiàn)。下面幫大家總結(jié)了一些常用血液腫瘤細(xì)胞的特性，以及慢病毒的應(yīng)用情況：

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懸 浮 細(xì) 胞 感 染 小 貼 士↓↓↓

如果細(xì)胞MOI>>100，怎么辦？吉?jiǎng)P對(duì)于難感染的懸浮細(xì)胞，也有辦法：

1. 初級(jí)版：采用離心感染方法，增加病毒感染時(shí)與細(xì)胞的接觸，從而提高感染效率。如將細(xì)胞培養(yǎng)板密封后，用平角轉(zhuǎn)子離心機(jī)1000g離心15min-1h，再放回培養(yǎng)箱中正常培養(yǎng)；

2. 進(jìn)階版：使用GMP級(jí)慢病毒。尤其對(duì)于一些原代分離的細(xì)胞，可通過(guò)使用高純度的病毒減小病毒感染對(duì)細(xì)胞的影響，從而提高感染效率。吉?jiǎng)P擁有國(guó)內(nèi)唯一基因工程載體GMP生產(chǎn)車(chē)間，特殊純化工藝保證臨床級(jí)慢病毒的純度和滴度；

3. 終極版：如果是做CAR-T的老師，還可配合使用吉?jiǎng)P自有專(zhuān)利的CAR-T細(xì)胞感染試劑盒，可保證T細(xì)胞病毒感染效率在40%-80%。

二、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)效果不錯(cuò)，那動(dòng)物實(shí)驗(yàn)怎么做？

穩(wěn)定性、重復(fù)性較好的動(dòng)物模型可在腫瘤基礎(chǔ)性研究和抗腫瘤藥物篩選中發(fā)揮重要作用。血液腫瘤常用的動(dòng)物模型主要有：I皮下移植瘤模型；II血液模型。皮下移植瘤模型較容易建立，易于動(dòng)態(tài)觀察腫瘤的生長(zhǎng)狀態(tài)。血液模型則一般以生存天數(shù)作為觀察終點(diǎn)，用活體成像、病理切片、流式細(xì)胞術(shù)等方法檢測(cè)小鼠骨髓及臟器中的腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)及浸潤(rùn)情況。該模型與白血病患者的病理生理狀況較為接近，但實(shí)驗(yàn)難度較大。

三、體內(nèi)外模型選好了，那么我的實(shí)驗(yàn)需要使用哪種慢病毒載體對(duì)基因進(jìn)行操作呢？

啟動(dòng)子、熒光標(biāo)記、抗性標(biāo)簽是我們選擇載體需要考慮的三大要素。實(shí)驗(yàn)不同，這些元件也需要相應(yīng)變化。按例祭出神圖一張，定制你的專(zhuān)屬載體，就是這么簡(jiǎn)單！

上海吉?jiǎng)P基因化學(xué)技術(shù)有限公司成立于2002年，擁有BSL-2級(jí)別的慢病毒包裝實(shí)驗(yàn)室。病毒生產(chǎn)線通過(guò)ISO9001質(zhì)量管理體系驗(yàn)證，月均定制基因病毒產(chǎn)品包裝超過(guò)1000次。慢病毒生產(chǎn)采用6項(xiàng)QC檢測(cè)、病毒純度分級(jí)純化以及病毒滴度絕對(duì)定量檢測(cè)確保病毒質(zhì)量。

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參考文獻(xiàn)

【1】 T Zhou et al. “Downregulation of Mcl-1 through inhibition of translation contributes to benzyl isothiocyanate induced cell cycle arrest and apoptosis in human leukemia cells.” Cell Death and Disease (2013) 4, e515.

【2】 Xin Huang, et al. “Analysis of the expression of PHTF1 and related genes in acute lymphoblastic leukemia .” Cancer Cell International 2015 15:93.

【3】Wang, Yi, et al. "Downregulation of miR-3940-5p promotes T-cell activity by targeting the cytokine receptor IL–2R gamma on human cutaneous T-cell lines." Immunobiology 221.12 (2016): 1378-1381.

【4】Jian Zhang, et al. “ SUMOylation of insulin-like growth factor 1 receptor, promotes proliferation in acute myeloid leukemia.” Cancer Letters , 2015, 297–306.

【5】Zhen-Hua Chen, et al. “The lncRNA HOTAIRM1 regulates the degradation of PML-RARA oncoprotein and myeloid cell differentiation by enhancing the autophagy pathway .” Cell Death and Differentiation (2016), 1–13.

【6】 Xiuxiu Liu, et al. " Elevated AEG-1 expression in macrophages promotes hypopharyngeal cancer invasion through the STAT3-MMP-9 signaling pathway." ncotarget (2016): 12886.

【7】Guo, Jiang-Rui, et al. "Hepatocyte growth factor promotes proliferation, invasion, and metastasis of myeloid leukemia cells through PI3K-AKT and MAPK/ERK signaling pathway." American journal of translational research 8.9 (2016): 3630.

【8】Lixian Wu, et al. “Dual Inhibition of Bcr-Abl and Hsp90 by C086 Potently Inhibits the Proliferation of Imatinib-Resistant CML Cells.” Clinical Cancer Research 2015.

【9】 Xiaobing Miao, et al. “Overexpression of TRIP6 promotes tumor proliferation and reverses cell adhesion-mediated drug resistance (CAM-DR) via regulating nuclear p27Kip1 expression in non-Hodgkin’s lymphoma.” Tumor Biology 2016, 37, 1, 1369–1378.

【10】Bihui Yang, et al. “SPAG6 silencing inhibits the growth of the malignant myeloid cell lines SKM-1 and K562 via activating p53 and caspase activation-dependent apoptosis.” International Journal of Oncology, 2014, 649-656.

【11】Armen Mardiros, et al. “T cells expressing CD123-specific chimeric antigen receptors exhibit specific cytolytic effector functions and antitumor effects against human acute myeloid leukemia.” BLOOD, 31 . 2013 .122.18.

之前幾期給大家分享了幾種大癌種的體內(nèi)外模型和工具總結(jié)，想再看看的，請(qǐng)戳下面：

1. 肺癌研究體內(nèi)外模型綜述

2. 結(jié)直腸癌研究體內(nèi)外模型綜述

3. 胃癌研究體內(nèi)外模型綜述

4. 肝癌體內(nèi)外模型綜述

5. 胰腺癌研究體內(nèi)外模型綜述

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