使用QPix400系統(tǒng)快速將樣品復(fù)制到瓊脂平板
簡介
使用QPix400系統(tǒng)可以進行常規(guī)的液體樣品相同微孔板之間的文庫復(fù)制(比如從96復(fù)制到96孔板，從384復(fù)制到384孔板)。但是，將文庫樣品從瓊脂平板到瓊脂平板進行固體到固體的復(fù)制方式也是一個很有用的工具，比如可以進行基因抗性的篩選，或者進行酵母雙雜交篩選。本文描述了如何在QPix400系統(tǒng)上面進行文庫復(fù)制操作(Figure 1)，比如將樣品從液體復(fù)制到固體，從固體復(fù)制到固體。
將液體樣品復(fù)制到瓊脂固體平板
將E.coli樣品在含有Amp的10ml LB 培養(yǎng)基中37度過夜培養(yǎng)。然后，分別取100ulE.coli 樣品到標準96孔板。為了完成本次實驗，使用了QPix420系統(tǒng)的復(fù)制重排軟件模塊以及點樣頭模塊(Gridding head)。樣品板含有培養(yǎng)后的液體樣品，目標微孔板為空的瓊脂平板，用于接種樣品板中的樣品。
優(yōu)勢
Figure 1. QPix420系統(tǒng)軟件界面：紅色標記的文庫復(fù)制功能位于QPix420系統(tǒng)復(fù)制功能模塊下面
Figure 2.文庫復(fù)制接種高度設(shè)置：接種高度需要根據(jù)微孔板類型以及瓊脂厚度進行調(diào)整
文庫復(fù)制過程中，設(shè)置合適的接種高度非常重要。對于樣品來源板來說，接種高度要設(shè)置到點樣針頭能夠充分接觸到96孔板中的液體E.coli樣品。對于目標固體平板來說，接種高度要設(shè)置到點樣針頭剛好接觸到OmniTray的L B 瓊脂固體平板(Figure 2)。在文庫復(fù)制操作完成后，在瓊脂平板上可以清晰看到接種樣品的點樣位置痕跡(Figure 3A)。37度培養(yǎng)2天后，可以看到經(jīng)過接種的OmniTray LB瓊脂平板上，E.coli樣品生長良好(Figure 3B)。
Figure 3.完成液體E.coli樣品從標準96孔板復(fù)制到OmniTray LB瓊脂固體平板后OmniTray平板的照片：A）接種完成后，OmniTray平板上可以清晰看到96接種針的樣品位置痕跡。B）同一塊OmniTray平板經(jīng)過37度2天培養(yǎng)后，每一個接種的樣品位置都可以看到明顯的生長后的E.coli克隆，說明文庫復(fù)制操作可以成功將液體E.coli樣品從96孔樣品板轉(zhuǎn)移到OmniTray LB瓊脂固體平板
瓊脂到瓊脂固體平板復(fù)制
為了將OmniTray LB瓊脂平板上的樣品復(fù)制到OmniTray LB瓊脂平板，同樣使用了QPix420系統(tǒng)的文庫復(fù)制模塊和點樣頭模塊。液體到固體復(fù)制同樣的接種高度也可以用于固體到固體復(fù)制的來源板和目標板。來源板含有12*8矩陣樣式的E.coli克隆(如Figure 3B所示)。使用文庫復(fù)制模塊將來源板的克隆接種到另一塊OmniTrayLB瓊脂平板，目標板在接種后可以清晰看到96個接種樣品痕跡。過夜培養(yǎng)后，96個接種樣品點都可以清晰看到生長良好的
E.coli克隆(Figure 4)。這說明QPix420系統(tǒng)可以成功的將來源OmniTray平板上的E.coli克隆轉(zhuǎn)移到目標OmniTray平板上，實現(xiàn)固體到固體平板的克隆復(fù)制。
Figure 4.固體到固體瓊脂平板復(fù)制完成后目標OmniTray克隆圖片。目標OmniTray經(jīng)過37度過夜培養(yǎng)后，96個接種的E.coli樣品都可以正常生長，說明QPix420系統(tǒng)可以成功將OmniTray LB平板上的克隆樣品復(fù)制到目標OmniTray LB瓊脂平板。
結(jié)論
QPix400系列微生物克隆篩選系統(tǒng)可以通過文庫復(fù)制模塊以及點樣頭模塊快速、準確實現(xiàn)液體到固體、固體到固體自動化樣品復(fù)制操作。
